催化动力学光度法测定芦丁
2010-10-23陈海燕毛云飞
陈海燕,毛云飞
(扬州工业职业技术学院,江苏扬州225002)
催化动力学光度法测定芦丁
陈海燕,毛云飞
(扬州工业职业技术学院,江苏扬州225002)
在氢氧化钠介质中,芦丁对高碘酸钾氧化偶氮胂Ⅲ褪色反应有明显的催化作用,据此建立了测定芦丁含量的催化动力学光度法.最大吸收波长为590 nm,该方法的线性范围为0.03～1.0 mg/L.对实验数据进行回归处理的线性方程为Δ Α=0.448 5c(芦丁)+0.001 1,相关系数为 r=0.998 5,检出限为0.016 7 mg/L.该方法简便,快速,灵敏度高,用于实际样品的测定,结果令人满意.
催化动力学光度法;高碘酸钾;偶氮胂Ⅲ;芦丁
芦丁(rutin)又名维生素 P、芸香甙,广泛存在于槐米、葫芦茶,毛冬青,连翘,荞麦、橙皮、番茄等物质中,具有抗炎、抗病毒和清除自由基的作用,可用于糖尿病、高血压、脑溢血的辅助治疗.最新报道,芦丁具有较强的抗癌活性,是很有潜力的抗癌化合物.目前测定芦丁的方法越来越多,有分光光度法[1]、色谱法[2]、电化学法[3]、荧光分析法[4]、极谱法[5]等.
由于动力学光度分析法具有灵敏度高,仪器试剂易得及操作简便快速等优点,近年来在芦丁检测中已有应用[6-7],但以高碘酸钾氧化偶氮胂Ⅲ作为指示反应的方法未见报道.作者在实验中观察到,芦丁在NaOH介质中能催化高碘酸钾氧化偶氮胂Ⅲ褪色的反应,据此建立了催化动力学光度法测定芦丁的新方法,并用于芦丁片中芦丁含量的测定,结果满意.
1 实验部分
1.1 仪器和试剂
V-1100可见分光光度计(上海美普达仪器有限公司);HH-S恒温水浴锅(浙江省余姚市检测仪表厂);FC204型电子分析天平(上海精密仪器有限公司天平厂).
芦丁标准溶液10.0 mg/L:用蒸馏水配制1.0 g/L的储备液(配制时加几滴0.05 mol/L氢氧化钠溶液使其完全溶解),4℃以下冰箱内保存.用时用25 mL移液管取1.0 g/L的芦丁到2 500 mL容量瓶中,定容、摇匀.0.05 mol/L氢氧化钠溶液;0.2 g/L偶氮胂Ⅲ溶液;0.01 mol/L高碘酸钾溶液;所用试剂均为分析纯,水为二次蒸馏水.
1.2 实验方法
取10 mL的具玻璃塞比色管2支,其中一支加入0.5 mL芦丁标准溶液;另一支不加催化剂芦丁.然后分别依次加入0.05 mol/L的NaOH溶液1.1 mL,0.2 g/L的偶氮胂Ⅲ溶液2.0 mL,0.01 mol/L的高碘酸钾溶液0.6 mL,加水至刻度,混匀.70℃水浴加热反应10 min后,迅速打开管塞用流水冷却3 min,以蒸馏水为参比,用1 cm比色皿于590 nm波长处测量非催化体系的吸光度A0和催化体系的吸光度A,计算ΔA=A0-A值.
2 结果与讨论
2.1 吸收曲线
按实验方法配制一系列不同组分的溶液,在530～650 nm的波长范围内分别测定吸光度.并绘制吸收曲线见图1.
结果表明,反应前后,偶氮胂Ⅲ的吸光性质不变,最大吸收波长为590 nm.故选用590 nm为测定波长.在氢氧化钠介质中,高碘酸钾可氧化偶氮胂Ⅲ使之褪色,芦丁对此褪色反应有显著的催化作用.
2.2 适宜介质
由于芦丁难溶于水,易溶于NaOH溶液,故本体系选用碱性介质.试验表明,NaOH浓度对反应的影响较大,0.05 mol/L NaOH溶液用量在0.3～1.0 mL范围内,ΔΑ随NaOH用量的增大而增大;1.0～1.2 mL范围内,ΔΑ达到最大且比较稳定;在1.2～1.5 mL范围内,ΔΑ随NaOH用量的增大而减小.故实验确定NaOH溶液的用量为1.1 mL.
