超声提取龙眼核总黄酮量的工艺

贤景春，陈美赢

（泉州师范学院化学与生命科学学院，福建 泉州 362000）

超声提取龙眼核总黄酮量的工艺

贤景春，陈美赢

（泉州师范学院化学与生命科学学院，福建 泉州 362000）

采用超声方法研究龙眼核药用成分提取，探讨溶剂的浓度、超声时间、温度、料液比等各种因素对黄酮提取率的影响。并通过正交法对其超声提取进行全面分析,确定最佳提取工艺。其最佳工艺参数为60%乙醇为提取剂，温度70℃，时间30 min，料液比1∶13，在此条件黄酮提取率可达3.99%。

龙眼核；超声提取；总黄酮量

龙眼是我国南方一种常见的水果，有着2000多年栽培历史,栽培面积和产量均居世界首位。福建、广东、广西及台湾等省是主产区，而泉州是福建省中龙眼的盛产区。龙眼核系龙眼的种仁，呈球形，表皮红褐色有光泽，直径约0.8 cm～1.3 cm。龙眼核的重量占龙眼果实鲜重的17%。龙眼核性味涩、平,气微,味淡而微苦,具有止血、定痛、理气化湿等功效,用于治疗创伤出血[1]、疝气、疥癣、湿疮等，并有开胃健脾,补虚益智的功效。龙眼肉可以治疗虚劳赢弱,失眠健忘,惊悸怔。经研究表明，龙眼核中含有较为丰富的黄酮,对α－葡萄糖苷酶具有良好的抑制作用[2]。并具有抗氧化、抗心脑血管疾病、抗炎镇痛、免疫调节、降血糖、治疗骨质疏松、抑菌抗病毒、抗衰老、抗辐射等作用[3]。龙眼核的药用作用在相关资料上很早就有过记载，但一直也没有得到利用和开发。

泉州地区每年废弃的龙眼核的重量就达几十万吨，是值得研究和利用的天然植物资源。本文采用乙醇为溶剂，用超声的方法对龙眼核的药用成分进行了提取，研究了各种因素对提取率的影响，同时通过正交法对龙眼核药用成分的超声提取工艺进行了较全面的探索,确定了龙眼核总黄酮量超声提取的最佳工艺。

1 仪器与试剂

721E型可见分光光度计：上海光谱仪器有限公司；BS224S电子天平：北京塞多利斯仪器系统有限公司；KQ5200DB型数控超声波清洗器：昆山市超声仪器有限公司；索氏提取器。龙眼核（福建省泉州市）；芦丁标准品：中国药品生物制品检定所；硝酸铝（AR）；亚硝酸钠（AR）；氢氧化钠（AR）；无水乙醇（AR）。

2 方法[4]

2.1 标准曲线的绘制

准确吸取芦丁对照液（0.10 g/L）0.00、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00 mL 于 10.00 mL 容量瓶中，分别加入5%亚硝酸钠溶液0.30 mL,摇匀，静置6 min；再加10%硝酸铝溶液0.30 mL，摇匀,静置6 min；再加4%氢氧化钠溶液4.00 mL，用60%乙醇稀释至刻度，摇匀,静置12 min，以试剂作空白，于510 nm处测吸光度。运用Origin作图软件绘制出吸光度—浓度标准曲线见图1。

根据图1得回归方程：A=0.01621+18.24198X，相关系数r=0.9992。

2.2 超声波乙醇提取龙眼核中总黄酮的方法

取新鲜龙眼核,烘干,粉碎过40目。称取龙眼核粉末1 g,加入一定量的乙醇溶液,恒温、超声振荡提取,提取液趁热过滤。滤液用相应浓度的乙醇溶液定容至50.00 mL的样品液。测量时，量取0.50 mL样于10.00 mL容量瓶中。按测定芦丁标准样的方法，测定样品液的吸光度。然后利用回归方程及相关数据计算出样品的总黄酮的提取率。

