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复发性流产与男性精液常规及动态的相关性研究

2010-12-01刘新陈志云

中国实用医药 2010年21期
关键词:复发性精液精子

刘新 陈志云

复发性流产是指与同一性伴侣连续发生3次或3次以上自然流产,其中50%以上患者不存在染色体、解剖、内分泌、自身免疫异常和生殖道感染等常见病因,临床上称为原因不明复发性流产。在生育年龄的妇女中发生率为1% ~2%,且有逐年增加趋势。过去25年间中国有生育力男性精液参数中精子密度和精子总数呈现下降[1],精子质量下降是否增加流产率目前研究并不多见。本文对56例不明原因复发性流产患者丈夫精液常规检查情况进行回顾性分析,试图为复发流产的病因提供部分理论依据。现报告如下。

1 临床资料

1.1 一般资料 选择本院门诊就诊的56例孕早期习惯性流产患者,孕龄<12周,均为流产3次或3次以上者。患者排除存在染色体、解剖、内分泌、自身免疫异常和生殖道感染等常见病因。取56例患者丈夫精液为研究组,同时随机取56例已育男性精液作为对照组。

1.2 实验室指标评定标准 按照WH/《人类精液及精子-宫颈黏液相互作用实验室检验手册》中的标准评定。正常值:精液量2~6 ml,pH 值7.2~8.0,液化时间 < 60 min,精子密度≥20×106/ml或更多,精子活率>60%,精子活力a级≥25%或a级+b级≥50%,正常精子形态≥30%。在上述指标中,只要有一项异常时则判定精液质量异常。若各项指标均在参考值范围内,则判定精液质量为正常。

2 研究方法

2.1 标本采集 禁欲4~7 d在取精室手淫法取精液于干燥经消毒的洁净广口杯内,置于37℃水浴箱内使之完全液化后转移至刻度离心管内测量体积,37℃水浴中待检。

2.2 操作方法 按WHO的操作方法,分析精液量液化时间、pH值、黏稠度以及精子形态等。精液完全液化后,先取一滴约10 μl精液滴在载玻片上,拉薄涂片,用改良巴氏染色法染色待检。

2.3 精液动态分析 采用西班牙SCA-LIT彩色精子质量检测仪对精子进行动态分析。按照《WH/人类精液及精子-宫颈黏液相互作用实验检验手册》的相关要求分析精液。

2.4 检测指标 精液pH、精液量、总数、密度、液化时间、a+b级精子率、正常精子率。精液动态分析指标:直线速度(VSL)、曲线速度(VCL)、平均路径速度(VAP)、直线性(LIN)、前向性(STR)、摆动性(WOB)、精子平均侧摆幅(ALH)、平均移动角度(MAD)、精子平均鞭打频率(BCF)。

2.5 质控方法 室内质控采用质控珠(QC-BesdsTM,Bioscreen Inc)进行每天密度质控,检测人员每周进行随机标本的质控(密度和活动力质控)。

2.6 统计学方法 按统计学要求处理各组参数,使用SPSS 13.0统计软件进行统计分析,定量资料均以(±s)表示,定量资料组间比较采用t检验,定性资料组间比较采用χ2检验,P<0.05表示差异有统计学意义。

3 结果

3.1 两组精液的量、pH值、精子总数、a+b级比率及液化时间差异无统计学意义(P>0.05),在畸形率差异有统计学意义(P<0.05)。研究组精液畸形率明显高于对照组。见表1。

3.2 与对照组比较,研究组精液VCL、VSL、MAD、ALH、VAP、WOB无明显统计学差异,BCF、LIN、STR有显著性差异(P<0.05)。见表2。

表1 两组精液检测结果比较

表2 两组精液运动参数比较

4 讨论

复发性流产的病因十分复杂,涉及遗传、内分泌、解剖、感染和环境因素等多因素。目前研究大多数集中女性因素,既然由于胚胎染色体的一半是由男性提供,复发性流产也有可能是男性因素引起的。本研究对复发性流产丈夫精液与正常男性精液常规分析结果显示:两组精液的量、pH值、精子总数、a+b级比率、液化时间及正常精子形态百分率无明显差异。与以往研究相似[2]。畸形精子指数两组有明显差异,畸形指数也称多种异常指数(TZI)用缺陷总数除以畸形精子数目,数值介于1.00和3.00之间。是不育男性精液检查的一个重要参数,有研究显示TZI与精液常规中其他参数间无相关性[3]。畸形精子很难结合到卵透明带上,当精液中正常形态精子百分率<14%时,精子体外受精率显著减少[4]。两组正常精子百分率无明显差异,畸形精子指数高是否作为一个影响自然妊娠的因素还有待于继续研究。

