北冬虫夏草对一次力竭小鼠血淋巴细胞DNA损伤的影响

2010-11-09李琳燕刘少英李淑平

沈阳体育学院学报 2010年5期

李琳燕,刘少英,李淑平,常波

(1.景德镇陶瓷学院体育系,江西景德镇 333001;2.吉首大学体育科学学院,湖南吉首 416000; 3.韩山师范学院体育系,广东潮州 521041;4.沈阳体育学院运动人体科学系,辽宁沈阳 110102)

李琳燕1,刘少英2,李淑平3,常波4

目的:探讨北冬虫夏草对力竭性运动后机体自由基代谢的影响和消除运动性疲劳的机理。方法:昆明种小鼠 64只,随机分为四组:正常对照组(NC组)16只、运动对照组(EC组)16只、运动 +北冬虫夏草组(ECM组)16只、运动 +人参组(EP组)16只。采用单细胞凝胶电泳法、硫代巴比妥酸法、黄嘌呤氧化酶法和二硫代二硝基苯甲酸法分别测定血液淋巴细胞DNA的损伤、血清MDA的含量、血清 SOD和 GSH-Px的活性。结果:①与NC组相比,EC组大鼠血清MDA含量显著增加(P＜0.01),血清 SOD和 GSH-Px活性显著下降(P＜0.01)。与 EC组相比,ECM组大鼠血清MDA含量显著下降(P＜0.01),血清 SOD活性明显增高 (P＜0.05),GSH-Px活性显著增高 (P＜0.01); EP组大鼠血清MDA含量显著下降(P＜0.01),血清 SOD和 GSH-Px活性显著增高 (P＜0.01)。②与 NC组相比, EC组大鼠血液淋巴细胞尾长、尾矩及椭圆矩显著增加 (P＜0.01)。与 EC组相比,ECM组大鼠血液淋巴细胞尾长、尾矩及椭圆矩显著降低 (P＜0.01);EP组大鼠血液淋巴细胞尾长、尾矩及椭圆矩显著降低 (P＜0.01)。结论:北冬虫夏草可以提高小鼠血清 SOD、GSH-Px的活性,降低血清MDA的含量,自由基对DNA的直接损伤,对一次力竭运动导致的小鼠血液淋巴细胞DNA的损伤具有保护作用,与人参的作用效果相类似。

北冬虫夏草;力竭;淋巴细胞;DNA

近年来,有关活性氧的产生及其对生物分子的损伤机理研究受到各学科的普遍重视,许多疾病与活性氧的介入有密切关系,尤其是羟自由基(OH·),作为最活泼的活性氧自由基与任何生物分子都可以以极快的反应速率发生反应。虽然OH·对蛋白质、脂质、糖类等均可引起不同程度的损伤,但其对 DNA的氧化损伤及其与疾病的关系越来越受到科学界更广泛的关注。已有的研究结果直接或间接证明了急、慢性运动可引起氧自由基的增加,从而造成了机体一系列病理损伤。通过给小鼠补充北冬虫夏草发酵液,5周后进行一次力竭运动,观察运动源性自由基对血淋巴细胞 DNA的损伤情况以及血清MDA含量、血清 SOD和 GSH-Px活性的变化,探讨北冬虫夏草对力竭性运动后机体自由基代谢的影响和消除运动性疲劳的机理,为北冬虫夏草和辽东楤木在训练、比赛中的应用提供理论和实验依据。

1 实验材料与方法

1.1 实验对象

实验用雄性昆明种小鼠 64只,四周龄,体重 17～28g,由沈阳市双义实验动物研究所提供,合格证号:SCXK(辽)2003 -0012。

常规分笼饲养,环境温度为 (23±3)℃,相对湿度为70%～80%。每天定时通风,自由饮水,饲料由沈阳医学院实验动物中心提供。每日记录饮食量、体重,清洗饮水器,隔日清洗,消毒笼具,更换垫料,每周室内消毒两次[1]。