3 结果与讨论

3.1 浓度对提取率的影响

在50℃下，料液比1/10(g/mL)，不同乙醇浓度的条件下，进行超声波处理2 h，结果见图2。

由图2可知，乙醇浓度在50%～70%时，有较高的提取率。乙醇浓度大于80%，反而黄酮提取率会大幅度降低。故可选取50%、60%、70%3个浓度作为正交因素。

3.2 温度对提取率的影响

在乙醇浓度为60%，料液比为1/10（g/mL），不同温度的条件下，进行超声波处理2 h，结果见图3。

图3结果表明，提取率随温度的升高不断提高，但提高的幅度不大，考虑温度太高会破坏黄酮类药物的活性，同时增加能耗。故选取50、60、70℃3个温度作为正交因素。

3.3 时间对提取率的影响

在50℃，乙醇浓度为60%，料液比为1/10（g/mL），进行超声波处理，结果见图4。

总黄酮提取率在10 min～180 min期间内虽有提高，但只有0.5%的增幅。故从效率出发，选取10、20、30 min作为正交因素。

3.4 料液比对提取率的影响

在50℃，乙醇浓度为60%，不同固液比进行超声波处理2 h，结果见图5。

由图5可知总黄酮提取率虽随提取溶剂量的增加有所提高，但增幅也只有0.1%左右。从节省成本，提高效率考虑，选取 1∶9、1∶11、1∶13 三个料液比因素进行正交。

3.5 正交试验

用正交试验方案综合考察提取溶剂浓度、温度、时间以及料液比4个因素对提取率的影响,每个因素选择3个水平（表1）。以总黄酮类化合物提取率为考核指标，用L9（34）正交表进行试验,结果如表2。

表1 因素水平表Table1 Factor and level of experiment

表2 L9（34）的正交设计及极差分析结果Table2 Orthogonal experimental L9（34）and analytical result of polar difference

由表2的极差值R分析结果可以看出，4种因素对总黄酮类化合物提取率的影响程度依次为A>B>D>C,即浓度>温度>料液比>时间。其中浓度对提取率的影响最显著，提取时间对提取率的影响最小[5]。结果4种因素的优化组合为A2B3C3D3。

4 结论

采用超声方法对龙眼核总黄酮量进行提取，工艺设备简单，操作方便，提取时间短，温度、浓度适中。通过单因素试验讨论了浓度、温度、时间、料液比对提取率的影响，正交试验确定了影响黄酮提取率的主次顺序。龙眼核超声提取的最佳工艺条件是，乙醇浓度60%，温度70℃，时间30 min，料液比1∶13。按此优化组合平行试验3次，平均总黄酮提取率为3.99%，此项研究为龙眼核的应用开发提供了理论基础。

[1]肖更生，黄儒强，曾庆孝，等.龙眼核的营养成分[J].食品科技,2004(1)：93－94

[2]黄儒强，刘学铭，曾庆孝.龙眼核提取物对α-葡萄糖苷酶抑制作用的研究[J].现代食品科技，2005，21(2)：62－63

[3]姜国芳,谢宗波,乐长高.银杏叶黄酮类化合物的研究进展[J].时珍国医国药,2004,15(5):306-308

[4]张永明,张倩,杨青,等.现代技术与传统方法萃取古尼虫草总黄酮的比较[J].食品研究与开发，2007，28(1)：136－140

[5]兰昌云,周崇松,范必威，等.超声波法提取槐花中黄酮的最佳工艺研究[J].天然产物研究与开发，2005，17(1)：55－58

Study of the Procedures of Extracting Total Quantity of Flavone from Longan Seed by Using Ultrasonic Wave and Ethanol Extraction

XIAN Jing-chun，CHEN Mei-ying
（The College of Chemistry and Life Science，Quanzhou Normal College，Quanzhou 362000，Fujian,China）

This paper aims to extract total quantity flavone from longan seed based on the reality that longan seed is a kind of plentiful fruit in quanzhou.This research discussed the method of extracting total quantity of flavone and the effect of concentration of menstruum,time,temperature,ratio of material to liquid.Meanwhile,the best conditions for extraction were chosen after complete orthogonal analysis.The best parameters are 60%ethanol as extractant,temperature on 70 ℃,extraction time by 30 min,ratio of material to liquid on 1∶13.In this case,the rate of extraction can reach up to 3.99%.

longan core；ultrasonic wave；flavone

泉州市科技计划项目（2007N4）；泉州师范学院硕士学位授予单位立项建设化学学科资助

贤景春（1955—），女（汉），教授，本科，主要从事配位化学研究。

2009-07-02