2.3 高碘酸钾和偶氮胂Ⅲ用量的选择
按实验方法,其他条件不变,改变高碘酸钾和偶氮胂Ⅲ的用量.实验表明,0.01 mol/L高碘酸钾用量在0.5～0.6 mL之间,ΔΑ达到最大且相对稳定,所以选择加入高碘酸钾用量为0.6 mL.0.2 g/L偶氮胂Ⅲ的用量在0.5～2.0 mL之间,ΔΑ随其用量的增大而增大;偶氮胂Ⅲ的用量大于2.0mL,ΔΑ的值趋于恒定.所以选用偶氮胂Ⅲ的用量为2.0 mL.
2.4 反应温度和加热时间
图1 吸光度曲线Fig.1 Absorption curves
按实验方法,其他条件不变,改变加热的温度,可以测得温度与ΔΑ的关系.实验表明在65℃之前,ΔΑ随温度的上升而增大;在75℃之后,ΔΑ随温度的上升而减小.而在65 ℃～75 ℃之间,ΔΑ较大且比较稳定,故本实验选择在70℃下进行.
按实验方法,其他条件不变,改变加热时间,可以测得加热时间与ΔΑ的关系.实验表明加热时间在10～15 min 之间 ,ΔΑ较大且比较稳定 ;加热时间过长 ,ΔΑ值随加热时间的增加而减小.故本实验选择的加热时间为10 min.
2.5 工作曲线、线性范围和检出限
按实验方法,其他条件不变,改变芦丁标准溶液的用量,可以测得其用量与ΔΑ的关系,如图2所示.线性方程为ΔΑ=0.448 5c(芦丁)+0.001 1,相关系数r=0.998 5,11次空白试验求得标准偏差为0.25%,进而求得检出限为0.016 7 mg/L,线性范围为0.03～1.0 mg/L.
图2 校准曲线Fig.2 Calibration Curve
3 样品分析
取10片芦丁片,研细混匀.准确称取0.100 0 g于小烧杯中,溶解后定容于250 mL容量瓶中.测定时稀释10倍,取适量按实验方法进行测定,同时做标准加入回收实验,结果如表1所示.6次测定的相对标准偏差为2.2%,回收率在97.9%～100.7%之间.
表1 样品分析结果及回收率(n=6)Table 1 The analytical results of sample and recovery(n=6)
[1]练萍,李蕾,赖闻玲,等.双水相体系萃取分离-紫外分光光度法测定桑叶中芦丁[J].理化检验-化学分册,2006,16(42):821-823.
[2]符继红,张丽静.高效液相色谱法测定新疆玫瑰花中芦丁的含量[J].分析仪器,2008(1):44-46.
[3]孔令蜜,李梦瑶,彭斌,等.纳米复合物修饰电极的电化学传感器检测芦丁[J].分析实验室,2009,28(2):8-11.
[4]绍承斌,吴四维,田龙,等.极谱催化波法测定中草药中的芦丁[J].分析实验室,2006,25(11):103-105.
[5]张敏,曹庸,唐纯翼,等.Al3+-芦丁二元络合物荧光光度法测定银杏叶中总黄酮的含量[J].分析科学学报,2005,21(2):188-190.
[6]刘道杰,张爱梅,田林芹.高碘酸钾氧化丁基罗丹明B催化动力学光度法测定微量芦丁[J].分析化学,2003,31(10):1224-1227.
[7]崔慧,陶绪泉,张爱梅,等.催化动力学光度法测定微量芦丁[J].光谱实验室,2003,20(5):706-709.
Determination of Rutin by Catalytic Kinetic Spectrophotometry
A catalytic kinetic spectrophotometric method was established to determine trace rutin based on the catalysis of rutin to the discoloring reaction of arsenazoⅢoxidized by potassium periodate solution;and it was adopted to detect rutin of practical specimens.Results indicate that the maximum absorption is at 590 nm,and the linear range for measurement is 0.03～1.0 mg/L.Besides,linear formula for regression processing of experimental data can be expressed asΔ Α =0.448 5c+0.001 1,with correlating coefficient and detection limit being 0.998 5 and 0.016 7 mg/L,respectively.The method is easy to operate,expeditious,and sensitive,and can be well practically used for determination of rutin.
catalytic kinetic spectrophotometry;potassium periodate;arsenazoⅢ;rutin
O 657.32
A
1008-1011(2010)05-0085-03
2010-06-13.
陈海燕(1976-),女,讲师,硕士.从事分析化学的研究.E-mail:chenhaiyan@ypi.edu.cn.
