血清高糖基化hCG检测在21-三体综合征产前筛查中的意义探讨

徐晓姹 朱宇宁 吕时铭

（浙江大学医学院附属妇产科医院，浙江省产前诊断中心，浙江 杭州 310006）

21-三体综合征，又称唐氏综合征（Downs Syndrome，DS）或先天愚型，是最常见的染色体病之一。患者的智力低下并可能伴多发畸形，一旦出生即给家庭与社会带来沉重的负担。世界各国一直致力于通过产前筛查来减少21-三体儿的出生，采用的主要筛查方法为孕期母外周血血清标志物检测。目前所用的血清标志物有AFP、F-β-hCG、uE3等，在5%假阳性率下，一般检出率在65%～75%，这意味着即使进行了筛查，仍有30%左右的孕妇漏诊。寻求新指标或方法提高21-三体儿产前筛查的检出率，一直是产前筛查诊断领域的研究热点。

高糖基化 hCG（hyperglycosylated hCG，HhCG）是hCG的一个变体，已有研究发现，妊娠期HhCG的改变可以预示母体或胎儿的一些病理状态［1］，有望作为筛查21-三体综合征的一个候选标志物。本文收集孕中期母外周血标本115例，检测血清HhCG水平，探讨产前筛查中加入HhCG指标分析是否有助于提高产前21-三体的发现率。

1 材料和方法

1.1 标本组成 回顾性收集-70℃低温保存2年内的孕15～20周的母血清产前筛查标本115例：17例确诊为21-三体妊娠（其中2例产前筛查为假阴性，风险率分别为1／860、1／1 000），作为21-三体妊娠组；48例来自随机抽取的21-三体高风险但产前诊断确诊正常的同批产前筛查孕妇血清，作为高风险正常妊娠组；50例来自随机抽取的21-三体低风险但随访确诊正常的同批产前筛查孕妇血清，作为低风险正常妊娠组。所用母血清产前筛查指标是AFP和Free-β-hCG的二联检测，通过专用软件并结合孕妇年龄、孕周、体重等计算21-三体征的风险率，以1／270为21-三体高风险的切割值，＞1／270为21-三体高风险妊娠。高风险妊娠通过羊水细胞核型检查确诊，低风险妊娠随访追踪至产后。

1.2 HhCG的检测 使用美国Nichols Diagnostics公司生产的Nichols全自动化学免疫发光分析仪检测。原理为双位点夹心法：B152抗体为检测抗体，特异结合HhCG；B207抗体为标记抗体，对hCGβ亚基特异，结合在HhCG的另一个相应位点，然后通过光谱仪检测标记物的信号，根据定标浓度转化为HhCG的浓度。AFP、F-β-hCG的测定使用Wallac时间分辨荧光免疫系统，试剂盒均为美国PE产品。

1.3 分析方法 采用国外文献［2］中的计算公式：median Hh CG=26.8483*e［-0.112138*（days-98）］+8.97，计算不同孕周正常妊娠的HhCG中位数，以确定本实验人群的Hh CG Mo M值。该计算公式用于亚洲人群需要校正种族差异，校正值为1.32。由于本实验例数有限，HhCG筛查21-三体高风险的切割值以Pandian R等［3］在2004年对21-三体孕妇血清Hh CG水平的研究结果作为参考，即在5%假阳性率前提下，设定HhCG Mo M值大于2.9（正常妊娠的95百分位点）为21-三体高风险，据此作为单独HhCG产前筛查指标的风险判断标准。

2 结果

2.1 hCG的Mo M值 115例实验对象的HhCG Mo M值分布见图1。其中21-三体孕妇的HhCG水平明显升高，82%（14／17）21-三体孕妇的 HhCG Mo M值大于7.14Mo M（本实验98例正常妊娠的95百分位点）；100%（17／17）大于2.9Mo M。

图1 115例实验对象HhCG（Mo M）的分布

21-三体妊娠、高风险正常妊娠和低风险正常妊娠3组数据对数转化呈正态分布（表1），通过成组设计几何均数的t-检验比较，发现21-三体妊娠孕妇的HhCG水平高于高风险正常妊娠（P＜0.02）和低风险正常妊娠（P＜0.001）。