1.2 药物

北冬虫夏草发酵液,主要成分有虫草素、虫草酸、虫草多糖等,由沈阳药科大学药理教研室提供,给药前按 2g/kg体重用蒸馏水配成所需溶液。人参茎叶提取物,浅黄色粉末,主要有效成分为皂甙类化合物,由沈阳药科大学神经药理教研室提供,给药前按 30mg/kg体重用蒸馏水配成所需溶液[1]。小鼠灌胃量为 0.1ml/10g体重,安静对照组和运动对照组按 0.1ml/10g体重用蒸馏水灌胃。每天一次,持续 5周。

1.3 实验设计

根据随机设计原则,将实验小鼠按体重分层,随机分为四组,分组情况如下:

运动对照组和运动 +服药组小鼠于最后一次灌胃后,次日晨进行一次力竭游泳运动。玻璃池规格:100×60×70cm,水温(34±2)℃,每天光照 12h,水深 45cm,约为小鼠身长的3倍[1]。记录小鼠力竭时间,力竭判断的标准为:小鼠头下沉 10s不上浮,放在平面上无法完成翻正反射[2]。

1.4 主要试剂与仪器

1.4.1 主要试剂 ①SOD试剂盒(南京建成生物工程研究所);②MDA试剂盒 (南京建成生物工程研究所);③GSHPx试剂盒 (南京建成生物工程研究所)。

1.4.2 主要仪器 VANOX型OLY MPUS荧光显微镜(日本奥林巴斯公司);载玻片 (1.5×76×26mm±0.5)全磨砂片(秦皇岛秦宁玻璃厂);LUC IA Ver 4.71彗星实验分析软件系统 (捷克 Laboratory Imaging公司);721分光光度计 (上海第三分析仪器厂)。

1.5 实验方法

力竭游泳运动结束后,随机剔除多余小鼠,取样。

1.5.1 血清的制备及血清MDA含量、SOD和 GSH-Px活性的测定采用眼眶取血方法,把血样置于无抗凝剂的离心管中,于 4℃静置使其充分凝固,以 3 500r/min的转速离心15min,取上清液备用[1,2]。血清MDA含量、SOD和 GSH-Px活性的测定严格按照试剂盒操作说明操作。

1.5.2 小鼠血液淋巴细胞DNA损伤的测定[4-6]避光条件下,采用眼眶取血法,取 0.2 ml全血放入肝素抗凝管,用不含钙、镁的磷酸盐缓冲液 (PBS)等量稀释,轻轻混匀后,备用。

1)制片

第一层为正常熔点琼脂糖 (NMA):将含 100μl 1% NMA的 PBS缓冲液滴在载玻片上,迅速盖上干净的 1号盖玻片,置 4℃下 10 min使 NMA凝固。第二层为含细胞的低熔点琼脂糖 (LMA):将待测细胞液与含 0.5%LMA的 PBS缓冲液 1:1混合,继之,揭去 1号盖玻片,轻轻刮去第一层凝胶,迅速将 100μl含有细胞的LMA滴到第一层琼脂糖上,立即盖上 2号盖玻片,置 4℃下 15 min使LMA凝固。

2)细胞裂解

移去 2号盖玻片,将载玻片浸入新配制的预冷的 4℃细胞裂解液中 (pH=10,含 2.5 mol/L NaCl,100 mmol/L Na2EDTA,10 mmol/L Tris-HCl,用前加 1%TritonX-100, 10%DMSO)2h。

3)DNA碱解旋

将载玻片取出,置于水平电泳槽的阳极端,电泳槽中盛有新配制的碱性电泳缓冲液 (pH=13,1mmol/L Na2EDTA, 300 mmol/L NaOH),约覆过载玻片胶面 0.25cm左右,于 4℃放置 40min。

4)电泳

在电压 22～23V、电流 300mA下,电泳 30min。电压、电流可通过改变缓冲液的液面高度来调节。

5)中和和染色

电泳后将载玻片取出,用 0.4 mol/L Tris-HCl(pH= 7.5)缓冲液中和三次,每次 5 min。在裂解缸中再缓缓加入无水乙醇,将载玻片浸埋 1h之后,取出凉干。每张载玻片用0.004%的溴化乙啶 (EB)水溶液 50μl染色,再盖上 3号盖玻片染色至少 1h。

