吲哚拉明和延胡索镇痛作用的比较医学实验研究

青岛市市立医院（266071）庄安士 丁虹

α受体颉颃剂的经典作用是通过阻断α1、α2受体产生血管扩张、血压降低、兴奋心功能以及拟胆碱和组胺样作用。其兴奋心功能作用是通过阻断α2受体促进去甲肾上腺素释放，进而加强了β1作用，使心脏兴奋。近几年研究发现，α2受体不仅与促去甲肾上腺素释放有关，还与其他参与痛觉过程的物质如前列腺素等的释放有关。研究还发现，疼痛的发生与痛觉传递与交感神经有密切关系。但是以上结论还没有得到临床的证实。吲哚拉明是α受体颉颃剂，它能阻断α1、α2受体，能够对交感神经产生阻滞作用。现在对其是否具有镇痛作用尚无定论，也没有临床确切的镇痛效果。笔者采用小鼠扭体实验和热板法，以小鼠扭体反应次数和小鼠神经模型缩爪反应潜伏期（HWL）为痛阈指标，对吲哚拉明在内脏痛和神经源性痛的镇痛作用进行了研究。

1材料与方法

1.1 材料 体重18～24g的小鼠75只，均为雄性，由青岛大学实验动物中心提供。所有小鼠都按HWL<3s或>5s和扭体次数15min内小于40或大于20为标准进行了筛选，去除了对刺激反应迟钝和过于敏感的小鼠。实验期间都正常自由取食和饮水，光暗周期12h/12h。实验药品是吲哚拉明和0.55%冰醋酸溶液。以上药品在进行注射时均用生理盐水配置成对应的浓度。

1.2 方法 实验分为两个部分，热板实验和扭体实验。热板法：取18只小鼠随机分为三组，每组6只，分别为正常组、对照组（生理盐水组）和实验给药组（吲哚拉明组）。首先，对实验小鼠进行4天的热板刺激适应性训练，使小鼠的对热刺激反应较为平稳。实验用热板温度为55摄氏度并维持。其次，制备神经痛模型，将对照组和吲哚拉明组的小鼠进行外周神经损伤的神经痛模型。对小鼠腹腔内注射鲁米那（35mg/kg）麻醉，而后分离左侧坐骨神经，在坐骨神经的中段2mm处用4号羊线疏松结扎5线，缝合好皮肤。然后饲养6天后进行热刺激实验。实验组腹腔注射吲哚拉明3mg/kg，对照组同样腹腔注射同体积生理盐水。分别在给药的第1、2、3、4天测试小鼠对热刺激的缩爪反应潜伏期（HWL）。

醋酸扭体法：取48只小鼠随机分为8组，每组6只。8组小鼠再随机分为2大组，每大组有4小组。两大组分别为对照醋酸组和吲哚拉明组。吲哚拉明组腹腔注射3.5mg/kg吲哚拉明，对照醋酸组腹腔注射同体积的生理盐水。然后所有两大组中的4小组又随机分别在吲哚拉明组注射吲哚拉明后的第1d、2d、3d、4d接受腹腔注射0.55%冰醋酸溶液0.2ml，产生扭体反应，记录小鼠15min内扭体次数。

1.3 统计学处理 研究和处理只选取实验中的第1、2、3、4天的数据，所有数据均为均数±标准差（±s）表示，统计分析用完全随机的方差分析（单因素方差分析），各组均数间比较用Student-Newman-Keuls法。所有统计分析H0均为没有差别，H1为有差别，均以P<0.01为有统计学意义。

2 结果

2.1 吲哚拉明明显增加小鼠对热刺激的缩爪反应潜伏期（HWL）在1～4天的热刺激实验中，坐骨神经结扎的对照组（生理盐水组）和吲哚拉明组的HWL都明显低于正常未被结扎小鼠的HWL值，P<0.01。对照组与吲哚拉明组的HWL值明显具有统计学意义的差别，表现为在1～4天的热板实验中，吲哚拉明组HWL都显高于对照组的HWL，P<0.01。热板实验数据见附表1。

2.2 吲哚拉明明显抑制小鼠的扭体反应次数 在1～4天的腹腔内注射0.55%冰醋酸溶液0.2ml后，吲哚拉明组和对照醋酸组的扭体反应次数具有明显的统计学意义，表现为每天的吲哚拉明组小鼠明显扭体反应次数都明显低于醋酸对照组，P<0.01。扭体实验数据见附表2。

