GC-MS法测定松茸中主要脂肪酸的含量
2011-01-29周本宏
刘 刚,王 辉,周本宏
武汉大学人民医院药学部,湖北武汉 430060
松茸(Tricholoma matsutake Sing.)亦称松蕈、松口蘑,是一种珍贵的可食用真菌[1-2],属于口蘑科、口磨属(Tricholoma)的一个种。具有强身、理气、止痛、益肠胃、治疗糖尿病、抗肿瘤等功效[2-3]。松茸在世界上分布范围很广,主要分布于朝鲜、日本、加拿大、美国和北欧国家。在我国主要分布在东北吉林省,西南地区的云南、四川、西藏。松茸香气宜人,菌肉肥厚,味道鲜美,含有大量的蛋白质、氨基酸、维生素、矿物质元素和微量元素,具有很高的营养价值和药用价值[4-5],曾被誉为“食用菌之王”[6]。近年来国内外对松口蘑的研究已有许多报道,大多是有关驯化培养、产品粗加工、资源保护等方面的研究[7-8],但对于松茸脂肪酸方面的研究较少。本文研究了松茸中脂肪酸种类及含量,为进一步揭示其药用和保健作用,更好地开发和利用该植物资源提供科学依据。
1 仪器与试药
岛津GC-14A气相色谱仪(日本),VGMM-7070H质谱仪(英国),索氏提取器;石油醚、氢氧化钠、甲醇、正己烷等试剂均为分析纯,购于武汉博大试剂公司。松茸(购于云南)经武汉大学人民医院张洪教授鉴定为口蘑科、口磨属松茸。
2 方法与结果
2.1 样品制备
取松茸粉末约5.0 g,精密称定,置索氏提取器中,加100 ml石油醚,提取8 h。减压回收石油醚,得到总脂。精密称取总脂约4 mg,加入 1 ml 1.5%NaOH甲醇溶液,振荡 2 min,置于60℃水浴条件下回流30 min,冷却。向甲酯化后的溶液中加0.5 ml左右的蒸馏水,然后用9 ml正己烷分三次萃取,合并萃取液。
2.2 气相色谱条件
色谱柱为SE-54石英毛细管色谱柱 (30 m×0.32 mm),采用程序升温,柱温180℃以2℃/min升温至210℃,再以1℃/min升温至220℃,接着以 10℃/min升温到 250℃,保留 2 min;进样温度 230℃,载气为氮气,进样量 0.2 μl,分流比 25∶1,测定时间共30 min。
2.3 质谱条件
VGMM-7070H质谱仪,分辨率为600,EI电离源,电子能量70 eV,离子源温度200℃,连接器温度为250℃,溶剂延迟 3.5 min,扫描质量范围 50~600 amu,电子倍增器电压1 200 V。
2.4 结果
按照上述实验条件进样,得到松茸脂肪酸气相色谱图,见图1。对总离子流图中各峰经质谱扫描后得到质谱图,通过Xcalibur工作站NIST标准质谱图库进行检索,与文献的质谱数据对照,确认各化合物,按峰面积归一化法计算各化合物在总脂中的相对含量,见表1。
表1 松茸脂肪酸组成Tab.1 Fatty acid compositions ofTricholoma matsutakeSing.
笔者将松茸中脂肪酸的含量与其他几种口蘑属真菌做比较[9](表2),几种口蘑属真菌脂肪酸中不饱和脂肪酸的含量都在65%以上,松茸不饱和脂肪酸的含量达到85.3%。
3 讨论
由实验结果可以看出,松茸中油酸的含量非常高,而亚油酸的含量不到油酸含量的一半,与其他几种同属真菌有较大差异,虽然这一特性对脂肪含量较低的松茸营养价值评价并不重要,但是亚油酸和油酸的比值却是区别同属不同种植物的一个重要参数,对植物分类具有重要意义。需要指出的是,在真菌脂肪酸的研究中,还没有发现奇数碳原子的脂肪酸,具体原因还有待进一步研究[10]。
此外,松茸中不饱和脂肪酸的含量远远高于饱和脂肪酸,这与文献报道的不饱和脂肪酸在食用菌脂肪酸中占绝对优势的结论一致[11]。其中油酸、亚油酸和棕榈酸的含量占脂肪酸的93.4%,而肉豆蔻酸、棕榈油酸和硬脂酸的含量非常低。油酸、亚油酸等可有效地清除人体血液中的垃圾,延缓衰老,还有降低胆固醇的含量和血液黏稠度,预防高血压、动脉粥样硬化和脑血栓等心脑血管系统疾病的作用[12]。
从松茸脂肪酸的组成与含量分析来看,松茸具有较高的营养价值和医疗保健功效,有较高的开发价值,本研究结果将为松茸的药用、食用等方面的进一步开发利用提供科学依据。
表2 菌类脂肪酸组成比较(%)Tab.2 Comparison of fatty acids compositions of mushrooms
[1]刘培贵,袁明生,王向华,等.松茸松口蘑群生物资源及其合理利用与保护[J].自然资源学报,1999,14(3):245-252.
[2]周选围.松茸资源研究概况[J].食用菌学报,2002,9(1):50-56.
[3]郭爱莲.珍贵食用菌松茸的研究概况[J].西北轻工业学院学报,1996,14(3):111-114.
[4]Gang L,Hui W,Benhong Z,et al.Compositional analysis and nutritional studies of Tricholoma matsutake collected from Southwest China[J].J Med Plant Res,2010,4(12):1222-1227.
[5]刘刚,王辉,周本宏.松茸氨基酸含量的测定及营养评价[J].中国食用菌,2007,26(5):51-52.
[6]刘萍,陶文沂,尹光耀,等.松口蘑及其活性物质研究进展[J].食用菌报,2001,8(4):54-58.
[7]傅禄敏.松口蘑的研究热点[J].食用菌学报,2003,10(3):49-50.
[8]Gurein L,Alexis V,Lu M,et al.Growth stimulation of a Shimlike,mycorrhiza forming,mycelium of Tricholoma matsutake on solid substrates by nonionic surfaetants or vegetable oil[J].Mycological Progress,2003,2(1):37-44.
[9]Senatore F,Dini A,Cerri R,et al.Chemical constituents of some Tricholomataceae[J].Biochem Syst Ecol,1987,15:639-641.
[10]Senatore F.Fatty acid and free amino acid content of some mushrooms[J].J Sci Food Agr,1990,51:91-96.
[11]Kalac P.Chemical composition and nutritional value of European species of wild growing mushrooms:A review [J].Food Chem,2009,113:9-16.
[12]胡锐,李宝莉.传统药物中脂肪酸的药理活性和现代研究[J].中外医疗,2008,(27):135-136.