减肥类中成药、保健食品和食品中非法添加盐酸西布曲明的检测

杨文红 黄奕滨 黄诺嘉

广东省汕头市药品检验所（515041）

近几年，肥胖已经成为影响最大的全球成年人疾病，可诱发或加重糖尿病、脂肪肝、心脑血管系统疾病等，越来越引起人们的重视。由于受“中药治本，西药治标”、“中药没有不良反应，西药不良反应大”等传统观念的影响，使许多人比较愿意使用减肥类中成药或保健食品。但中成药或保健食品起效缓慢，不法商家便在减肥类中成药、保健食品和食品中非法添加盐酸西布曲明（sibturamine hydrochloride，STH）等化学药品提升自己产品的功效，以此牟取暴利。消费者在不知情的情况下服用了含有该成分的减肥保健食品，有可能产生严重的后果，严重危害消费者的身体健康。

为了有效打击这种制假掺伪的不法行为，本文参考有关文献[1]，建立减肥类中成药、保健食品和食品中非法添加STH的检测方法，并据此检测25批市售的中成药、保健食品和食品中是否掺入了STH。

1 仪器与试药

1.1 仪器

岛津LC-10ATvp型高效液相色谱仪（包括自动进样器、柱温箱、二极管阵列检测器）；超声波清洗器[KUDOS SK 250 LHC型（300W、50kHz）]。

1.2 试药

STH对照品（中国药品生物制品检定所，批号：100624-200401，供含量测定用）；

25批样品均为市售品；甲醇为色谱纯：水为超纯水；其他试剂为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件与系统适应性试验

以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾（55∶45，用磷酸调节pH值至3.0±0.1）为流动相；检测波长为223nm；DAD：190～400nm；柱温：40℃。理论板数按盐酸西布曲明计算应不低于2000。

2.2 对照品溶液的制备

精密称取经五氧化二磷减压干燥24h的盐酸西布曲明对照品适量，精密称定，加乙醇制成每1mL含0.1mg的溶液，即得。

2.3 供试品溶液的制备

若供试品为片剂，研细，精密称定约1片量；若供试品为胶囊剂，取出内容物研细，精密称定约1粒量；若为颗粒剂、袋泡茶等固体制剂，研磨粉碎，精密称定约1/2包量；若供试品为口服液，量取1/2次服用量；分别置100mL量瓶中，加乙醇适量，超声处理2min，放冷至室温，用乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.4 测定法

分别精密吸取照品溶液与供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定，即得。

2.5 结果判断

供试品色谱中不得呈现与对照品保留时间一致的色谱峰。如出现与对照品保留时间一致的色谱峰，则应采用二极管阵列检测器进行检测，若该色谱峰与对照品的紫外吸收光谱相同，则可判断含有盐酸西布曲明。

2.6 测定结果

照上述色谱条件进行测定，25批样品中的17批阳性样品色谱在与对照品相应位置上均有相同的色谱峰，且STH与与相邻峰分离度＞1.5，所有8批阴性样品色谱中在与对照品相应处无干扰峰，见图1。

2.7 线性关系考察

精密吸取对照品溶液（浓度0.1015μg/μL）2、4、6、8、10、12、14、16μL（采用自动进样器），注入液相色谱仪，记录色谱图。以对照品进样量（µg）为横坐标，以与其相应的峰面积为纵坐标，求得STH的回归方程为：

结果表明，西布曲明进样量在0.203～1.624µg 范围内与峰面积具有良好的线性关系。

2.8 精密度试验

2.8.1 进样重复性

取含量测定项下的对照品溶液连续进样6次，峰面积的RSD为0.34%（n=6）。

2.8.2 重复性试验

取同一批号的样品6份，依法制备供试品溶液，测定，平均含量为35.78（mg/g），RSD%为1.49%（n=6）。

2.8.3 稳定性试验

取同一份供试品溶液（批号为060501），在不同时间0、0.5、24、30、42h分别进样，结果表明在42h内所得的峰面积稳定，峰面积RSD为1.48%（n=6）。

2.8.4 加样回收率试验

精密称取已知含量样品共6份，以当前取样含量的1∶1，分别精密加入对照品溶液（5.084mg/mL）1mL，按样品测定项下制备供回收用的供试品溶液，依法测定，即得。回收测定结果见表1。

2.9 样品含量测定

图1 HPLC色谱图

17批阳性样品依法测定，以外标法计算含量，结果见表2。

3 讨 论

3.1 若对照品溶液与供试品溶液浓度过浓，可导致峰形差，分离效果差，其匹配率下降，常造成结果误差。若二者浓度比例相差过大，则用乙醇稀释，使对照品溶液与供试品溶液二者浓度相当，以减少测定误差。

表1 加样回收率试验

表2 17批阳性样品中西布曲明含量测定结果

3.2 干扰峰的排除

①如果对照品色谱峰保留时间与供试品目标成分色谱峰保留时间有差异，但差异又不大时，可用标准加入法判断可疑峰是否为干扰峰。即将对照品溶液与供试品溶液按1∶1比例混合进样，并与未加入对照品溶液的供试品溶液的液相图谱比较。②如果供试品色谱峰在与对照品保留时间相同处有小峰，经计算折合为每次服用量，如少于起效剂量10mg的1/10（即1.0mg/次），则判断该小峰为干扰峰，结论为未检出盐酸西布曲明。

[1]郑国钢,方宇谨,杜加秋等. RP-HPLC法测定盐酸西布曲明片的含量[J].西北药学杂志,2001,16(5)：195-196.