氨杞精口服液对小鼠耐缺氧及抗疲劳作用的实验研究

翟登奎(哈尔滨医科大学附属第一医院，哈尔滨 150001)

近年来，关于加速运动疲劳的消除，促进运动能力恢复的营养品和违禁药物的研究，在运动人体科学领域非常活跃。有研究报道了有关中药配方制剂及单体成分促进机体恢复的作用［1，2］。氨杞精口服液是由天然提取的氨基酸粉(含有20多种天然氨基酸)，加上具有滋补肝肾、益精明目作用的枸杞子及具有补气养阴、健脾、润肺、益肾作用的黄精共同组方，制成纯天然的多功能的免疫制剂［3］。该药主治气血双虚、扶正固本、肝肾不足、脾肾虚弱等各种临床虚症疗效颇佳。临床上适用于各种贫血、白血病、久病体弱、心肌炎、各型肝炎、肝炎后肝硬化、胃及十二指肠溃病、慢性结肠炎、慢性肾炎、慢性气管炎、肺气肿等症，有明显的辅助治疗作用。能提高机体的免疫功能，减轻肿瘤患者因化疗引起的食欲不振、白细胞计数减少等症。本实验从生物学的角度以小鼠为实验动物，研究氨杞精口服液对小鼠耐缺氧、抗疲劳作用的影响。

1 材料与方法

1.1 药品

氨杞精口服液由哈尔滨医科大学第一临床医学院生产提供，批号:20090709。

1.2 实验动物

昆明种小鼠，雌雄各75只，体质量20～25 g，由黑龙江省中医药大学提供。

1.3 仪器

电子分析天平、721分光光度计、全自动生化分析仪、游泳箱(40 cm×55 cm×55 cm)。

1.4 方法

将150只小鼠随机分为3组，每组50只。空白对照组:给予低剂量容积0.9%氯化钠注射液;低剂量组:给予氨杞精口服液 3.2 mL·kg-1;高剂量组:给予氨杞精口服液 6.3 mL·kg-1，qd，连续灌胃30 d后进行抗疲劳及耐缺氧实验。

1.5 负重游泳试验

每组10只小鼠末次灌胃30 min后，尾根部负荷小鼠体质量5%的铅丝，置于游泳箱中，水深32 cm，水温30℃，记录小鼠从游泳开始至死亡的时间。

1.6 耐缺氧实验

每组10只小鼠末次灌胃1 h后，将小鼠逐只放进盛有钠石灰10 g的250 mL密闭的广口瓶中，瓶盖涂以凡士林密封，观察并记录每组小鼠存活时间。

1.7 血清尿素氮测定

每组10只小鼠末次灌胃30 min后，将小鼠放于水温30℃置于游泳箱中游泳90 min，休息60 min，将眼睛周围的水擦拭干净后摘眼球取血，离心取血清测定。

1.8 肝糖原、肌糖原测定

每组10只小鼠末次灌胃30 min后，将小鼠放于水温30℃置于游泳箱中游泳90 min停止，立即处死小鼠取出肝脏及股四头肌，放入液氮罐待测，按试剂盒说明书测定。

1.9 血乳酸的测定

每组10只小鼠末次灌胃30 min后，尾根部负荷小鼠体质量5%的铅丝，将小鼠放于水温30℃置于游泳箱中负重游泳10 min停止，分别从游泳前、游泳之后0 min、游泳之后休息20 min的小鼠眼内眦静脉丛取血20 μL进行乳酸测定。

1.10 指标测定方法

血乳酸、肝糖原、肌糖原、血清尿素氨等试剂盒购自南京建成生物工程研究所，操作按说明书进行。

1.11 统计学分析

2 结果

2.1 氨杞精口服液对小鼠负重游泳、耐缺氧能力实验

低、高剂量组小鼠负重游泳时间均明显长于对照组(P﹤0.05)，表明该样品具有延长小鼠的负重游泳时间的作用;低、高剂量组可以明显延长小鼠在密闭缺氧条件下的存活时间，提高心脑耐缺氧能力，降低组织耗氧量，见表1。