6)阅片

EB染色后的样本应尽快在荧光显微镜下观察电泳图像。在荧光显微镜下,DNA被染成红色,若没有发生DNA断裂,无DNA断片,则从头向阳极迁移的细胞只有一个圆形的荧光头;发生了 DNA断裂的细胞则表现为断片离开头部向阳极方向迁移,形成一个像彗星样的拖尾。每个样本随机观察 40个细胞,使用LUC IA软件分析。

1.6 统计学处理

所有数据用 SPSS10.0数据软件包进行处理,采用平均数 ±标准差 (±s)表示,组间采用单因素方差分析判断总体显著性差异,显著性水平定在 P＜0.05和 P＜0.01。

2 结果

2.1 一次力竭运动后各组小鼠血清MDA含量、SOD和 GSH -Px活性的变化

与NC组相比,EC组小鼠血清MDA含量显著增加(P＜0.01);血清 SOD和 GSH-Px活性显著下降(P＜0.01)。

与 EC组相比,ECM组小鼠血清MDA含量显著下降(P＜0.01),血清 SOD活性明显增高 (P＜0.05),GSH-Px活性显著增高 (P＜0.01)。EA组小鼠血清MDA含量显著下降(P＜0.01),血清 SOD和 GSH-Px活性显著增高 (P＜0.01)。EP组小鼠血清MDA含量显著下降(P＜0.01),血清SOD和 GSH-Px活性显著增高(P＜0.01)。

与 EP组相比,ECM和 EA组小鼠血清MDA含量、SOD和 GSH-Px的活性均无显著性差异(表 1)。

表1 Changes ofMDA、SOD and GSH-Px inserum of rats in different groups(±s)(n=8)

注:compared with NC group:△△P＜0.01;compared with EC group:＊P＜0.05,＊＊P＜0.01;1,2,3,4 group represent differently NC,EC,ECM,EP group,below table is the same。

Group MDA (nmol/ml) SOD (U/ml) GSH-Px (U/0.1ml) 1 23.95±3.18 110.98±12.97 453.44±26.81 2 39.77±4.48△△ 68.81±8.11△△ 270.58±23.08△△3 30.60±2.66＊＊ 82.28±10.45＊ 363.61±39.86＊＊4 31.18±2.06＊＊ 89.22±10.68＊＊ 372.22±56.34＊＊

2.2 一次力竭运动后各组小鼠血液淋巴细胞DNA损伤的情况

本实验采用单细胞凝胶电泳法检测血液中单个淋巴细胞DNA的损伤情况,通过尾长、尾矩、椭圆矩等指标来反映DNA的损伤情况。

尾长 (Tail length),即沿电泳方向“彗星”尾部最远端与头部中心间的距离,是损伤DNA碎片的迁移长度,在低损伤剂量范围内与损伤剂量成线性关系。当损伤因素作用剂量大到一定程度时,DNA损伤程度明显增加而尾长基本不变。

尾矩(Tailmoment)是指尾部 DNA占总 DNA的百分比与头、尾部中心间距的乘积。

椭圆矩(Olive moment)是以“彗星”头部中心点为零点,沿电泳方向将“彗星”按一定的间隔分成若干个区域 (80个即可),分别测定每个区域荧光强度 (Di,代表该区域 DNA量)、该区域中心距零点的距离 (Xi)、“彗星”总荧光强度(Dt,代表总DNA量),则椭圆矩定义为Σ(Di×Xi)/Dt。由于定义尾矩时,将“彗星”尾部当作一个整体考虑,将头尾部中心间距当作损伤 DNA的平均迁移距离。但事实上尾部DNA的分布并不均匀,所以椭圆矩与作用剂量间的相关性比尾矩更密切。

