氯诺昔康凝胶剂的研制

马君一，刘焕美，顾一珠

(1.山东大学 威海分校 海洋学院 08级药学，山东 威海 264209;2.山东大学药学院，山东 济南 250012;3.山东大学 齐鲁医院 药学部，山东 济南 250012)

氯诺昔康凝胶剂的研制

马君一1，刘焕美2，顾一珠3

(1.山东大学 威海分校 海洋学院 08级药学，山东 威海 264209;2.山东大学药学院，山东 济南 250012;3.山东大学 齐鲁医院 药学部，山东 济南 250012)

目的 制备氯诺昔康凝胶剂，考察其体外经皮渗透性。方法 采用紫外分光光度法测定氯诺昔康的表观溶解度和油水分配系数，采用Franz扩散池考察载药凝胶剂的体外经皮渗透性，以6 h累积渗透量为指标，采用正交试验设计筛选最佳处方，探讨了卡波姆浓度、氮酮及丙二醇用量对氯诺昔康凝胶剂经皮渗透的影响，并考察其局部刺激性。结果 氯诺昔康在水、pH 6.8和pH 7.4磷酸盐缓冲液中的表观溶解度分别为8.65，86.0和324.0 μg/mL，油水分配系数为1.52;正交试验优化的最佳处方为:含0.75%卡波姆、30%丙二醇、4%月桂氮卓酮。制备的凝胶剂外观细腻，黏度适宜，pH值为6.8～7.0，体外经皮渗透实验结果符合零级动力学方程，家兔各涂药部位无水疱、疹块、红肿等现象。结论 氯诺昔康凝胶剂制备工艺简单，质量可控。

氯诺昔康;凝胶剂;经皮扩散;表观溶解度;油水分配系数

氯诺昔康(Lornoxicam，LNXC)是由Nycomed公司开发的一种新型昔康类非甾体类抗炎药，于1997年10月首次在丹麦上市(商品名Xefo)［1］。LNXC治疗骨关节炎(OA)具有双重作用。既能达到镇痛和抗炎的目的又能减少关节炎的破坏，防止骨变性，修复受损关节。目前市售LNXC有片剂和注射剂两种剂型，常存在胃肠道反应［2］。本文研制了经皮给药的LNXC凝胶剂，以提高局部药物浓度，避免胃肠道毒副作用。

1 材料

UV-2102PCS型紫外—可见分光光度计，上海尤尼柯仪器有限公司;NDJ-8S数显黏度计，上海天平仪器厂。

LNXC，常州市湖滨医药原料有限公司;卡波姆-940，上海人民制药厂;其它试剂均为市售分析纯。

昆明种雄性小白鼠、家兔，山东大学动物实验中心，合格证号:SCXK(鲁)20090001。

2 方法

2.1 LNXC表观溶解度的测定

分别量取水、pH 6.8和 pH 7.4的 PBS各200 mL置250 mL磨口锥形瓶中，加过量LNXC，加塞密封，置于磁力搅拌器上，水浴温度(37±0.5)℃，转速300 r/min，分别于 2，6，8，12，24，48 h 取样过滤，精密吸取续滤液，分别用相应的介质定量稀释数倍后，在376 nm波长处测定A值，代入标准曲线方程［3］计算表观溶解度。

2.2 LNXC油水分配系数的测定

量取正辛醇50 mL及pH 7.4的PBS 100 mL，于带塞锥形瓶中，置于37℃恒温振荡器中震荡24 h，于分液漏斗中静置过夜，分层，分离已饱和的水相和油相。精密称取LNXC适量，加至水相(已用油相饱和)中，配成一定浓度的药物溶液。分别精密量取上述药物的pH 7.4的 PBS 4 mL与正辛醇(已用水相饱和)4 mL于10 mL离心管中，置37℃恒温振荡器中振荡24 h，取出，离心，取下层水相，于376 nm波长处测定A值，计算pH 7.4 PBS中的药物质量浓度，推算出正辛醇中的药物质量浓度，计算油水分配系数。

2.3 LNXC凝胶剂的制备

将处方量的卡波姆洒于甘油表面，使其充分浸润，然后加入适量水，使其充分溶胀，加入适量三乙醇胺调pH至7.2，混匀得空白凝胶。精密称取处方量的LNXC于研钵研磨均匀后，将其加入空白凝胶研磨均匀，再加入渗透促进剂氮酮与丙二醇与羟苯乙酯，继续研磨，补加水至处方量，混匀即得LNXC凝胶剂。

