甲睾酮凝胶剂的制备与含量测定

赵映兰，林 彩，邓 莉，胡 斌（第三军医大学西南医院药剂科，重庆市 400038）

甲睾酮凝胶剂的制备与含量测定

赵映兰＊，林 彩#，邓 莉，胡 斌（第三军医大学西南医院药剂科，重庆市 400038）

目的：制备甲睾酮凝胶剂，并建立其含量测定方法。方法：以甲睾酮为主药，卡波姆940、67%乙醇、肉豆蔻酸异丙酯等为基质，制备凝胶剂；采用高效液相色谱法测定甲睾酮的含量。结果：所制制剂为澄清透明凝胶；甲睾酮检测浓度的线性范围为2.0～8.0μg·mL－1，平均回收率为99.84%，RSD＝0.62%（n＝5）。结论：该制剂制备工艺可行，含量测定方法具有较好的专属性和精确度。

甲睾酮凝胶剂；制备；含量测定；高效液相色谱法

甲睾酮（Methyltestosterone，又名甲基睾丸素）在促进男性性器官的形成、发育、成熟等方面发挥重要作用，并可以对抗雌激素，抑制子宫内膜生长及降低卵巢垂体功能，在临床上用于男性性腺机能减退症、无睾症及隐睾征的治疗；其还可用于月经过多、子宫肌瘤、子宫内膜异位症等妇科疾病的治疗[1]。目前，甲睾酮制剂的剂型主要有片剂和注射剂，前者具有口服制剂的首关效应，后者具有注射带来疼痛的缺点。而凝胶剂具有较好的生物相容性、生物黏附作用及生物可降解作用，故其不但可用于一般制剂的制备，还被用于缓释、控释及脉冲释放等新型给药系统的研制。因此，将甲睾酮制备成凝胶剂，不但可以避免上述缺点，还可以促进药物的吸收[2]，极大提高了药物疗效和患者的顺应性。因此，本文制备了甲睾酮凝胶剂，并初步建立了其含量测定方法，为其质量控制标准的建立和临床应用打下基础。

1 材料

1.1 仪器

高效液相色谱（HPLC）仪、C-R4A型数据处理机（日本岛津公司）；Surveyor PDA紫外检测器（美国Finnigan公司）。

1.2 试药

甲睾酮对照品（昆明科翔生物科技有限公司，批号：20071210，纯度：99.53%）；甲睾酮原料药（武汉市合中生化制造有限公司，批号：20071025，纯度：97.37%）；卡波姆940（武汉海格尔公司，批号：20080629，化学纯）；肉豆蔻酸异丙酯（中国医药集团上海化学试剂公司，批号：F20080410，化学纯）；甲睾酮凝胶剂（自制，批号：080820、080910、080925，规格：50mg·5g－1）。

2 处方与制备

2.1 处方

甲睾酮1.0g，卡波姆9401.0g，肉豆蔻酸异丙酯1.0g，氢氧化钠（NaOH）0.1g，67%乙醇 100g。

2.2 制备

以卡波姆940为凝胶基质，均匀撒入67%乙醇中，加热回流3h，使其溶胀完全，放冷后加入甲睾酮和肉豆蔻酸异丙酯，溶解完全，加入溶有NaOH的67%乙醇调节黏度，搅拌均匀后，分装即得。制得3批本品，外观性状均为澄清透明凝胶，在常温时保持胶状，不干涸或液化。

3 含量测定

3.1 色谱条件

色谱柱：ODS-C18（15mm×4.6mm，5μm）；检测波长：241nm；柱温：30℃；流动相：甲醇-水（7∶3）；流速：1.0mL·min－1；AUFS：0.1。

3.2 检测波长的选择

取“3.3”、“3.4”项下3种溶液于200～400nm波长内进行紫外扫描。结果，对照品溶液在241nm波长处有最大吸收，而阴性样品溶液在此处无吸收，故选择241nm为测定波长。

3.3 供试品与阳性样品溶液的制备

精密称取样品5g，置于50mL容量瓶中，加乙醇25mL，于80℃水浴加热使基质溶解，放冷至室温，加乙醇至刻度，摇匀，静置2h，过滤，精密量取续滤液5mL，置于25mL容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。同法将不含甲睾酮的空白凝胶制备得阴性样品溶液。

3.4 对照品溶液的制备

精密量取甲睾酮对照品74.7mg，置于100mL容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，得到浓度为747.0μg·mL－1的对照品溶液。

3.5 专属性试验

取“3.3”、“3.4”项下3种溶液，按“3.1”项下色谱条件分别进行HPLC分析，色谱详见图1。

图1 高效液相色谱图A.对照品；B.供试品；C.阴性样品 ；1.甲睾酮Fig 1 HPLC chromatogramsA.reference substance；B.test sample；C.negative sample；1.methyltestosterone

结果表明，供试品与对照品主峰的保留时间相同（5.6min），而阴性样品在此未出现峰，提示阴性样品不干扰供试品的测定。

3.6 线性关系考察

精密量取对照品溶液0.4、0.6、0.7、0.8、1.0mL，分别置于100mL容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，得1、2、3、4、5号溶液。按上述色谱条件，分别取20μL进样，测定峰面积。以浓度（X）为横坐标，峰面积（Y）为纵坐标进行线性回归，得回归方程：Y＝6.0×10－5X－0.4417（r＝0.9998，n＝5）。结果表明，甲睾酮检测浓度的线性范围为2.0～8.0μg·mL－1。

