急性坏死性胰腺炎小鼠不同组织中连接黏附分子C的表达

杨勇 胡端敏 唐文

·短篇论著·

急性坏死性胰腺炎小鼠不同组织中连接黏附分子C的表达

杨勇 胡端敏 唐文

中性粒细胞的过度激活被认为是引起重症急性胰腺炎(SAP)病情加重、多器官功能衰竭以致病死的重要原因[1]。连接黏附分子-C(junctional adhesion molecule C，JAM-C)是近些年新发现的血管内皮细胞上的细胞黏附分子，它在中性粒细胞向炎症和组织损伤处浸润和聚集过程中起重要作用[2]。因此，JAM-C可能参与了SAP的病情进展。本实验检测JAM-C在急性坏死性胰腺炎(ANP)小鼠胰腺、肾和肺的表达，探讨其在ANP病情进展中的作用。

一、材料和方法

1．实验动物及分组：清洁级昆明小鼠40只，雌雄不分，体重(20±2)g，购自苏州大学动物实验中心。按完全随机法分成ANP组和对照组。采用腹腔注射雨蛙素50 μg/kg体重、6次、间隔1 h、末次注射后立即给予腹腔注射内毒素10 mg/kg体重的方法制备ANP模型。对照组腹腔注射无菌生理盐水10 ml/kg体重，6次。

2．观察指标：末次注射后3 h摘眼球取血，分离血清，应用全自动生化仪检测血清淀粉酶浓度。小鼠断颈后开腹取胰腺、肾和肺组织，常规病理学检查，并采用免疫组化染色检测JAM-C蛋白表达。再采用MIQAS医学图像定量分析系统进行半定量。

二、结果

1．血淀粉酶含量的变化：对照组血淀粉酶含量为(1299±70)U/L，ANP组为(19608±1769)U/L，相差显著(P<0.05)。

2．组织病理学改变：ANP小鼠胰腺水肿，腺泡呈孤岛状，腺细胞坏死、结构模糊不清，胞质内空泡形成，局部有坏死灶，中性粒细胞和单核细胞浸润，胰周脂肪坏死，大量炎症细胞浸润，局部血管壁坏死、出血，大量中性粒细胞和单核细胞浸润；肺泡壁的毛细血管弥漫性扩张充血，肺泡腔内有少量渗出液及红细胞和炎症细胞，肺间质炎症细胞浸润明显；肾小球充血，毛细血管袢之间可见中性粒细胞和单核细胞浸润，肾间质轻度水肿。对照组胰腺、肾和肺组织均无明显改变。

3．JAM-C蛋白表达的变化：JAM-C在ANP组不同组织上均有高表达(P<0.05，图1、2)。

图1对照组(左)和ANP组(右)肺(上)、肾(中)和胰腺(下)组织的蛋白表达(免疫组化 ×200)

图2 对照组与ANP组肺、肾、胰腺组织的阳性面积表达值

讨论JAM-C是免疫球蛋白超家族成员之一，JAM-C在内皮细胞、上皮细胞、血小板、T细胞、NK细胞、成纤维细胞以及淋巴管上均有表达[3]。它的配体主要是分布在白细胞上的整合蛋白Mac-1 (αMβ2，CD11b/CD18)[4]。Orlova等[5]报道，JAM-C大量分布在血管内皮细胞之间的紧密连接上，使用可溶性JAM-C结合中性粒细胞上的整合蛋白Mac-1后，可使血管炎症明显减轻，且白细胞渗出也明显减少。在腹膜炎、肺炎、皮肤炎症、关节炎等动物模型的研究中发现[6-9]，JAM-C可增加中性粒细胞在炎症部位和组织损伤处的浸润和聚集，而使用抗JAM-C抗体或者可溶性JAM-C可有效减轻病情的严重性以及炎症细胞的浸润。但是这种作用的基本机制仍需要未来进一步研究明确。本实验结果显示，ANP小鼠肺脏、胰腺和肾脏上均有JAM-C高表达(P<0.05)，与Vonlaufen等[10]的结果一致。由此可见，JAM-C在ANP的病理发展中可能起到重要作用。通过拮抗JAM-C这一参与后期细胞事件的黏附分子可能成为治疗ANP的新的突破口。

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2009-12-08)

(本文编辑：屠振兴)

10.3760/cma.j.issn.1674-1935.2010.05.025

苏州大学医学发展基金资助项目(EE123715)

215004 苏州，苏州大学附属第二医院消化科

唐文，Email: louisetangwen@yahoo.com.cn