与NC组相比,EC组小鼠血液淋巴细胞的尾长、尾距和椭圆距显著增高 (P＜0.01)。

与 EC组相比,ECM组小鼠血液淋巴细胞的尾长、尾距和椭圆距显著降低 (P＜0.01)。EP组小鼠血液淋巴细胞的尾长、尾距和椭圆距显著降低 (P＜0.01)。

与 EP组相比,ECM组小鼠血液淋巴细胞的尾长、尾距和椭圆距均无显著性差异(表 2)。

表2 Changes of the DNA damage of lymphocyte in rats in different groups(±s)(n=8)

Group Tail length Tailmoment Olive moment 1 10.131±1.421 0.373±0.110 0.719±0.155 2 34.638±3.825△△ 3.400±0.554△△ 2.261±0.528△△3 11.942±2.485＊＊ 0.585±0.155＊＊ 0.882±0.170＊＊4 14.088±2.194＊＊ 0.547±0.137＊＊ 1.015±0.354＊＊

2.3 小鼠血液各指标的相关分析

血液淋巴细胞的尾长、尾距和椭圆距与血清MDA含量显著正相关 (P＜0.01)。血液淋巴细胞的尾长、尾距和椭圆距与血清 SOD活性显著负相关 (P＜0.01)。血液淋巴细胞的尾长、尾距和椭圆距与血清 GSH-Px活性显著负相关 (P＜0.01)(表 3)。

表3 Correlation analyse of the item s

3 分析与讨论

3.1 一次力竭运动对小鼠血清自由基代谢、血液淋巴细胞DNA的影响

3.1.1 一次力竭运动对小鼠血清自由基代谢的影响自由基 (free radical)是指外层轨道上含有未配对电子的分子、原子、离子等物质。在生物体内主要是指氧自由基。在生命活动全过程中,时时伴有内源性自由基的不断产生和不断清除。正常情况下,体内的自由基保持在低浓度的动态平衡中,对机体不会造成伤害,但在特殊情况下,如大强度或力竭运动会使体内自由基生成增多而抗氧化酶活性相对不足,结果导致体内大量的自由基堆积并对机体产生损伤作用。自由基的毒性作用主要是直接损伤细胞膜,使细胞膜磷脂结构内多不饱和脂肪酸(PUFA)发生脂质过氧化反应,也使具有膜结构的内质网膜、溶酶体膜、线粒体膜等生物膜系统的结构和功能发生改变,导致细胞的广泛性损伤[7]。

丙二醛(MDA)是机体内脂质过氧化的代谢产物,其含量可以间接反映运动时自由基的生成。目前对运动后血液MDA含量变化的报道不尽一致。普遍认为,血液MDA含量不仅与运动的模式、强度及持续时间有关,还与脂质过氧化物产生与消除的动态平衡有关。有报道一次急性运动后血浆MDA含量明显增加;在极量和亚极量负荷运动下血浆MDA的含量均比安静时显著增加,且极量负荷运动后,MDA含量也非常明显高于亚极量负荷运动后[8,9]。但也有不同报道,倪耀华发现以 30%和 70%最大摄氧量的强度踏车至力竭时,血浆中MDA含量较安静时显著增加,但以 90%最大摄氧量的强度运动至力竭时却未发现 MDA含量有显著变化[9]。

本实验发现一次力竭运动后,与正常对照组相比,运动对照组小鼠血清MDA含量显著增加,运动后血液MDA含量增加的原因可能是急性运动中,线粒体氧利用率增加,为氧的单电子还原提供了可能。另外在氧运输过程中,血红蛋白和肌红蛋白自动氧化成高铁血红蛋白和高铁肌红蛋白过程中也可以产生自由基。