2.4 正交试验设计优化处方组成

［4-5］，结合预试验结果，在单因素考察基础上，以6 h体外累积经皮渗透量为评价指标，选择卡波姆用量、氮酮浓度、丙二醇浓度3个因素，每个因素选择3个水平，按L9(3)4正交试验设计，优化最佳处方组成。

2.5 LNXC凝胶剂体外经皮渗透实验

2.5.1 离体小鼠皮肤的制备 取昆明种小白鼠处死，将腹部毛去除干净，剥离腹部皮肤，去除皮下和脂肪组织，用pH 7.4 PBS浸泡冲洗干净后，冰箱冷藏，备用。实验前仔细检查鼠皮的完整性，不得有任何损伤。

2.5.2 体外经皮渗透实验 将皮肤置于扩散池口，角质层面向上，真皮层向下，接受池中加满pH 7.4 PBS(6.5 mL)，样品室加入凝胶剂(相当于含LNXC 1 mg)，与皮肤紧密接触，不留空腔，于(37±1)℃，400 r/min恒温恒速搅拌，在规定时间点将吸收液全部取出(同时补充等量pH 7.4 PBS)。于376 nm波长处测定A值［3］，计算累积渗透量。

2.6刺激性试验

取2.5～3.0 kg的健康家兔6只，在每只家兔脊柱两侧对称处剃毛，面积约为3 cm×3 cm。24 h后将空白凝胶和含药凝胶剂各1 g，分别均匀涂在家兔背部剃毛处，24 h后观察各涂药部位有无水疱、疹块、红肿等现象。

3 结果

3.1 表观溶解度和油水分配系数测定结果

pH对LNXC的表观溶解度的影响结果见图1。在 pH 7.4 PBS，pH 6.8 PBS和水中的溶解度分别为(324.0 ±32.5)，(86.1 ±8.3)，(8.65 ±0.56) μg/mL。根据此表观溶解度，我们选取pH 7.4 PBS作为体外释放与渗透试验的溶媒，保证漏槽条件。药物的油/水分配系数是影响药物经皮吸收的主要因素之一。一般认为log P接近1～4间有较好的渗透系数。测得LNXC的油水分配系数为(1.52±0.49)，渗透系数较好，适合于透皮吸收，具有制备成良好透皮制剂的潜质。

图1 LNXC 在 pH 7.4 PBS(-▲-)、pH 6.8 PBS(-◆-)和水(-■-)中的表观溶解度(n=3)Fig.1 The plot of apparent solubility pH 7.4 PBS(-▲-)，pH 6.8 PBS(-◆-)and water(-■-)(n=3)

3.2 正交试验结果

根据L9(3)4正交试验表设计实验，以6 h累积渗透百分率为评价指标，筛选最佳处方组成，正交试验的结果见表1。

表1 正交设计试验的方案和结果Tab.1 Scheme and results of orthogonal design

极差R反映各因素对指标影响的程度，极差R值越大，影响程度越大。本实验三个因素R值排列为A＞C＞B;由综合平均值的大小选取各因素的最佳水平组合:综合平均值越大，水平越优，各因素的最优水平组合在一起就是最佳实验组合。本实验三个因素分析结果为:A:3＞2＞1;B:2＞3＞1;C:1＞2＞3，0.5%卡波姆浓度太低做成制剂黏度太小，不宜粘附于皮肤上，故选择0.75%卡波姆。但是B因素中的2和3水平相差不大(P＞0.05)，与单因素考察中的结果一致，所以我们同时制备了两个处方:即A3B3C2和A3B2C2，并同时考察这两个处方的体外渗透性，实验证明丙二醇浓度30%较20%的释放要好，所以我们选取的最佳组合为A3B3C2，即处方组成:氮酮4%，丙二醇30%，卡波姆0.75%。

3.3 LNXC凝胶剂的体外渗透试验结果

按优化处方制备3批样品，测定LNXC凝胶剂24 h的累积经皮渗透量，以累积释放百分率(Q)对时间(t)作图，得LNXC的体外经皮渗透曲线(见图2)，对释放曲线进行数学模型拟合，结果见表2。

图2 LNXC凝胶体外渗透曲线(以小鼠皮为屏障)(n=3)Fig.2 Release kinetic profile of LNXCgel with optimum formulation across mouse skin(n=3)

表2 数学模型拟合结果Tab.2 Results of mathematical model fitting

由LNXK凝胶体外经皮渗透(以小鼠皮为屏障)试验数据分析可知，0～6 h内符合零级动力学(r=0.999 0)，6 h以后经皮渗透释放趋缓，渗透到60 h，渗透曲线符合 Weibull方程(r=0.994 8)，与一般脂溶性药物的体外释放规律基本一致。LNXK的油水分配系数1.52，水溶性不好，但在pH 7.4的PBS中溶解度较大，说明有在皮肤有较好的吸收，且能满足凝胶剂制备的要求。

