2006年-2007年长沙市高致病性PRRS流行特点调查*

宁华杰,尹莉亚,缪智刚,王 辉,吴 杰,刘 浩,柳 斌,刘增再

(1.长沙市动物防疫监督站,湖南长沙 410013;2.长沙市畜禽水产品质量检测中心,湖南长沙 410013)

高致病性猪繁殖与呼吸综合征(Highly pathogenic porcine rep roductive and respiratory syndrome,HP-PRRS)也称高致病性猪蓝耳病,是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株引起的一种急性高致死性传染病[1]。该病从2006年夏秋季起,在我国大部分地区暴发流行,仔猪发病率达100%、死亡率达50%以上,母猪流产率达30%以上,育肥猪和种猪也可发病死亡。由于该病传播快、发病率和病死率高、危害大、康复后带毒、排毒期长,已成为危害养猪业生产安全的主要动物疫病之一[2-4]。2006年-2007年长沙市也发生较大规模HP-PRRS流行,给养猪生产造成了严重损失[5-7]。本研究采用追溯方式对该市HP-PRRS流行特点进行了探讨,为有效防控 HPPRRS疫情提供基础数据。

1 材料与方法

1.1 材料

HP-PRRS反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测试剂盒购于农业部兽医诊断中心,批号为PRRS-200706等。

1.2 方法

1.2.1 问卷调查 长沙市动物防疫监督站研究制定了《长沙市高致病性猪蓝耳病(HP-PRRS)流行病学和综合防控措施的研究项目实施方案》,设计了《长沙市动物防疫问卷调查表》,利用市、县、乡、村四级动物疫情监测和报告网络,在HP-PRRS流行乡镇开展问卷调查和跟踪调查。本次调查共计发放流行病学调查表格1 500套,回收有效问卷1 276套。

1.2.2 现场调查 2006年-2007年,长沙市动物防疫监督站共计走访患病场(户)1 326个,开展流行病学个案调查554起,检测各种病料和血清样品5 725份,获取了大量HP-PRRS猪群发病与流行病学背景资料,本研究对这部分资料进行了详细整理和分析。

1.2.3 病料及血清样品采集 病料取自各发病养猪场(户),对濒死和死亡生猪进行剖检,采取心、肝、脾、肺,肾、肠系膜淋巴结等组织样品,置-20℃冰箱保存备用。

1.2.4 HP-PRRSV RT-PCR检测 在变异株核苷酸缺失区域信息的基础上,设计一对变异株的特异性引物,引物 PRRSV-down:TGAGTATTTTGGGCGTGTGAT,对应于变异株序列的3142～3162。由其构成PRRSV Nsp 21594～1680变异株特异性 RT-PCR检测体系,目标产物的长度为400 bp。具体试验步骤略。

1.2.5 其他病原的检测 猪瘟、猪圆环病毒Ⅱ型、猪伪狂犬病病毒、猪流行性感冒病毒及细菌学检测等方法略。

2 结果

2.1 疫情调查结果

2.1.1 HP-PRRS疫情流行基本情况 2006年7月19日长沙市宁乡县花明楼和双江口镇首先出现疫情,均由该县某仔猪交易市场购进外来仔猪引起发病。该疫病在长沙市发生较大规模流行尚属首次,呈现发病急、传播快和死亡率高的基本特点。2006年、2007年疫情场户生猪发病率、死亡率和病死率分别为达40.75%、17.14%和 42.05%,严重危害生猪生产(表1)。

2.1.2 HP-PRRS疫情时间分布 2006年-2007年长沙市生猪HP-PRRS发病的时间分布情况见图1和图2。

表1 2006年-2007年HP-PRRS发病猪场(户)的生猪发病率及病死率Table1 The HP-PRRS in ciden ce and sick-death rate of pigs from 2006-2007

图1 2006年长沙市生猪HP-PRRS流行曲线图Fig.1 Epidem ic curve of HP-PRRS in pigs in Changsha in 2006

图2 2007年长沙市生猪HP-PRRS流行曲线图Fig.2 Epidem ic curve of HP-PRRS in pigs in Changsha in 2007

从HP-PRRS流行曲线图可以看出,HP-PRRS具有明显的季节性,大约每年6月～7月开始发病,6月～8月进入疫情高发期,9月以后疫情逐渐平稳,10月后很少有发生。

2.1.3 HP-PRRS发病猪群分布 按生猪类群分析,在各类猪群中仔猪最易感,发病率和死亡率最高(87.36%、47.99%),中猪次之,发病率和死亡率分别为31.79%和12.22%,种猪和肥猪的发病率和病死率相对较低(种猪发病率为8.64%,死亡率为2.23%;肥猪的发病率为 10.52%,死亡率为3.11%)。一般是断奶仔猪首先发病,架子猪、母猪、肥猪随后相继发生。

2.1.4 HP-PRRS发病猪的品种分布 按生猪品种类别分析结果表明:不同品种猪的发病率和死亡率以良种猪最高(45.05%和22.35%),杂交猪种次之(41.65%和18.73%),本地品种发病率和死亡率较低(34.34%和16.21%),尤以地主品种“宁乡猪”相对抗病力最强,发病率和死亡率分别仅为20.56%和4.84%。