2.2 21-三体儿检出率比较 比较HhCG单项检查与AFP、F-β-hCG筛查21-三体的可靠性（表2），两项筛查效果有显著差异（P＜0.01）。其中，AFP+F-β-hCG二联筛查21-三体漏诊的2例标本的HhCG Mo M值分别是7.5和10.11，均为高风险。

表1 21-三体妊娠与高风险正常妊娠、低风险正常妊娠的HhCG Mo M值水平

表2 HhCG单筛查指标与AFP+F-β-hCG二联筛查指标的筛查效果比较

3 讨论

HhCG是h CG在血、尿中存在的其中一种形式，主要由细胞滋养层细胞分泌产生。HhCG最初是在滋养细胞疾病的诊断和监测中得到关注［4］，随着对胎盘发育的认识发展，研究发现HhCG在21-三体筛查、早期流产风险预测等方面也有一定价值［5，6］。Cole LA 等［7，8］两次比较了21-三体妊娠孕妇与正常妊娠早、中期尿HhCG的水平，提出21-三体妊娠者尿HhCG水平明显升高，Mo M值中位数达7.8和9.5，是正常妊娠的7～9倍，在5%的假阳性率下，检出率可达78%～80%。之后，许多学者［9-12］相继对21-三体妊娠者的孕早、中期的血、尿HhCG水平做进一步的研究，尽管Mo M值、中位数各有不同，在5%假阳性率下的检出率也各有差异，但都证实了21-三体妊娠者孕早、中期的血、尿HhCG水平高于同期正常妊娠。2007年，Palomaki1、GE等在一项大样本（21 641例）早、中孕期产前筛查研究中加入了血清HhCG指标，认为HhCG可以以一定的方式，如目前在用的游离βHCG替代用于产前筛查［13］。鉴于目前国内尚无HhCG在产前筛查中的研究报道，本研究选择了115例已知妊娠结局的孕妇血清作HhCG测定，初步探讨HhCG在中国人群21-三体产前筛查中的价值。

本研究中的17例21-三体妊娠者的血清HhCG Mo M值的中位数为10.11，均高于Pandian R等报道的正常妊娠95百分位点2.9Mo M，提示均为血清HhCG单指标高风险。该组标本的血清HhCG Mo M显著高于根据AFP+F-β-hCG二联筛查划分的高风险正常妊娠组和低风险正常妊娠组，提示血清HhCG指标可能具有一定的独立性。在21-三体妊娠组中有2例是AFP+F-β-h CG二联产前筛查假阴性者（21-三体的风险率分别是1／860与1／1 000），而他们的 HhCG Mo M 值分别为7.5和10.11，表现为血清HhCG单指标高风险，说明增加HhCG测定可能是减少21-三体产前筛查假阴性的方法之一。

本组病例实验所得的21-三体高风险者的HhCG Mo M切割值为7.14，显著高于Pandian R等研究所得的2.9Mo M，为后者的3倍，提示血清HhCG值水平可能具有人群差异。但由于本组病例数有限，尚不能代表国内21-三体妊娠者的HhCG Mo M值水平，因此仍以国外文献报道的2.9Mo M值作为风险评价界限。根据该风险评价标准，虽然21-三体的检出率达到了100%（AFP+F-βhCG检出率为88%），但假阴性率也高至50%（AFP+F-β-hCG为40%），该结果与风险阈值设定以及单一使用HhCG筛查均可能有关，这需进一步研究讨论。

本研究只初步显示血清HhCG有用于产前筛查的潜在价值，能否作为一个新的筛查指标或筛查方法还需要进行大样本多中心的前瞻性研究。HhCG和目前二联筛查中在用的F-β-hCG属于hCG的不同分子形式，前者主要由未成熟的细胞滋养层细胞分泌，而后者主要由成熟的合体滋养层细胞分泌产生，它们之间的相关性也需要在大样本基础上进一步探究。因此，期待样本量的扩大，建立更适合中国人群风险判断的Hh CG Mo M值，同时探讨将Hh CG指标以合适的形式纳入到21-三体风险计算体系，以提高21-三体产前筛查的准确率。

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