表1 氨杞精口服液对小鼠负重游泳、耐缺氧实验的影响(±s，n=10)Tab 1 Effects of Anqijing oral solution on loaded swimming and hypoxia-tolerance experiments(±s，n=10)

表1 氨杞精口服液对小鼠负重游泳、耐缺氧实验的影响(±s，n=10)Tab 1 Effects of Anqijing oral solution on loaded swimming and hypoxia-tolerance experiments(±s，n=10)

注:与对照组相比:*P﹤0.01note:vs.control group:*P﹤0.01

组别 数目/只 负重游泳时间/s 耐缺氧时间10 606±135 960±150低剂量组 10 682±167 1356±228高剂量组 10 884±173* 1440±386对照组*/s

2.2 氨杞精口服液对小鼠血清尿素氮水平、肝糖原和肌糖原含量的影响

低、高剂量组小鼠游泳90 min，休息60 min后测定的血清尿素氮含量均低于对照组;低、高剂量组小鼠90 min游泳后肝糖原、肌糖原含量均明显高于对照组，差异有显著性(P﹤0.05)，表明氨杞精口服液具有延缓疲劳出现的作用，见表2。

表2 氨杞精口服液对小鼠血清尿素氮水平、肝糖原和肌糖原含量的影响(±s，n=10)Tab 2 Effects of Anqijing oral solution on serum concentrations of BUN，hepatic glycogen and muscle glycogen(±s，n=10)

表2 氨杞精口服液对小鼠血清尿素氮水平、肝糖原和肌糖原含量的影响(±s，n=10)Tab 2 Effects of Anqijing oral solution on serum concentrations of BUN，hepatic glycogen and muscle glycogen(±s，n=10)

注:与对照组相比:*P﹤0.05note:vs.control group:*P﹤0.01

组别 数目/只 血尿素水平/mmol·L-1肝糖原/mg·g-1肌糖原/mg·g -1 10 9.12±0.57 12.1±1.5 1.5±0.9低剂量组 10 8.73±0.62 15.6±4.5 1.7±0.4高剂量组 10 6.69±1.17 22.9±6.2* 2.1±0.7对照组*

2.3 氨杞精口服液对小鼠血乳酸含量的影响

运动后20 min内血乳酸含量分别降低并趋于正常对照组，说明氨杞精口服液具有促进体力性疲劳消除的积极作用。

表3 氨杞精口服液对小鼠血乳酸含量的影响(±s，n=10)Tab 3 Effects of Anqijing oral solution on serum concentration of lactic acid(±s，n=10)

表3 氨杞精口服液对小鼠血乳酸含量的影响(±s，n=10)Tab 3 Effects of Anqijing oral solution on serum concentration of lactic acid(±s，n=10)

注:与对照组相比:*P﹤0.05note:vs.control group:*P﹤0.01

组别 数目/只 游泳前 游泳后10 25.1±4.5 44.5±4.8 30.3±6.7低剂量组 10 23.3±4.6 41.7±5.6 25.7±3.2高剂量组 10 22.9±4.5 35.1±4.1* 22.6±2.70 min 20 min对照组*

3 讨论

氨杞精口服液的主要成分为氨基酸、枸杞、黄精等组成。氨基酸是生命机体的重要物质基础，每个细胞的重要组成部分都要氨基酸的参与，是大分子蛋白质的基本组成单位，是构成动物营养所需蛋白质的基本物质。氨基酸的作用不仅可以合成机体的组织蛋白质，转变为重要含氮化合物，如嘌呤、肾上腺素、甲状腺素等，而且可以氧化分解产生能量，尤其是精氨酸是参与合成肌酸供给ATP能量的重要原料，没有氨基酸就没有生命。枸杞(lycium chinense)是茄科(solanacease)落叶小灌木的成熟果实，是我国传统的中药材，始载于《神农本草经》、《本草纲目》:“枸杞久远，补精气不足，易容颜变白，明目安神，令人长寿”。主要药效成分包括菜碱、多糖、硫胺素、核黄素、胡萝卜素、抗坏血酸等，具有增强免疫、降血糖、造血及保肝作用。黄精(polygonatum sibiricum Red)又名老虎姜，太阳草、鸡头参，是百合科黄精属多年生草本植物的干燥根茎，始载于《名医别录》李时珍引《神仙草芝经》云:“黄精宽中益气，使五脏调和，肌肉充盈，骨髓坚强，其力倍增，多年不老，颜色显明，发白更黑，齿落更生。”其化学成分主要有:黄精多糖、甾体皂苷、蒽醌类化合物、生物碱、强心苷、维生素和多种对人体有用的氨基酸等化合物。以上3种组成成分均具有抗疲劳作用［4-6］。