3.7 稳定性试验

取“3.3”项下供试品溶液分别于0、1、2、4、8h 注入HPLC仪，记录色谱，测定峰面积，考察本品在流动相溶液中的稳定性。结果显示，经8h测得甲睾酮的峰面积的RSD为0.23%，即表明本品在流动相溶液中8h内稳定。

3.8 精密度试验

精密量取样品5g（批号：080820），按“3.3”项下方法制备成供试品溶液5份，每份分别进样10μL，按“3.1”项下色谱条件进样，按峰面积归一法测定其含量。结果，RSD＝0.62%（n＝5），表明本方法精密度良好。

3.9 回收率试验

精密称取阴性样品3份，各5g，每份分别精密加入一定量的甲睾酮对照品，置于50mL容量瓶中，加入乙醇25mL，于80℃水浴加热使溶解，放冷至室温，加乙醇至刻度，摇匀，静置2h，过滤，精密量取续滤液5mL，置于25mL容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，分别取20μL进样，以峰面积测定甲睾酮含量，同种浓度平行测定3次，计算回收率，结果见表1。

3.10 样品含量测定

精密称取3批样品各5g，按“3.3”项下方法制备成供试品溶液，精密吸取10μL，按“3.1”项下色谱条件进样测定供试品的峰面积；另按“3.4”项下方法制备浓度为747.0μg·mL－1的甲睾酮对照品溶液，同法测定。计算供试品中甲睾酮的含量。结果，3批样品中甲睾酮标示含量分别为102.5%、103.6%、103.4%。

表1 加样回收率试验结果（n＝9）Tab 1Results of recovery test（n＝9）

4 讨论

甲睾酮口服吸收较好，但在肝脏中大部分被代谢失活，因此制成非口服给药制剂可提高生物利用度。因肌肉注射剂和植埋剂会引起用药者的痛苦，故经皮肤给药制剂是一种很好的非口服剂型，具有提高生物利用度、使用方便、无疼痛等优点[3]。

本文将甲睾酮制备为凝胶剂，选用了卡波姆940为基质，肉豆蔻酸异丙酯为促渗剂。前者具有良好的黏合性、胶凝性，化学性质稳定，无过敏反应，且与大多数辅料相容性好[4]；后者能使制剂在皮肤上易于铺展，无不适感，与皮肤有良好的相容性，帮助药物扩散和吸收[5]。本制剂的辅料中还加入了乙醇和NaOH。乙醇的作用主要是溶解药物，并具有一定的防腐作用；而使用NaOH的目的是调节制剂的pH值和黏度。经试验证明，67%的乙醇和使用NaOH调节pH值为6～7时，制备的凝胶剂具有含量均匀、黏度适宜的良好性状。

本文采用HPLC法测定甲睾酮制剂中甲睾酮的含量[6]。将检测波长设置为241nm时，辅料对甲睾酮不存在干扰，精密度高；且试验证明，采用甲醇-水（7∶3）为流动相，基质与甲睾酮能得到很好分离，故选用HPLC法作为甲睾酮的含量测定方法。

综上所述，所制制剂质量稳定可控，建立的含量测定方法具有很好的专属性和精确度。

[1] 童建孙，王兴海，崔毓桂，等.不同剂量的十一酸睾酮对大鼠生精功能影响[J].中华男科学，2000，6（2）：89.

[2] 沈丽琳，侯庆昌，张 繁，等.杀微生物避孕凝胶剂的抗生育和抗菌作用研究[J].中国计划生育学杂志，2008，16（9）：533.

[3] 庞 允，王云彩.中药经皮给药制剂的研究进展[J].中国药房，2002，13（4）：240.

[4] 连佳芳，郝 勇，张林祺.卡波姆及其在凝胶剂中的应用研究进展[J].白求恩军医学院学报，2008，6（3）：162.

[5] 王 刚，杜洪光，张恩宏，等.促渗剂对司来吉兰贴片透皮性能的影响[J].中国药房，2008，19（7）：511.

[6] 林晓辉，张雪原，丁红婴，等.RP-HPLC测定甲睾酮片中甲睾酮的含量[J].广东药学，2005，15（6）：15.

Preparation and Content Determination of Methyltestosterone Gelatin

ZHAO Ying-lan，LIN Cai，DENG Li，HU Bin（Dept.of Pharmacy，Southwest Hospital，The Third Military Medical University，Chongqing 400038，China）

OBJECTIVE：To prepare Methyltestosterone gelatin and to establish its content determination method.METHODS：Gelatin was prepared using methyltestosterone as main component and carbomer 940，67%ethanol and isopropyl myristate as matrix.The content of methyltestosterone was determined by HPLC.RESULTS：Preparation was colorless transparent gelatin.The linear range of methyltestosterone was 2.0～8.0μg·mL－1with an average recovery of 99.84%（RSD＝0.62%，n＝5）.CONCLUSION：Preparation method is practical.The content determination method is specific and accurate.

Methyltestosterone gelatin；Preparation；Content determination；HPLC

R927.2

A

1001-0408（2010）33-3133-02

＊主管药师，硕士研究生。研究方向：药物制剂分析。电话：023-68765490。E-mail：zhaoyinglan＿023@sina.com

#通讯作者：副主任药师。研究方向：药物制剂分析。电话：023-68765489。E-mail：lincai113@163.com

2009-10-14

2009-11-27）