颈痛康胶囊的工艺研究

2010-09-11叶玉华刘灿辉

中国药业 2010年5期

关键词：百分率葛根素葛根

叶玉华，刘灿辉

（湖南省邵阳市药品检验所，湖南邵阳 422001）

颈痛康胶囊的工艺研究

叶玉华，刘灿辉

（湖南省邵阳市药品检验所，湖南邵阳 422001）

目的优选颈痛康胶囊的最佳提取工艺。方法采用正交试验法，以提取液中葛根素含量及干膏量为指标，综合评分以优选药材的提取工艺，并考察成型颗粒的流动性、堆密度、吸湿性及临界相对湿度。结果药材较优的提取工艺为加水煎煮2次，第1次加10倍量水煎3 h，第2次加8倍量水煎2 h；成型颗粒的流动性好，堆密度为0.408 g/cm3，不容易吸湿，临界相对湿度约为56%。结论优选的工艺操作简便，各活性部位提取率高，适用于生产；制得的颗粒间摩擦力小，流动性好，不容易吸湿，可以满足生产、贮存等需求。

颈痛康胶囊；葛根素；高效液相色谱法；正交试验

颈痛康胶囊是邵阳市正骨医院的医院制剂，由葛根、延胡索、骨碎补、红花、片姜黄、甘草等药材组方而成，具有祛风湿、益气血、补肝肾、化瘀滞的功效，主治颈椎病证属气血亏虚、肝肾不足、脉络闭阻者，可缓解颈项疼痛、沉重、活动不利、头痛、头晕、肢端麻木、酸软乏力等症状。笔者根据处方中有效成分的理化性质和药理作用，以葛根素含量和干膏量为指标，采用正交试验法，优选药材的提取工艺条件，并考察了成型颗粒的流动性、堆密度、吸湿性及临界相对湿度，为生产提供依据。

1 仪器与试药

岛津LC-20A型高效液相色谱仪；AB204-N型电子天平、AG 135型电子天平（梅特勒-托利多仪器＜上海＞有限公司）。葛根、延胡索、骨碎补等处方中药材（邵阳市松龄堂中药饮片有限公司）；葛根素对照品（含量测定用，中国药品生物制品检定所提供，批号为110752-200410）。甲醇（SCRC国药集团化学试剂有限公司，批号为20080602）为色谱纯，水为重蒸馏水，其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 总固体测定

取处方中除延胡索、红花、骨碎补外的各味药材，按1/10处方量称取各药材粗片，共9份，按因素水平表加热煎煮，滤过，滤液浓缩成清膏，定容至200 mL。精密吸取上述清膏液25 mL，置已干燥至恒重的蒸发皿中，水浴上蒸干后，于105℃干燥3 h，置干燥器中冷却30 min，迅速精密称定质量。

2.2 葛根素含量测定

2.2.1 色谱条件[1]与系统适用性试验

色谱柱：UltimateTMXB-C18柱(250 mm ×4.6 mm，5!m)；流动相：甲醇 -水（25 ∶75）；检测波长：250 nm；柱温：35 ℃；流速：1.0 mL/min。在此色谱条件下，葛根素峰与其他组分色谱可达基线分离，且与相邻色谱峰分离度大于1.5；理论塔板数按葛根素峰计均在4 000以上。

2.2.2 溶液制备

取葛根素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL含50!g葛根素的溶液，即得对照品溶液。精密吸取上述清膏3 mL，置50 mL量瓶中，加30%乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。取除葛根外的其余处方量药材，按确定的制备工艺制备缺葛根的阴性样品，按供试品溶液制备方法制备缺葛根的阴性样品溶液。

2.2.3 方法学考察

干扰试验：分别精密吸取对照品溶液、阴性样品溶液与供试品溶液各10!L，注入液相色谱仪，测定并记录色谱图。结果色谱行为良好，各色谱峰均达基线分离，供试品溶液色谱中在与对照品溶液色谱峰相应位置上检出色谱峰，而缺葛根的阴性样品溶液无相应色谱峰，表明阴性样品对测定无干扰（图1）。

图1 高效液相色谱图

线性关系考察：分别精密吸取质量浓度为0.092 32 g/L的葛根素对照品溶液2，5，10，15，20!L注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积，以对照品质量浓度为横坐标、峰面积为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程 A=4 777 351.282C+3 830.268，r=0.999 97（n=5）。结果表明葛根素进样量在0.184 64～1.846 4!g范围内与峰面积呈良好的线性关系。