运动性疲劳即指由机体运动本身所引起的机体生理过程不能持续其机能在一特定水平上和(或)不能维持预定的运动强度的机体运动能力下降的现象［7］。其评价方法主要有2种:运动耐力试验和检测引起疲劳的生化指标的改变［8］。测定机体持续运动直至力竭的时间可以反应机体的耐力，运动耐力是反映机体疲劳最直观的指标，本实验选择了小鼠的负重游泳试验，运动时正是由于生化改变才导致了疲劳感觉的发生，因此本实验选择运动时变化明显、其变化程度与运动负荷和强度一致的4项生化指标作为抗疲劳的评价指标。本实验结果表明氨杞精口服液的抗疲劳作用可能与增加肝糖原、肌糖原的储备有关;其次，乳酸是糖酵解的主要代谢产物，剧烈运动时，机体相对缺氧，糖酵解加快，乳酸大量堆积，导致疲劳。乳酸在体内的积累取决于乳酸的产生与消除速度。因此，减少血乳酸的产生或加快血乳酸的消除，都可延缓疲劳发生和/或加速疲劳的消除。缺氧是一种紧张性刺激，可以引起机体产生各种应激性反应，生命活动中脑和心脏缺氧是小鼠常压缺氧死亡的主要原因。

本实验与其他实验相比:小鼠负重游泳时间要长于枸杞口服液及黄精多糖［5，6］，血尿素氮水平基本接近于枸杞口服液，耐缺氧能力稍高于养正合剂［9］;给予小鼠连续灌胃氨杞精口服液30 d，能延长小鼠的负重游泳时间、耐缺氧时间，增加小鼠的肝糖原、肌糖原的储备量，减少小鼠运动后的血乳酸曲线下面积，对小鼠的血清尿素氮无明显影响，表明氨杞精口服液具有抗疲劳、耐缺氧功能。

［1］ 陈亚东，曹秀兰，田长有，等.高山红景天对小鼠耐缺氧、抗疲劳及耐低温作用的影响［J］.中国中医药科技，2002，9(3):157.

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［3］ 朱宝军，高彦宇，张 昕，等.氨杞精口服液对典型神经衰弱患者人体提前睡眠实验研究［J］.中医药信息，1997，6:37.

［4］ 徐运杰，方热军.支链氨基酸的抗疲劳作用［J］.氨基酸和生物资源，2008，30(1):65.

［5］ 郑莉莉.枸杞口服液抗疲劳与耐缺氧作用的实验研究［J］.甘肃中医学院学报，1999，16(2):18.

［6］ 刘诗琼，秦晓群，李世胜.黄精多糖对小鼠抗疲劳作用的实验研究［J］.中国当代医药，2009，16(10):31.

［7］ 余 谦，李明富，宋开源，等.中医药抗体力性疲劳的整体思辨与应用前景［J］.中国运动医学杂志，2001，20(1):3.

［8］ 韩彦彬，赵 鹏，李 彬，等.虫草片抗疲劳功能的动物实验研究［J］.中国卫生检验杂志，2009，19(11):2498.

［9］ 姜兰琼，周静安.养正合剂对小鼠耐缺氧抗疲劳及耐高低温作用的影响［J］.中医药学刊，2006，24(2):340.