黑龙江省野生松杉灵芝驯化培育试验

2011-01-25马凤张跃新闫宝松

中国林副特产 2011年3期

马凤,张跃新,闫宝松

(黑龙江省林副特产研究所,黑龙江省非木林产品研发重点实验室,牡丹江 157011)

松杉灵芝具有较高的营养价值和药用价值,是一种珍贵的野生药用真菌,主要分布于黑龙江、吉林、甘肃等省。野生松杉灵芝收购价格很高,每年子实体发生期,人们象“淘金”一样寻找,盲目采摘,致使野生资源遭到破坏,资源储量锐减,濒临危机,因此,迫切需要进行松杉灵芝驯化培育,提高产量。

1 材料与方法

1.1 野生松杉灵芝采集与菌种分离

野生松杉灵芝采自黑龙江省狮子桥林场,子实体生长在落叶松伐桩上。选取新鲜尚未完全成熟的子实体及子实体采摘后基质作为分离材料,用75%酒精消毒后置于无菌室内超净工作台上,在无菌条件下进行菌种分离。分离部位:A、菌柄与菌盖连接处;B、菌盖中部;C、菌盖边缘生长点处;D、基质菌丝。分离方法:切取松杉灵芝菌肉组织块及菌丝接种在PDA斜面培养基上,分别接种20支,置于23～25℃条件下暗光培养。每隔2d检查 1次,挑出污染和菌丝不正常的试管。观察并记录菌丝萌发时间、菌丝长速、菌丝色泽、菌丝浓密度及污染率。选择菌丝生长速度快和生长势旺盛的试管菌种,挑取菌落边缘菌丝接种于改良的PDA斜面培养基上,纯化并扩繁出优良母种备用。

1.2 松杉灵芝菌丝在不同木屑培养基上生长试验

培养基配方1:落叶松木屑78%、麦麸20%,白糖1%、石膏0.5%,白灰0.5%;

配方2:阔叶木屑78%、麦麸20%,白糖1%、石膏0.5%,白灰0.5%。

菌种制作方法:将原料按配方混合后加清水拌匀,调节培养料含水量为60%左右,装入500mL葡萄糖瓶内,每瓶装湿料重700g,装瓶要求松紧一致,装料至瓶肩处,将料面压平,清洗瓶壁外沾染的培养基,打孔后塞好棉塞,在0.14MPa、125℃条件下灭菌2h,冷却至室温后接种,接种后于25℃恒温条件下暗光培养,定时记录菌丝萌发时间、日均长速、菌丝色泽、菌丝长势、菌丝浓密度及污染率。试验重复3次。

1.3 栽培试验

培养基配方1:落叶松木屑78%、麦麸18%,玉米面3%、石膏0.5%,白灰 0.5%;

配方2:阔叶木屑78%、麦麸18%、玉米面3%、石膏0.5%,白灰0.5%。

栽培种制作:制作时间为1月上旬,按照配方比例配制培养料,培养料含水量60%。栽培袋规格为17cm×33cm×0.045cm的聚乙烯塑料袋。每袋装湿料重1～1.1kg,高压灭菌维持2～2.5h,灭菌后待温度降至60℃后取出,冷却至室温接种,接种后置于25℃暗光培养。经过45～60d的培养,菌丝长满菌袋。5月20日进行栽培出芝试验。栽培出芝在塑料棚内进行。采取畦床式覆土栽培法。畦床宽1.2～1.5m,床间距0.4m,剥去塑料袋,将菌柱紧密摆放在畦床内,然后覆盖2cm厚的砂壤土,保持土层湿润。棚内温度控制在20～28℃,空气的相对湿度应保持在70%～90%,经常通风,保持空气新鲜。

2 结果与分析

2.1 松杉灵芝分离试验结果

表1 松杉灵芝不同分离部位菌丝生长情况

由表1可知,不同分离部位对松杉灵芝菌丝生长影响显著,除菌丝色泽为白色至黄褐色相同外,A分离的菌丝各项指标均优于B、C、D分离得到的菌丝,A分离得到的菌丝萌发时间最短为3d,菌丝日均长速最快达1.2 cm/d,菌丝浓密粗壮,且污染率低,B、C、D分离得到的菌丝萌发时间较长,生长速度较慢,菌丝较密,且污染率高。因此,松杉灵芝最佳分离部位为A,即菌柄与菌盖连接处是分离最佳部位。

2.2 松杉灵芝菌丝在不同木屑培养基上生长试验结果

表2 不同木屑培养基对松杉灵芝菌丝生长的影响

由表2可知,松杉灵芝菌丝在不同木屑培养基上均能正常生长,菌丝生长较快,长势较强。除萌发时间相同外,配方1比配方2具有明显优势,配方1菌丝日均长速快,颜色白,菌丝长势强,菌丝浓密,且污染率较低,因此,落叶松木屑培养基比阔叶木屑培养基更适宜松杉灵芝菌丝生长,是松杉灵芝最佳培养基选择。

2.3 栽培试验结果

表3 不同木屑培养基对松杉灵芝出芝影响结果

由表3可知,松杉灵芝在不同木屑培养基上均能正常生长,通过常规栽培出芝管理方式,当年没有形成灵芝子实体,菌丝体经过自然温度越冬后,进行常规出芝管理,第二年6月形成原基,长成子实体。落叶松木屑和阔叶木屑作为栽培原料,除子实体形状、孢子颜色相同外,配方1比配方2具有明显优势,配方1原基形成时间快,芝体成熟时间短,最大单个子实体干重达56g,生物学转化率高,孢子形成多,因此,落叶松木屑培养基比阔叶木屑培养基更适宜松杉灵芝子实体生长,是松杉灵芝理想的栽培原料。