气相色谱法测定六神丸中麝香酮含量

吕 霞 ，郭 青 ，钟文英

(1.江苏联合职业技术学院连云港中医药分院，江苏 连云港 222006;2.江苏省食品药品检验所，江苏 南京 210008; 3.中国药科大学，江苏 南京 210009)

六神丸由麝香、蟾酥、人工牛黄等6味中药组方，属国家中药保护品种，具有清凉解毒、消炎止痛等功效，常用于治疗烂喉丹痧、咽喉肿痛、喉风喉痈、小儿热疖、痈疡疔疮、无名肿毒等症。本品质量标准中含量测定仅限于人工牛黄和蟾酥，处方中主药麝香的主要成分麝香酮只有定性鉴别项，无含量测定要求[1-2]。笔者采用气相色谱法测定六神丸中麝香酮含量，报道如下。

1 仪器与试药

GC-2010型气相色谱仪(日本岛津)。麝香酮对照品(中国药品生物制品检定所，批号为0819-200006);试剂(均为分析纯);六神丸6批样品和麝香阴性样品(批号分别为EA10053，FA1003和FA1006的样品由上海雷允上药业有限公司提供;批号分别为050502，050503和050504的样品及麝香阴性样品由苏州雷允上药业有限公司提供)。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱:HP 50+石英毛细管柱(30 m ×0.53 mm，1 μm);柱温:165℃;进样口温度:150℃;检测器温度:190℃;载气:N2;流速:2 mL/min;柱前压:80 kPa;空气:400 mL/min;氢气:40 mL/min;尾吹:50 mL/min;分流比:2 ∶1;进样量:1 μL。

2.2 溶液配制

精密称取麝香酮对照品适量，加乙酸乙酯制成每1 mL约含1 mg的对照品贮备液，再精密吸取适量，加乙酸乙酯稀释成与供试品溶液浓度相当的对照品溶液(0.239 0 g/L);取六神丸适量，研细，取约0.3 g，精密称定，精密加乙酸乙酯10 mL，摇匀，静置30 min，滤过，取续滤液，作为供试品溶液;取阴性样品，按供试品溶液制备法制备阴性对照品溶液。

2.3 方法学考察

系统适用性试验:取对照品、供试品、阴性对照品溶液，分别进样1.0 μL，色谱图见图1。可见，供试品溶液中麝香酮与杂质峰完全分离，阴性对照品溶液无干扰。

线性关系考察:精密吸取麝香酮对照品溶液(1.195 g/L)1 mL，分别置 2，5，10，20，50 mL量瓶中，用乙酸乙酯稀释至刻度，吸取 1 μL，分别注入气相色谱仪，测定。以进样量为横坐标、相应峰面积为纵坐标绘制标准曲线，回归方程为 Y=5 024 566X+55 194，r=0.999 7(n=5)。结果表明，麝香酮质量浓度在23.90～1195.00μg/mL范围内与峰面积线性关系良好。

图1 气相色谱图

精密度试验:精密吸取2.2项下对照品溶液，连续进样6次。结果麝香酮峰面积的 RSD为0.91%(n=6)。

稳定性试验:精密吸取2.2项下供试品溶液 10 μL，分别在 0，2，4，6，8，10，12，24 h 时按拟订的色谱条件进样。结果峰面积的 RSD为2.11%(n=8)，表明供试品溶液在24 h内稳定。

重复性试验:取批号为050402的样品，按2.2项下方法平行制备供试品溶液，进样测定。结果麝香酮的平均含量为4.066 9 mg/g，RSD 为 1.66%(n=6)。

加样回收试验:取已知含量的样品(批号为050402)约0.15 g，精密称定，分别按3个水平精密加入质量浓度为0.597 5 g/L的麝香酮对照品溶液0.80，1.00，1.20 mL，按供试品溶液制备方法平行制备9份溶液，进样测定。结果见表1。

2.4 样品含量测定

取样品，分别按2.2项下方法制备供试品溶液，进样1 μL测定，采用外标法计算含量。结果批号为050502，050503，050504，EA10053，FA1003，FA1006的样品中麝香酮含量分别为0.012 7，0.010 3，0.008 3，0.003 5，0.004 9，0.005 1 mg/粒(n=4)。

表1 麝香酮加样回收试验结果(n=9)

3 讨论

曾比较了苯、石油醚、无水乙醇、乙酸乙酯、甲醇5种溶剂提取麝香酮的效果，发现乙酸乙酯和文献[1-2]中苯的提取效率均较高，结果基本一致。考虑到乙酸乙酯的毒性较小，故选用乙酸乙酯。

色谱条件和提取方法主要参照2005年版《中国药典(一部)》中麝香的含量测定方法[3]，比较了HP50+和HP-5柱，结果HP50+柱的分离效果、峰形、理论板数较合适;还比较了浸渍提取和超声提取两种提取方法，发现结果一致，因此选择了相对快速、简单的浸渍提取方法，浸渍时间为30 min。含量测定结果表明，两个厂家生产的麝香酮含量存在较大差异。

[1]WS3-B-3374-98，中华人民共和国卫生部药品标准·中药成方制剂(第十八册)[S].

[2]吴银生.六神丸质量标准的研究[J].南京中医药大学学报(自然科学版)，2002，18(4):232-233.

[3]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:化学工业出版社，2005:266.