Templado等[5]的研究表明,即使精子密度正常,畸形精子症和弱精子症男性的精子染色体异常显著增高。吴大鹏等[6]观察了58例复发性流产患者的丈夫和50例正常生育男性对照组,得出精子DNA完整性损伤可能是复发性流产的原因的结论。Carrell等[7]发现原因不明性复发性流产的精子较普通人群精子的非整倍性高,并且非整倍性的比率与精子凋亡的比率成正相关。Kahraman等[8]采用荧光原位杂交技术对接受卵胞浆内单精子注射(ICSI)治疗的畸形精子症的研究结果显示,39%存在精子非整倍体,显著地高于对照;同时在对121例前期辅助生殖技术失败的回顾中,发现50%分裂期胚胎中发现有染色体异常,其中34%为复合性染色体缺陷。这些结果提示:导致自然流产及胎儿发育异常的染色体异常有可能来源于精子的染色体异常,从而导致妊娠失败。畸形精子指数高与精子染色体异常是否有相关性还有待于继续研究。

精子的动态参数是评估精液质量的重要指标,将其与精液常规分析相结合,可为男性生育能力评价提供有效的依据[9]。参数 VCL、VSL、VAP 反映了精子的运动速度,LIN、WOB、MAD、ALH、STR参数反映了精子运动的直线性和前向性。与对照组比较,研究组精液BCF(精子平均鞭打频率)、LIN(直线性)、STR(前向性)、VSL(直线速度)、ALH(精子平均侧摆幅)、WOB(摆动性)、VAP(平均路径速度)均有明显统计学差异,反映研究组精子的运动速度及前向性差。正常的受孕需要精子特征性的微细运动以穿透卵丘和透明带,快速、直线、前向运动的精子是提高受孕概率的保证。精子的动态参数客观地反映了精子微细运动特点,并与受精率显著相关。一般一次射精后仅1%~6%精子可以进入宫腔,能到达输卵管的精子更少,进入阴道的精子靠自身运动经子宫颈到达输卵管与卵细胞结合,旅途长达17 cm,是精子自身长度的3000倍,因此成功受孕精子功能尤为重要。两组精子动态分析差异是否与畸形精子指数高相关还需进一步证实。

[1]梁小薇,卢文红,陈振文,等.过去25年中国有生育力男性精液参数变化的回顾性研究.中华男科学杂志,2008,14(9):775-778.

[2]岳焕勋,李福平,蒋敏,等.复发性流产及胎儿发育异常与男性畸形精子的相关性探讨.实用妇产科杂志,2008,24(10):624-626.

[3]姜彦嘉,王奇玲,马春杰,等.畸形精子指数和精子畸形指数与男性不育症患者精子密度、活动率及精子形态的关系.广东医学,2006,27(2):231-233.

[4]MortimerD,MenkveldR.Sperm morphology assessment-historical perspectives and current opinions.Androl,2001,22(2):192-205.

[5]TempladoC,HoangT,GreeneC.Aneuploid spermatozoa in infertile men:teratozoospermia.Mol Reprod Dev,2002,61(2):200-204.

[6]吴大鹏,吴齐飞,李旭东.反复自然流产与精子DNA完整性的相关研究.现代泌尿外科杂志,2008,13(2):132-134.

[7]CarrellDT,W ilcoxAL,Lowy L.Elevated sperm aneuploidy and apoptosis in patientswith unexplained recurrent pregnancy loss.Obstet-Gyneco,2003,101:1229-1235.

[8]KahramanS,FindikliN,BiricikA.Preliminary FISH studies on spermatozoa and embryos in patientswith variable degrees of teratozoosper-mia and a history of poor prognosis.Reprod Biomed Online,2006,12(6):752-761.

[9]余玲玲,陈小剑,江明华,等.精子动态参数在精液质量分析中的应用.医学研究杂志,2008,37(6):108-110.

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