刺激性试验结果表明，家兔涂药部位均无水疱、疹块、红肿等现象出现，与空白基质比较无差异。

4 讨论

LNXK在376 nm波长处有最大吸收峰，凝胶剂基质在该波长处几乎无吸收，因此，本文处方和工艺研究过程中选择紫外分光光度法测定凝胶剂中LNXK 的含量［3］，该法简便、快速，但灵敏度、专属性较HPLC法差，在制定凝胶剂质量标准时还应该选择灵敏度较高的方法。

卡波姆有很强的吸湿性，在水中溶胀，但成团块者难以溶胀，未溶胀的经碱中和后会形成白色半透明状物，影响成品质量。处方中加入甘油既可促进卡波姆浸润溶胀，又能起到保湿的作用。此外先用甘油浸润研磨卡波姆可防止表面凝胶化，再加适量水让卡波姆溶胀，可使成品细腻［6］。在制备凝胶的过程中，尽量避免气泡的产生，随着卡波姆浓度的增加，较易产生气泡，且不易消除，卡波姆浓度低的凝胶剂不易产生气泡，经搅拌后也易消除，但黏度过小，流动性变大，黏性降低，不宜涂抹在皮肤上。综合考虑各类因素选取了0.75%浓度的卡波姆用量，气泡较易消除，黏度适中，方便使用。

初步稳定性试验结果表明，本品耐热、耐寒，3个月加速试验，外观、含量等均无明显变化，初步临床试验也取得较好的疗效［3］。

参考文献:

［1］黄 莉，李 娟，王 业，等.替诺昔康凝胶剂的制备及其经皮吸收研究［J］.中国药学杂志，2005，40(23):1807-1810.

［2］Tang H B，Atsuko I，Kyokoo，et al.Zaltoprofen inhibits Bradykinininduced responses by blocking the activation of second messenger signaling cascades in rat dorsal root ganglion cells［J］.Neuropharm，2005，48:1035-1042.

［3］马君一，刘焕美，顾一珠.氯诺昔康凝胶剂的制备与临床应用［J］.齐鲁药事，2011，30(3):152-154.

［4］陆 彬.药剂学［M］.北京:中国医药科技出版社，2003:280.

［5］郭 宏，聂淑芳，杨星钢，等.奥沙普秦凝胶剂处方筛选及稳定性研究［J］.中国药学杂志，2006，41(10):759-762.

［6］张又才，刘大发，曾庆岳.凝胶基质中卡波姆溶胀方法的改进［J］.中国药师，2003，6(1):58.

Development of Lornoxicam gel

MA Jun-yi1，LIU Huan-mei2，GU Yi-zhu3
(1.Marine School，Shandong University at Weihai，Weihai 264209，China;2.Pharmaceutical School，Shandong University，Jinan 250012，China;3.Department of Pharmacy，Qilu Hospital，Shandong University，Jinan 250012，China)

Purpose To prepare Lornoxicam gel and to study its release and permeation ability in vitro.Methods The apparent solubility and oil-water partition coefficient of drugs were determined by UV method.The permeation in vitro was carried out by a two-compartment diffusion cells with mouse skin and cellophane as barriers.By taking its 6-hour accumulative penetration amount as index the factors such as the concentration of carbomer，azone，propylene glycol were investigated by an orthogonal design，and thus the best formula could be obtained.The local irritative response of Lornoxicam gel were also measured.Results The apparent solubility of Lornoxicam was 8.65 μg/mL in distilled water and 86.0，324.0 μg/mL in phosphate buffered solution with pH values of 6.8，7.4 and its oil-water partition coefficient was 1.52.The optimal formulation of Lornoxicam gel contained 0.75%carbomer，30%propylene glycol and 4%azone.The gel had suitable viscosity and pH was 6.8-7.0.The process of percutaneous permeation of Lornoxicam gel in vitro conformed to zero order equation.No irritation reactions like blister，rash，redness and swelling occurred in the skin after applying Lornoxicam gel.Conclusion Lornoxicam transcutaneous gel can be prepared simply.Its quality is controllable.

Lornoxicam;gel;transcutaneous;dissolubility;oil-water partition coefficient

R944

A

1005-1678(2011)04-0297-04

2010-12-31

山东省科技厅科技攻关项目(2007GG30002023)

马君一，男，本科生，E-mail:jazzy941@163.com;顾一珠，女，通信作者，硕士，副主任药师，主要从事医院制剂技术研究，E-mail:yizhu.521@163.com。