高效液相色谱法测定复方醋酸曲安奈德溶液中醋酸曲安奈德含量

胡 斌，林 彩，赵映兰，邓 莉，秦 露

(第三军医大学西南医院药剂科，重庆 400038)

复方醋酸曲安奈德溶液有抗炎、抗过敏、去角质层的作用，主要用以治疗神经性皮炎、慢性皮疹、节结性痒疹、皮肤淀粉样变、疥疮结节等。醋酸曲安奈德是主要成分，测定其含量时以甲醇-水-乙醚为流动相[1]，乙醚易挥发，毒性强，且易受环境影响。笔者以乙腈-水[2]为流动相，操作简单，干扰小，测定结果重现性好，精密度高，可有效控制复方醋酸曲安奈德溶液的质量。

1 仪器与试药

810型高效液相色谱仪(美国Waters)，DU-650型分光光度计(美国Backman);KQ-400KDE型超声清洗器(昆山市超声仪器有限公司);YKH-Ⅱ型液体快速混合器(江西医疗器械厂);超纯水器(美国 Milli-QPlus);LN9527-25型离心机(德国 Abbott);BP211D型天平(德国Sartorius)。醋酸曲安奈德对照品(中国药品生物制品检定所，批号为100125-200404);复方醋酸曲安奈德溶液(规格为30 mL/瓶，西南医院药剂科自制，批号分别为080902，081028，081212，090205，090325);乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件与系统适用性试验

色谱柱:DiamonsilTMC18柱(200 mm ×4.6 mm，5 μm);流动相:乙腈-水(60∶40);检测波长:240 nm;流速:1.0 mL/min;柱温:30 ℃;进样量:10 μL;理论板数不低于3 000;保留时间:6.953 min。在此色谱条件下的色谱图见图1。

图1 高效液相色谱图

2.2 溶液制备

按复方醋酸曲安奈德溶液的处方，配制不含醋酸曲安奈德的阴性对照品溶液。精密吸称取醋酸曲安奈德对照品19.60 mg，置100 mL量瓶中，用甲醇稀释、定容，再取稀释液5 mL，置10 mL量瓶中，制成质量浓度为 98 μg/mL的对照品溶液。精密吸取样品溶液5 mL，置50mL量瓶中，用甲醇稀释、定容，摇匀，再稀释10倍制成约10 μg/mL的供试品溶液。

2.3 方法学考察

线性关系考察:分别精密量取制备好的醋酸曲安奈德对照品贮备溶液 0.6，0.8，1.0，1.2，1.4，1.6 mL，分别置7个10 mL的量瓶中，用甲醇稀释、定容，摇匀，配制成质量浓度为 5.88，7.84，9.80，11.76，13.72，15.68 μg/mL 的标准溶液，进样10 μL，依法测定3次，记录峰面积，取平均值。以醋酸曲安奈德的质量浓度(μg/mL)对峰面积进行线性回归，得回归方程 Y=15.996 2+73.399 3 X，r=0.999 9(n=6)。结果表明，醋酸曲安奈德进样量在5.88～15.68 μg范围内与峰面积有良好线性关系，可用外标法计算结果[3]。

精密度试验:取醋酸曲安奈德同一供试品溶液，重复进样6次，依法测定。结果醋酸曲安奈德对照品峰面积的 RSD为0.74%(n=6)，表明仪器精密度良好。

稳定性试验:取同一供试品溶液，在 0，2，4，8，12，16，24 h 和0，24，48，72，96 h进样测定。结果供试品中醋酸曲安奈德对照品峰面积的日内 RSD值为0.97%，日间 RSD值为1.21%，均小于2%，表明供试品溶液在96 h内有良好的稳定性。

重现性试验:取样品(批号为080902)6份，按供试品溶液制备方法制备溶液，依法独立测定。结果醋酸曲安奈德峰面积的 RSD为1.17%(n=6)，表明方法重现性良好。

加样回收试验:精取已知含量的样品9份，每份2.5 mL，置50 mL量瓶中，每3份一组，分别向每组加入98 μg/mL的对照品贮备溶液 0.3，0.5，0.7 mL，用甲醇稀释、定容，摇匀，制成供试液，每个质量浓度的溶液连续进样3次(进样量10 μL)，测定结果见表1。

2.4 样品含量测定

取5批复方醋酸曲安奈德溶液各3份，按供试品溶液制备方法制备待测溶液，测定含量。结果批号为080902，081028，081212，090205，090325的5批样品中醋酸曲安奈德的含量分别为100.20%，97.75%，101.00%，101.80%，97.70%(n=3)。

表1 醋酸曲安奈德加样回收试验(n=9)

3 讨论

精密称取醋酸曲安奈德对照品15.06 mg，用甲醇溶解，并稀释成30.12 μg/mL的溶液。在200～600 nm范围内进行紫外可见光扫描，结果醋酸曲安奈德的最大吸收波长为240 nm，故选择240 nm作为检测波长。

通常测定醋酸曲安奈德的流动相中都含有乙醚[1，4]，乙醚为无色透明液体，极易挥发，易燃烧，其蒸气重于空气，带甜味，有特殊刺激性气味，具麻醉性。其理化性质不稳定，加入流动相中会导致出峰时间改变大、基线不平等问题，笔者针对流动相含乙醚不稳定的缺点，对流动相进行了改进，建立了新的测定醋酸曲安奈德的色谱条件，改进后的流动相(乙腈-水)性质稳定，不易受外界环境的影响，采用该流动相后，结果重现性好，样品处理简单，用外标法计算含量方便、快捷。方法学考察表明，新的色谱系统适用性好，结果可靠，测定方法简便、准确、重现性好，可用于醋酸曲安奈德的含量测定。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)[M].北京:化学工业出版社，2005:844.

[2]刘会荣，安军永，张梅华.高效液相色谱法测定曲安奈德氯霉素溶液的含量[J].中国药业，2008，17(6):30-31.

[3]张 娟，胡旺生.高效液相色谱法测定肤美松霜中醋酸曲安奈德的含量[J].时珍国医国药，2008，19(8):60.

[4]WS1-(X-136)-96Z，中华人民共和国卫生部药品标准(复方醋酸曲安奈德溶液)[S].