垂盆草不同提取物对小鼠移植性肿瘤抑制作用的初步研究

李 清,刘 姣,曹秀莲,由会玲

(河北医科大学中医学院,河北石家庄 050091)

垂盆草不同提取物对小鼠移植性肿瘤抑制作用的初步研究

李 清,刘 姣＊,曹秀莲,由会玲

(河北医科大学中医学院,河北石家庄 050091)

初步观察垂盆草不同提取物的抗肿瘤药效。采用小鼠S180肉瘤模型及小鼠S180腹水癌模型,分别用垂盆草水提物、垂盆草醇提物灌胃给药,连续8天,测定腹水瘤小鼠的生命延长率及实体瘤小鼠的瘤重。实验结果显示,垂盆草水提物、垂盆草醇提物对小鼠S180肉瘤的生长有明显抑制作用,肿瘤重量明显减轻。对小鼠S180腹水瘤小鼠生存天数亦有明显延长作用。说明垂盆草对小鼠移植性肿瘤具有抑制作用,为进行临床应用和深入的基础研究提供了依据。

垂盆草,S180,荷瘤小鼠

垂盆草(Sedum sarmentosum Bunge),系景天科多年生草本植物,分布于全国大部分地区,新鲜或干燥全草入药,是一味民间流传极广的常用草药。此药性凉,味甘、淡,具有清利湿热、解毒功效,主要用于治疗湿热黄疽、小便不利、痈肿疮疡,现代药理研究表明其具有抑制炎性渗出,减少肝细胞损伤,降低血清丙基酸氨基转移酶水平的作用,临床广泛用于治疗急、慢性肝炎。同时,垂盆草也是一常用抗癌中药,中医认为其具有败毒抗癌、消炎退肿之功,在肝癌、肺癌、鼻咽癌等肿瘤疾病的治疗中均作为主药应用于临床,但目前对其抗癌作用的基础研究鲜见报道,本实验对其抗癌作用进行初步研究,为临床使用提供理论依据。

1 药品与试剂

垂盆草干品,由石家庄乐仁堂提供。垂盆草提取物(Extract of Sedum sarmentosum Bunge ESB)的制备:醇提物(ESB-Ⅰ):将400g药材常规加工粉碎后,用70%EtOH回流提取2次,每次1h,合并提取液。提取液一部分用旋转蒸发仪浓缩至无醇味,置冰箱备用。水提物(ESB-Ⅱ):垂盆草250g,加水至没过药面加热,水沸后煎煮20min,趁热过滤,蒸发浓缩,置冰箱备用。注射用环磷酰胺(0.2g/支),江苏恒瑞医药股份有限公司,批号10051521。

2 动物

KM小鼠,清洁级,18～22g,♂,由河北省实验动物中心提供。实验动物使用许可证号SCXK (冀)2008-1-003。合格证编号903169。小鼠S180腹水瘤株由河北医科大学实验动物学部提供。

3 实验方法与结果

3.1 剂量设计

根据药材的临床用药剂量(人临床用量15～30g/d,取20g),由剂量换算公式折算成小鼠剂量,作为小鼠的给药低剂量,即低剂量为3.33g生药/kg。高剂量为6.67g生药/kg。

3.2 对小鼠S180实体瘤的影响

取荷瘤鼠(为昆明种小鼠,腹腔接种S180腹水瘤7d,购自河北医科大学实验动物中心),颈椎脱臼处死,无菌条件下抽提腹水,接种于6只小鼠腹腔内,1m L/只,使其传代,然后取腹腔内接种9d,生长良好的腹水型S180荷瘤小鼠,颈椎脱臼处死,无菌条件下抽取S180瘤液,以生理盐水作1:2稀释,于小鼠右腋皮下接种0.2m l/只,8h后,随机分为6组,每组10只,分别为模型对照组、垂盆草水提物低剂量组(3.33g生药/kg)、垂盆草水提物高剂量组(6.67g生药/kg)、垂盆草醇提物低剂量组(3.33g生药/kg)、垂盆草醇提物高剂量组(6.67g生药/kg)及阳性药环磷酰胺组(40mg/ kg)。除阳性药腹腔注射外,其余各给药组每天灌胃给药,容量为0.2m l/10g体重,模型对照组给予等容量蒸馏水,连续给药8天,停药次日处死小鼠,称体重后处死小鼠,剥离皮下瘤块,称瘤重,按下式计算抑瘤率。抑瘤率=(对照组平均瘤重-给药组平均瘤重)/对照组平均瘤重＊100,采用spss统计软件处理,比较各组间差异情况。

结果见表1,结果表明,与模型对照组相比,垂盆草水提物低剂量组(3.33g生药/kg)、高剂量组(6.67g生药/kg)、垂盆草醇提物低剂量组(3.33g生药/kg)、高剂量组(6.67g生药/kg)及环磷酰胺组皆有显著抑制S180肿瘤生长的作用,以上各组小鼠瘤重均较模型对照组轻(p<0.01),说明垂盆草对小鼠S180肉瘤有明显抑瘤作用。