急性运动中组织相对缺氧和无氧代谢加强也是自由基产生增加的一个重要原因。在正常生理情况下,嘌呤核昔酸进行合成和分解,黄嘌呤脱氢酶催化黄嘌呤与 NAD十结合生成尿酸和NADH,不产生自由基。缺氧时细胞内ATP分解加剧,AMP剧增,进一步使黄嘌呤、次黄嘌呤生成增加。同时细胞内 Ca2+浓度增高激活钙依赖性蛋白酶,黄嘌呤脱氢酶在此酶的作用下转化成黄嘌呤氧化酶,激活的黄嘌呤氧化酶作用于黄嘌呤、次黄嘌呤便可使 O2还原成 O-2,并从而激发一系列的自由基反应。另外机体缺氧,乳酸生成增多,并在体内堆积。乳酸的还原使胞浆NADH、NADPH浓度下降,体内自由基抗氧化酶受破坏,不足以清除生成增加的自由基。

其他组织器官的氧化应激产物释放入血。关于急性运动后骨骼肌、肝脏、心肌、肾脏自由基产生已有大量的直接和间接证据,并且已经证实,疲劳组织中产生的 OFR可以在细胞外检测到[7-9]。

超氧化物歧化酶 (SOD)是唯一以氧自由基为底物的酶类,胞浆中的 CuSOD、ZnSOD等可以催化歧化为 H2O2和O2,从而起到清除的作用,而MnSOD可以清除线粒体中80%以上的;谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH-Px)可以分解过氧化氢及有机过氧化物,将其还原为 H2O和无毒醇类。

运动对血液超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶的影响,目前的研究结果尚存在分歧。杨阳等报道小鼠游泳力竭后即刻血液中 SOD、GSH-Px活性显著下降;吴宏军等发现小鼠爬杆力竭运动后即刻血浆 SOD活性明显下降;有学者报道小鼠游泳力竭后即刻、6小时及 24小时后,血清 GSH -Px活性均显著低于对照组。但一些报道认为,运动可导致血液 SOD,GSH-Px活性增强。运动强度愈高,SOD、GSH -Px活性增高愈明显,认为运动导致其活性增高是机体适应的结果。这些研究结果的不一致,可能与运动方式、运动强度和运动持续时间等有关[10]。

本实验发现一次力竭运动后,与正常对照组相比,运动对照组小鼠血清 SOD、GSH-Px活性显著下降。出现这种变化的原因可能是:运动后血液中的氧自由基显著增加,血液中的抗氧化酶绝对或相对不足,而且氧自由基的还原产物H2O2对 SOD本身也有杀伤作用[11]。

3.1.2 一次力竭运动对小鼠血液淋巴细胞DNA的影响运动造成的细胞 DNA损伤与运动强度、运动方式等有关。有学者[12]选用 12个健康的受试者做了一次大运动量的自行车训练实验,实验后将淋巴细胞分离出来做 DNA链断裂的分析,发现在高原低氧环境中 DNA的断裂程度在运动后即刻增加;但在海平面的运动后却没发现有 DNA断裂的现象。Hartmann A等研究发现受试者在功率自行车上跑步直到力竭,运动后 24小时取血样,在所有的受试者血样中都可见到明显的白细胞DNA链断裂。

本实验发现一次力竭运动后,运动对照组与正常对照组相比,反映小鼠血液淋巴细胞 DNA损伤的指标 (尾长、尾距和椭圆距)显著增加,且与血清MDA含量显著正相关,与血清 SOD、GSH-Px活性显著负相关,这与前人研究结果相一致[13]。其原因可能是:一次力竭运动后,机体自由基大量产生,超过 SOD、GSH-Px的防御能力。虽然不直接作用于DNA,但通过超氧化物歧化酶 (SOD)的作用可产生H2O2,当 H2O2不能被及时清除时,H2O2可进一步通过反应产生活性更高的OH·,OH·中极为活泼的单电子容易与亲核性的DNA分子结合,OH·可与脱氧核糖反应,产生核糖自由基,后者进一步导致碱基从DNA上脱落下来,甚至造成DNA链断裂。脂质过氧化物可以同样的方式造成 DNA损伤。断裂的DNA链需要不断进行修复,而参与DNA修复的酶也同时会受到自由基的攻击而影响其功能的发挥。

