时间对三种食用菌总糖含量测定的影响

徐显利,吴玉堂,田晓蕾

(黑龙江农业经济职业学院,黑龙江 牡丹江 157041)

食用菌是可供人们食用的大型真菌,且是一种药食两用价值很高的菌类,其食味独特,营养丰富,具有祛湿、利尿、健脾胃、明目、抗衰老、降低胆固醇、提高机体免疫力、防癌和抗癌的特殊功能,还可治疗头晕、头痛、腹泻、呕吐等症。食用菌因其多方面的作用及其独特的口味,越来越受到人们的喜爱。本文采用苯酚-硫酸法对猴头菇、真姬菇、茶薪菇三种食用菌中的总糖含量进行测定,其测定原理为食用菌中水溶性糖和水不溶性糖经盐酸溶液水解后转化成还原糖,水解物在硫酸的作用下,迅速脱水生成糖醛衍生物,并与苯酚反应生成橙黄色溶液,反应产物在490nm处比色,定量。本文同时又对超声波提取时间及水浴回流时间对总糖含量测定的影响进行探索。

1 仪器与材料试剂

1.1 仪器:CAV264C型电子天平(上海奥豪斯仪器有限公司),GZX-9140MBE型数显鼓风干燥箱(上海博讯实业有限公司医疗设备厂),T6新世纪紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司),植物样品粉碎机,斡旋振荡器,电热恒温水浴锅、超声波清洗器。

1.2 试剂:浓盐酸、浓硫酸、5%苯酚溶液、0.1mg/mL葡萄糖标准溶液、

1.3 材料:猴头菇、真姬菇、茶薪菇均采自黑龙江农业经济职业学院食用菌基地

2 测定方法

2.1 试样的制备

取鲜样用手撕或刀切成小块,50℃鼓风干燥,待样品半干后再逐步升温至80℃,烘至发脆后在干燥器内冷却,立即粉碎。粉碎样品过80目筛子。未能过筛部分再次粉碎或经研钵研磨后再次过筛,直至全部样品过筛为止。

2.2 总糖供试品溶液制备及标准曲线的绘制

2.2.1 总糖供试品溶液的制备。准确称取三种试样各0.5g,将试样小心倒入 250mL锥形瓶中,加 50mL水和15 mL浓盐酸。装上冷凝回流装置,置100℃水浴及超声波中水解,水解时间分别设定为2h、3h、4h。冷却至室温后过滤。再用蒸馏水洗涤滤渣,合并滤液及洗液,用水定容至250mL,此溶液即为试样总糖测试液。

2.2.2 总糖测定标准曲线的绘制。分别吸取0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL 的 0.1mg/mL 葡萄糖标准溶液至10mL具塞刻度试管中,用蒸馏水补至1.0mL。向试管中加入 1.0mL 5%苯酚溶液,然后快速加入5.0mL浓硫酸,反应液静止放置10min。使用斡旋振荡器使反应液混合,然后将试管放置于30℃水浴锅中反应20min。取适量反应液于分光光度计490nm处测吸光度值。

2.2.3 样品测定。准确吸取试样总糖测试液0.2mL于10mL具塞试管中,用蒸馏水补至1.0mL,按上述标准曲线绘制方法操作,以空白溶液调零,测吸光度值,绘制总糖标准曲线(如上图),以标准曲线换算总糖含量。

3 测定结果

表1 不同处理时间的吸光度变化

表2 不同处理时间的总糖百分含量 %

4 结论

有以上两个表可知,提取时间对总糖测定有一定的影响,在一定范围内,总糖含量随提取时间的增长而增多,以提取3h为宜,而相同的处理时间超声波提取效果次于水浴回流。所以食用菌总糖含量测定以水浴回流3h为最佳。

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