表1 垂盆草不同提取物对小鼠S180肉瘤的抑瘤作用(x±S,n=10)

3.3 对小鼠S180腹水瘤的影响

无菌条件下,抽取已接种9d S180腹水瘤小鼠的腹水与生理盐水按1:2的比例进行稀释,无菌条件下,按常规小鼠腹腔接种0.2m l/只细胞悬液,制成腹水瘤模型。8h后,随机分为6组,每组10只,分别为模型对照组、垂盆草水提物低剂量组(3.33g生药/kg)、垂盆草水提物高剂量组(6. 67g生药/kg)、垂盆草醇提物低剂量组(3.33g生药/kg)垂盆草醇提物高剂量组(6.67g生药/kg)及阳性药环磷酰胺组(40mg/kg)。除阳性药皮下注射外,其余各给药组每天灌胃给药,容量为0. 2m l/10g体重,模型对照组给予等容量蒸馏水,连续给药8d,观察和纪录动物死亡时间,计算生存天数,按下式计算生命延长率。生命延长率=(给药组平均生存天数-对照组平均生存天数)/对照组平均生存天数＊100。结果见表2。

模型组小鼠从接种第3 d起腹部便开始增大,至5 d左右腹部增大明显。垂盆草水提物组从接种第4 d起腹部开始增大,至6 d左右腹部增大明显,与模型组相比,小鼠在治疗过程中活动、饮食及精神状况良好。环磷酰胺组小鼠厌食、脱毛、活动减少、精神状况不佳,腹水较少或无腹水产生。垂盆草各治疗组从接种第3 d起腹部便开始增大,至5 d左右腹部增大明显,无明显脱毛现象,但腹水情况减轻不明显。

从表2可知,垂盆草醇提物低剂量组(3.33g生药/kg)小鼠生存天数均较模型对照给小鼠长(P<0.01)。与模型组相比,环磷酰胺组和垂盆草各治疗组均能延长小鼠的存活期(P<0.05、P <0.01)。除垂盆草低剂量组及环磷酰胺组外, S180腹水瘤小鼠经治疗后生命延长率均未超过“抗癌药体内药效试验规程”限定的30%的标准(肖洪彬,2007)。本试验结果表明,垂盆草对小鼠S180腹水瘤有一定延长生存天数的作用,但此作用有待进一步深入研究。

表2 垂盆草不同提取物对小鼠S180腹水瘤的生存天数的影响(x±S,n=10)

5 讨论

由于目前临床常用抗肿瘤药物大多存在严重的毒副作用以及肿瘤细胞耐药性的问题,不断寻找新的高效低毒的抗肿瘤药物一直是抗肿瘤研究的重要课题。从植物中寻找天然抗肿瘤活性成分是研究抗肿瘤药物的一条重要途径。近年来,从祖国传统医药宝库中发掘新的抗癌药物已经成为肿瘤治疗的研究热点之一,并且这些新的抗癌药物在临床中的应用也取得了可喜的进展。垂盆草作为一种重要的药用植物资源,在临床上应用广泛,近年用于癌肿日渐增多,本试验观察了垂盆草不同提取物对小鼠 S180肉瘤的抑制作用,结果表明垂盆草对小鼠 S180肉瘤的生长有明显抑制作用,为垂盆草在临床上肿瘤的治疗提供初步的实验数据,今后将进一步对其抗癌活性物质进行深入研究。

[1] 徐叔云,卞如镰,陈修.药理实验方法学(第二版)[M].北京:人民卫生出版社.1991

[2] 扈瑞平,张兴夫,杜玲等.沙葱多糖对S180腹水瘤小鼠抗肿瘤和免疫作用的实验研究[J].饲料工业.2010,31(10):34 -36.

Effects of the different extracts from sedum sarmentosum bunge on tumor-bearing m ice

LIQing,LIU Jiao,CAO Xiu-lian,YIOU Hui-ling

(College of Traditional Chinese M edical,Hebei M edical University,Shijiazhuang Hebei050091,China)

The research was to observe the effects of the different extracts from Sedum sarmentosum Bunge on tumor-bearing mice.The sarcoma 180(S180)was transp lanted into the abdominal cavity and armpit of mouse and then the survival time and the tumor weight of the tumor-bearing mice treated w ith the different extracts from Sedum sarmentosum Bunge were measured and compared w ith the control group.The results showed that the different extracts from Sedum sarmentosum Bunge could obviously inhibit the tumo r grow th and p ro long the survival time of the tumo r-bearing m ice.

Sedum sarmentosum Bunge;S180;Tumor-bearing mice

R285

:A

1001-9383(2010)04-0054-03

2010-06-10

河北省科技厅支撑项目(062761955)

李清(1972-),女,河北石家庄人,硕士,副教授,从事中药药理学教学及科研工作.

刘姣,Email:fairypc-lj@163.com