3.2 北冬虫夏草和人参茎叶提取物对一次力竭运动小鼠血清自由基代谢及血液淋巴细胞DNA损伤的影响

运动训练或体育健身引起疲劳后,如果不采取有效措施予以消除,不仅会影响运动训练和体育健身,还有可能引起病理性变化,使身体健康受到损害。由此可见,研究运动疲劳产生的机制对于减轻和消除运动性疲劳、促进身体健康是有重要意义的。

随着自由基研究不断深入,已明确羟自由基是最活泼的氧自由基之一,可介导机体组织脂质过氧化,蛋白质解聚、聚合、核酸断裂和多糖裂解等生化过程,引发组织细胞病变而导致各种疾病发生和加速机体衰老。已有的研究结果直接或间接证明了急、慢性运动可引起氧自由基的增加,从而造成了机体一系列病理损伤[14]。适量补充外源性清除羟自由基药物,可预防这类损伤和病变的发生与发展。北冬虫夏草(CordycepsmilitarisLink)又称北虫草、蛹虫草,是虫草属真菌侵染到昆虫蛹体上形成的子实体。与冬虫夏草同属不同种,具有类似冬虫夏草的药理作用:包括镇静、延长睡眠、抗氧化、抗缺氧作用,可替代冬虫夏草入药。主要含有虫草素、虫草酸、虫草多糖、SOD、蛋白质、维生素 10余种、矿质元素20余种。据祖国医著《本草纲目》、《药性考》以及现代研究表明,它具有保健益肾,止血化痰,秘精益气,阴阳双补,增强免疫力等多种功能[15]。

已有研究结果显示:北虫草对氧自由基和羟自由基具有明显的清除作用,其清除羟自由基的作用强于羟自由基的特异清除剂甘露醇,表明:北虫草具有抗脂质过氧化作用[16,17]。有实验报道,虫草菌粉可明显降低老龄大鼠血浆中MDA水平,以及肝组织中MDA水平;人工虫草菌丝体能明显降低衰老模型小鼠全血MDA水平;使血中 SOD水平及 GSH-Px活性升高[17]。

本实验发现一次力竭运动后,虫草组小鼠血清MDA含量均显著下降,血清 SOD活性明显增高,GSH-Px活性显著增高;反映血液淋巴细胞 DNA损伤的指标:尾长、尾距和椭圆距均显著降低。

虫草素和D-甘露醇可能是虫草中对自由基具有清除作用的有效成分之一,其中虫草素对超氧阴离子自由基具有较强的特异性清除作用,对羟自由基的清除作用较弱,而虫草中含有的D-甘露醇本身就是羟自由基的特异性清除剂,所以可以推测虫草对超氧阴离子自由基的清除作用来自于虫草素等组分,而对羟自由基的清除作用是虫草素和D-甘露醇等组分共同作用的结果。推断虫草对自由基的清除作用主要是其主要有效成分虫草素和 D-甘露醇共同作用的结果[17]。此外,对虫草素和 DNA作用的紫外荧光光谱的研究表明,虫草素和DNA确实存在相互作用,通过磷酸盐和作Scatchard方程作图推测虫草和 DNA作用方式为混合方式,即虫草素可与 DNA的磷酸基团作用,虫草素还可以插入DNA双螺旋的嵌插方式存在,至于是否还存在其他作用方式有待进一步研究。

人参茎叶提取物抗自由基、抗脂质过氧化的作用已被证实[18]。本实验发现一次力竭运动后,与运动对照组相比,人参组小鼠血清MDA含量显著下降,血清 SOD和 GSH-Px活性显著增高,这与有关的报道相一致[3]。虫草和辽东楤木组与人参组相比,血清MDA含量、SOD及 GSH-Px活性均没有显著性差异,提示北虫草和辽东楤木具有与人参类似的抗氧化作用。

有关人参茎叶提取物对遗传物质损伤的保护作用已有报道[42],但对运动后血液淋巴细胞 DNA损伤的保护作用的研究尚未见报道。本实验观察了人参茎叶提取物对一次力竭运动后小鼠血液淋巴细胞 DNA损伤的影响,发现人参组小鼠反映血液淋巴细胞 DNA损伤的指标——尾长、尾距和椭圆距均显著降低,说明人参茎叶提取物对此运动造成的血液淋巴细胞DNA损伤起到了一定的保护作用。与人参组相比,虫草组反映DNA损伤的指标均没有显著性差异,提示北虫草对一次力竭运动小鼠血液淋巴细胞 DNA损伤的保护作用与人参的作用相类似。