加样回收试验：精密吸取已知含量的供试品溶液1.5 mL，加入葛根素对照品适量，测定峰面积，计算得平均加样回收率为100.7%，RSD 为 1.1%（n=9）。

2.3 煎煮工艺研究

2.3.1 正交试验设计

以加水量（因素A）、煎煮时间（因素B）、煎煮次数（因素C）为考察因素，所得干膏量和葛根素含量为考察指标，按L9(34)表设计正交试验。因素水平见表1。

2.3.2 试验方法与结果

测定所得干膏量和葛根素含量，结果见表2。

2.3.3 方差分析

以D项作为误差项进行方差分析，结果见表3和表4。

2.3.4 结果分析

直观分析表明，对颈痛康胶囊水煎煮的影响因素为C＞A＞B。干膏量方差分析结果表明，因素C（煎煮次数）对颈痛康胶囊的水煎煮有非常显著性影响，因素A（加水量）有显著性影响；葛根素含量方差分析结果表明，因素C（煎煮次数）对颈痛康胶囊的水煎煮有非常显著性影响。综合考虑能源、生产日期等，确定其最佳工艺组合为A3B3(B2)C2，即加药材8倍量的水浸泡1 h，加热煎煮2次，第1次 3 h，第 2 次 2 h。

2.4 煎煮液浓缩条件确定

煎煮液应采用减压浓缩，真空度为-0.07～-0.08 MPa，温度约80℃，并浓缩至干膏。

2.5 制粒条件确定

经试验，上述粉末加80%乙醇制得的软材软硬适中，颗粒均匀。若加70%的乙醇，则所制软材太黏，粘附筛网，颗粒太粗；若加90%的乙醇，则所制软材较松散，难以手握成团，且颗粒粉末太多。

表1 正交试验因素水平表

表2 正交试验结果

表3 干膏量方差分析表

表4 葛根素方差分析表

2.6 颗粒流动性测定[2]

分别取颗粒约50 g，置具1.25 cm小孔的漏斗中，距平板玻璃平面10 cm高度落下，分别测定堆积高度(H)和堆积半径(r)，并按公式tanφ=H/r求出休止角 φ，以 φ表示内容物的流动性，φ愈小，表明流动性愈好。共测3批颗粒，结果批号为070901，070902，070903 的 3 批颗粒休止角分别为 30.28°，30.26°，30.14°，平均30.23°（n=3）。

2.7 颗粒堆密度测定

取颗粒约100 g，通过一个玻璃漏斗缓缓倾倒至一量筒内，测出内容物的松容积（V），并按公式 d=m/V计算出内容物的堆密度 d。共测3批颗粒，结果批号为070901，070902，070903的3批颗粒堆密度分别为 0.410，0.417，0.398 g/cm3，平均 0.408 g/cm3(n=3)。

2.8 颗粒吸湿百分率测定[3]

取底部盛有氯化钠过饱和溶液的玻璃干燥器，放入25℃的恒温培养箱内恒温24 h（相对湿度75%）。在已恒重的称量瓶底部放入厚约2 mm的颗粒，准确称重后置盛有氯化钠过饱和溶液的玻璃干燥器内(称量瓶盖打开)，25 ℃恒温培养箱保存，于 2，4，8，12，24，48 h后分别称量，计算吸湿百分率。吸湿百分率=（吸湿后颗粒质量-吸湿前颗粒质量）/吸湿前颗粒质量×100%。结果保存 2，4，8，12，24，48h后，测得颗粒吸湿百分率分别为3.11%，4.68%，6.86% ，8.45% ，9.87% ，10.57%（图 2）。

2.9 颗粒临界相对湿度（RHC）测定[3]

取颗粒干燥至恒重后，置已恒重的称量瓶中(厚度约2 mm)，准确称量后置于分别盛有表5所列7种不同盐的过饱和溶液的干燥器内(称量瓶盖打开)，于25℃恒温培养箱中保持4 d后称量，计算吸湿百分率。以吸湿百分率数据为纵坐标、相对湿度数据为横坐标作图，得颈痛康颗粒的RHC约为56%。详见表5和图3。