3 讨论

交感神经的功能障碍、神经节的受损等与交感神经性疼痛有关。这种疼痛的神经病理学的主要表现为交感神经介导性[1]。目前在临床中所遇到的部分急性疼痛和多数慢性疼痛，大都是混合性疼痛。其疼痛机理复杂，有多种化学物质、递质、受体、神经纤维、激素等参与其中。痛因不同而有不同的临床表现[2]。本实验观察到，在注射吲哚拉明后，外创性慢性神经痛模型的小鼠在热板法中明显产生了HWL延长的现象；而在醋酸法中，注射了吲哚拉明的小鼠明显较少了扭体次数。这些都说明作为α受体阻断剂的吲哚拉明有明显的镇痛作用。

神经损伤后，交感神经在后根神经节或末梢神经水平上，对感觉神经系统给予影响；交感神经节后纤维、儿茶酚胺局部或全身用药时即可引起反应；其机制是由于交感神经纤维内存在的儿茶酚胺、神经肽Y分别作用于α1、α2受体或Y1、Y2受体的结果。痛过用羊肠线疏松结扎坐骨神经的方法，建立的外创性慢性神经痛小鼠模型已广泛应用各类疼痛研究实验中[3]。临床上类似的疼痛病例表现为灼痛等难耐性疼痛。这种疼痛与交感神经有密切关系，往往采用物理或药物破坏神经节的方法。但现在发现这一方法有着不可忽视的不良反应，且效果还有待进一步地探讨。因此，对于采用药物阻滞交感神经及其递质和受体的方法，已越来越得到重视。本实验就观察到α受体阻断剂的吲哚拉明对慢性神经痛模型小鼠有着明显镇痛作用,给人们已启示。

附表1 外周神经损伤慢性神经痛模型小鼠腹腔注射吲哚拉明对热刺激的缩爪反应潜伏期作用（HWL）(sec,±s,n=6)

附表1 外周神经损伤慢性神经痛模型小鼠腹腔注射吲哚拉明对热刺激的缩爪反应潜伏期作用（HWL）(sec,±s,n=6)

注：①与正常组的HWL值比较，P＜0.01；②与生理盐水（对照组）的HWL值比较，P＜0.01

组别 例数 腹腔注射吲哚拉明后的时间(天)1 2 3 4正常组 6 6.53±0.16 6.45±0.24 6.14±0.15 6.12±0.06生理盐水组 6 4.43±0.17① 4.23±0.35① 4.16±0.28① 4.27±0.43①吲哚拉明组 6 5.57±0.14①② 5.95±0.36①② 5.56±0.17①② 5.34±0.43①②

附表2 小鼠腹腔注射吲哚拉明对0.55%冰醋酸的扭体作用（扭体次数）( ±s,n=6)

附表2 小鼠腹腔注射吲哚拉明对0.55%冰醋酸的扭体作用（扭体次数）( ±s,n=6)

注：① 与对照醋酸组扭体次数比较，P＜0.01

组别 例数 腹腔注射吲哚拉明后的时间(天)1 2 3 4对照醋酸组 6 25.73±1.17 26.25±2.34 25.55±2.17 26.46±1.85吲哚拉明组 6 8.24±1.16① 12.92±1.16① 15.57±2.11① 22.36±1.98①

总之，本实验观察到，建立慢性神经痛模型的小鼠比正常小鼠在热板法中表现出了极大的疼痛反应，其HWL值明显缩短，表明这一疼痛的难耐性。在腹腔注射了吲哚拉明后，该模型的小鼠HWL值明显比生理盐水对照组延长，表明吲哚拉明有着明显的镇痛作用。但是笔者也观察到其HWL值并没有接近正常小鼠值，这说明吲哚拉明的镇痛作用是否理想，可否应用于临床治疗，还有待于进一步研究。在醋酸法的实验中，笔者观察到注射吲哚拉明的小鼠其扭体次数明显减少，这说明吲哚拉明对冰醋酸引起的内脏痛有明显的镇痛作用。本实验对α受体阻断剂吲哚拉明具有镇痛作用提供了有效的动物实验依据。