2.1.5 HP-PRRS疫情区域分布 2006年-2007年长沙市生猪HP-PRRS流行具有明显区域性分布特点。2006年长沙市共有33个乡镇发生 HPPRRS疫情,其中78.8%的乡镇位于宁乡县境内、6.1%位于浏阳市、12.1%位于望城县、3.0%位于长沙县;2007年共有38个乡镇发生HP-PRRS疫情,65.8%的乡镇位于宁乡县境内、5.3%位于浏阳市、10.5%位于望城县、13.1%位于长沙县、5.3%位于长沙市开福区。疫情仍集中在宁乡县,呈暴发流行态势,其余区、县呈点状散发或小范围流行态势。这一分布特点与该县生猪的市场交易和流动密切相关。宁乡县是湖南省有名的仔猪交易集散地并在流沙河镇建有专门的仔猪交易市场,仔猪交易十分频繁,生猪的市场交易是传入和迅速传播HP-PRRS的重要因素。

2.1.6 HP-PRRS疫情与气候变化的关系 2006年7月15日～8月13日,长沙市连续遭到“碧利斯”、“格美”、“派比安”和“桑美”四次强台风或超强台风影响击,气候发生剧烈变化,同期疫情快速扩散,出现3次发病高峰(图3)。

图3 2006台风因素与生猪 HP-PRRS疫情关系图Fig.3 The relationship betw een typhoon and HP-PRRS in 2006

2007年6月下旬至8月,长沙遭遇50年未遇的特大旱情,持续高温。沩水和捞刀河二河流域由于上游来水偏少,下游频现“肠梗阻”,多次出现断流,水质污染相当严重。2007年长沙市生猪HP-PRRS疫情也主要集中分布于二河流域,二河流域共计发病乡镇数76个,占总发病乡镇数的85.67%。究其原因,可能与持续干旱后,水源卫生质量下降且受到违法丢弃病死猪的污染,沿河部分养殖户因不得不从河中取水喂猪而增加生猪直接感染的可能性有关。

因此,气候异常变化因素对2006年和2007年该市HP-PRRS流行产生了重要的辅助性影响。

2.2 实验室检测

2006年7月-2007年10月期间,该市共计采集肝脏、肺脏、肾脏、病变淋巴结等病料样品897份,细菌学分离检测样品1 409份,分别送哈尔滨兽医研究所、华南农业大学、湖南农业大学、湖南省兽医总站和长沙市检测中心等地进行实验室检测,本研究对几大检测机构检测数据进行了汇总分析。

2.2.1 HP-PRRSV RT-PCR检测 对采集的病死生猪样品,应用自己设计的一对引物,以剪取的病料为模板,采用PCR检测方法进行HP-PRRS病毒核酸的检测。PCR扩增产物经20 g/L琼脂糖凝胶电泳后的阳性结果见图4。

图中被检样品在400 bp左右出现了阳性条带,表明有HP-PRRSV感染存在。

2.2.2 病原检测结果 对897份病料随机进行了高致病性猪蓝耳病病毒、猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪瘟病毒、伪狂犬病病毒和猪流感病毒抗原检测。结果表明,HP-PRRS抗原阳性率最高,高达77.35%,猪圆环病毒2型次之,为 51.55%,其他病原检出率较低,分别为为3.90%～18.46%不等(表2)。说明HP-PRRS在本次疫病流行中呈现十分活跃状态,是2006年-2007年长沙市生猪疫情的主要病因。

表2 抗原检测结果Table2 Results of antigen examination

为分析HP-PRRSV混合感染情况,本调查采用HP-PRRSV抗原检测阳性的45份病料,对猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒、猪流感病毒抗原进行检测,结果仍显示,圆环病毒2型的混合感染率最高(53.33%),猪细小病毒的感染率次之(26.67%),其他病原的感染率则较低,分别为6.67%～8.89%(表3)。

表3 病猪淋巴结和肺脏样品RT-PCR检测结果Table3 The detetion results of lym ph nodes and lungs in sick pigs by RT-PCR

2.2.3 细菌学分离检测结果 对HP-PRRSV抗原阳性的45份病料进行了细菌学检查,检测结果见表4。细菌学检测结果表明:在 HP-PRRS感染病例中,一定程度地存在大肠埃希菌、沙门菌、巴氏杆菌、副猪嗜血杆菌、链球菌、支原体和葡萄球菌混合感染情况。这些病菌的混合感染可能加重HP-PRRS病猪的病理损害过程,导致高的死亡率。

表4 样品细菌学分离检测结果Table4 The detection results of bacteriology from sam ples

3 讨论

HP-PRRSV是造成2006年-2007年长沙市生猪疫病流行的主要病原,疫情的流行具有明显的时间、种群、品种和区域分布特点。疫病的流行与生猪流动、异常气候、多种病原混合感染、饲养管理等多种因素有关,生猪市场交易流动是导入和迅速传播HP-PRRSV的重要因素。在HP-PRRSV感染病例中,多种病原混合感染或交叉感染可能是造成HPPRRSV高发病率和高死亡率的主要原因。猪圆环病毒2型、猪流感病毒、伪狂犬病病毒等均有隐性感染、持续感染与混合感染的特点,它们能够破坏机体的免疫细胞的功能,导致机体免疫抑制[8],干扰机体的正常免疫[9],造成免疫麻痹和免疫耐受,致使猪的免疫力下降[10]。一旦猪只发生高致病性猪蓝耳病,不仅造成上述疫病致病性增强,而且可能继发巴氏杆菌、链球菌、沙门菌、副猪嗜血杆菌和支原体等感染,造成多病原混合和交叉感染。

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