4 结论

1)北冬虫夏草可以提高小鼠血清 SOD、GSH-Px的活性,降低血清MDA的含量,减少了自由基对DNA的直接损伤。

2)北冬虫夏草对一次力竭运动导致的小鼠血液淋巴细胞DNA的损伤具有保护作用,与人参的作用效果相类似。

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Effect of CordycepsM ilitarisL on DNA Damage of Lymphocyte in Blood ofM ice After Exhaustive Exercise

L I L inyan1,L IU Shaoying2,L I Shuping3,CHANG B o4
(1.D epar tm ent of Physical Education,Jingdezhen Ceram ic Institute,Jingdezhen333001,Jiangxi,China;
2.Sports Science Institute of Jishou U niversity,Jishou416000,Hu’nan,China;
3.D epartm ent of Physical Education,Hanshan N orm al U niversity,Chaozhou521041,Guangdong,China;
4.D epartm ent of Hum an Exercise Science,Shenyang Sport U niversity,Shenyang110102,L iaoning,China)

O bjective:To provide the experim ental evidences for Cordyceps m ilitaris L staving and el im inating exercise-induced fatigue.M ethods:sixty m ouses w ere divided into4groups at random:norm al contrast group(NC,n=16),exercise contrast group(EC,n=16),exercise and Cordyceps m ilitaris L group(ECM,n=16),exercise and Panax ginseng group (EP,n=16).The authors adopted exhaustive exercise.In order to m ake sure there w ere8rats in every group,the authors el im inated the superabundance rats random ly after the exercise and m easured the DNA dam age of lymphocyte,m alondialdehyde(MDA)content,superoxide dism utase(SOD)and glutathione peroxidase(GSH-Px)activities in serum of rats by SCGE,TBA,XO and D TNB m ethods.Results:(1)Compared w ith NC group,theMDA content increased rem arkably(P＜0.01),the SOD and GSH-Px activities in serum of rats decreased m arkedly in EC group(P＜0.01).Compared w ith EC group,the MDA content decreased rem arkably(P＜0.01),the SOD activities in serum of rats increased in ECM group(P＜0.05),the GSH-Px activities in serum of rats increased m arkedly in ECM group(P＜0.01);the MDA content decreased m arkedly(P＜0.01),the SOD and GSH-Px activities in serum of rats increased rem arkably in EP group rats(P＜0.01).(2)Compared w ith NC group,Tail length,Tailm om ent and O live m om ent of lymphocyte increased observably in EC group rats(P＜0.01).Compared w ith EC group,Tail length,Tail m om ent and O live m om ent in ECM group rats reduced evidently(P＜0.01);there w ere an obvious decrease in Tail length,Tail m om ent and O live m om ent(P＜0.01)in EP group rats.Conclusion:(1)Cordyceps m ilitaris L can elim inate the free radical,enhance the SOD and GSH-Px activities in serum of rats and reduce the dam age of DNA caused by OH·etc.(2)Cordyceps m ilitaris L can attenuate exerciseinduced DNA dam age after exhaustive exercise.The function is sim ilar to that of Panax ginseng.

Cordyceps m ilitaris L;exhaustive exercise;lymphocyte;DNA dam age

常波(1964-),男,教授,博士,沈阳体育学院运动人体科学系,E-mail:changbo8387@163.com,Tel:024-89166366;15949278858。

G804.7

1004-0560(2010)05-0048-05

2010-08-12;

2010-09-09

辽宁省教育厅科学技术研究项目:不同中药提取物对运动训练鼠脑组织代谢和调节的实验研究,项目编号为 2009A670。

李琳燕(1977-),女,讲师,硕士,主要研究方向为运动生物化学。

责任编辑:乔艳春

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