降糖复方改善胰岛素抵抗的实验研究*

胡旭珍 宁夏医科大学附属银川市中医医院 (银川 750001)

由西洋参、黄芪、生地、天花粉、玄参、丹参、葛根、山药、麦冬、白僵蚕、水蛭等组成的中药降糖复方(糖维康 ,TWK),是作者 10余年来在临床实践中根据益气养阴、活血化瘀原则形成的经验方。为评价降糖复方对 2型糖尿病血糖、血脂、体质量等的影响,本文通过动物实验和临床研究的方法,观察降糖复方对 IR抵抗大鼠及 2型糖尿病患者与 IR有关的血生化指标变化,初步探讨其作用及机制,为临床 2型糖尿病及 IR的治疗提供实验依据。

1 实验动物和临床资料

1.1 SD大鼠 雄性 60只,体重 (201± 22 g),购自西安交通大学医学院实验动物中心(医动字第 08-005号 )。

1.2 病例选择 根据 W HO1999年糖尿病诊断标准,选择病程在 5年以内的 2型糖尿病患者共 186例 ,男性 98例,女性 88例 ,平均年龄 (44±5.71)岁 ,平均病程(3.12±1.78)年。

2 实验材料

2.1 药品与试剂 降糖复方(TWK)由本院制剂室提供。盐酸二甲双胍 (Metformin,Met)批号2004100106,吉林省东北亚药业股份有限公司生产。胰岛素放射免疫分析试剂盒购自北京科美东雅生物技术有限公司,批号050725。 TC、TG、LDL-C、HDL-C检测试剂盒购自浙江东瓯生物工程有限公司,批号 2005060005。

2.2 实验仪器 OneTouch血糖仪及试纸条,美国Lifescan生产。 752N紫外可见分光光度计 ,上海精密科学仪器有限公司制造。GC-1200r放射免疫计数器,科大创新股份有限公司中佳分公司。低温超速离心机,日本东京 Hongo.BUNKYO-KU制造。

3 方 法

3.1 动物饲料 基础饲料(每 100g含):标粉 25g,玉米粉 30g,麸皮 20g,豆粉、鱼粉各 10g,酵母粉 2g,食盐、鱼肝油各 1g,维生素添加剂、微量元素添加剂各 0.5g。高脂高糖饲料(每 100g含):基础饲料 67g,胆固醇 2.5g,胆酸钠 0.5g,白糖 20g,猪油 10g。

3.2 动物分组及处理 将大鼠随机分为 6组,每组 10只。对照组,饲喂基础饲料 ,同时给予蒸馏水;模型组,饲喂高脂高糖饲料,同时给予蒸馏水;Met组 ,饲喂高脂高糖饲料,同时给予 Met156mg/kg;降糖复方组,饲喂高脂高糖饲料,同时给予降糖复方 1.5g生药/mL(TW K-L)和 0.75g生药/mL(TWK-S)。各组均灌胃给药,容量为 1mL/100g。饲养温度 22±2℃,分笼饲养,每笼 3～4只,自由饮水,昼夜交替 12h。 实验期间,大鼠每周称重 1次,喂养 10周后 ,大鼠经戊巴比妥钠麻醉从心脏取血,制备血清测定各项指标,计算胰岛素敏感指数ISI[1](Ln[1/(空腹血糖×空腹胰岛素)])。

3.3 2型糖尿病患者在控制饮食和适当运动的基础上给予降糖复方(每粒胶囊 0.5g),每次 3～6粒 ,每天 3次,于餐前半小时口服,疗程半年。分别观察并比较治疗前后血糖、血清胰岛素、C-肽及血脂等变化。

3.4 血脂、血糖及胰岛素的测定 TC、LDL-C、HDL-C、TG均按照试剂盒说明书进行测定;血糖采用葡萄糖氧化酶法测定;血清胰岛素及 C肽采用放射免疫分析方法测定。

3.5 统计学处理 实验结果以均数±标准差表示,组间对照用 SPSS统计软件进行方差分析。

4 结 果

4.1 大鼠体重(g)的动态变化 高脂高糖饲料饲养 2～10周期间,模型组和各给药组大鼠的体重均明显低于空白对照组(P＜0.05,P＜0.01),各给药组间未见显著差别 ,图 1。

4.2 降糖复方对 IR大鼠血糖、血清胰岛素、C肽及 ISI的影响 与正常对照组比较,模型组血糖及各组血清胰岛素水平均显著升高 (P＜0.01),模型组、Met组 ISI明显降低(P＜0.05,P＜0.01)。与模型组比较,降糖复方组血糖及血清胰岛素水平均显著下降,ISI提高(P＜0.05,P＜0.01),表 1。

4.3 降糖复方对 IR大鼠血脂水平的影响 Met和降糖复方 1.5g生药 /mL组均可降低 IR大鼠血清 TC、LDL-C、TG水平 ,升高 HDL-C水平。降糖复方 0.75g生药 /mL组能降低LDL-C水平,升高 HDL-C水平。与 M et比较,降糖复方 1.5g生药 /mL组的作用更明显,图 2。

4.4 降糖复方对 2型糖尿病患者血糖、血清胰岛素及 C肽的影响 与治疗前比较,治疗 6个月后空腹和餐后 1、2、3h血糖均明显降低(P＜0.05,P＜0.01),胰岛素高峰前移至餐后1h,空腹及餐后 2、3h的高胰岛素现象得到明显改善(P＜0.01),C-肽也呈类似变化 ,图 3～5。

4.5 降糖复方对 2型糖尿病患者血脂的影响 降糖复方能明显降低 2型糖尿病合并高脂血症患者的 TC、TG和 LDL-,C同时升高 HDL-C(P＜0.05,P＜0.01),图 6。

表1 降糖复方对 IR大鼠血糖、血清胰岛素、C肽及 ISI的影响()

表1 降糖复方对 IR大鼠血糖、血清胰岛素、C肽及 ISI的影响()

与正常对照组比较✧P＜0.05,◆P＜0.01;与模型组比较△P＜0.05,▲ P＜0.01;与 Met组比较□P＜0.05

组 别 血糖(mmol/L) 胰岛素(mIu/L) ISI C-P(pmol/mL)空白对照组 4.04± 0.82 28.57± 6.89 -4.904± 0.42 0.039± 0.023模型组 4.97±0.92◆ 54.37± 8.67◆ -5.548± 0.31◆ 0.036±0.016二甲双胍组 4.52± 0.56 41.24±9.84◆△ -5.194±0.30✧▲ 0.050±0.023中药复方组(1.5g生药 /mL) 4.08±0.38▲ 43.12±7.41◆▲ -5.153±0.218▲ 0.049±0.020中药复方组(0.75g生药 /mL) 4.29±0.65△ 43.71±6.28▲◆ -4.893±0.19▲□ 0.051±0.020△

5 讨 论 本研究所用降糖复方以益气养阴、活血化瘀立方[2]。明代戴元礼在《论治要诀-消渴》中指出“三消得之气之实,血之虚,久久不治,气尽虚”,将益气放在治疗三消渴的首位,说明糖尿病的基本病机以气虚为本[3]。活血化瘀方药是防治糖尿病的重要方法。淤血同糖尿病的关系中医学早就有认识,《内经》和《金匮要略》均有明确论述,如“血气逆留,髓皮充肌,血脉不行 ,转而为热,热则消肌肤,故为消瘅。”指出了消渴与淤血之间的病理关系[4]。

IR是指胰岛素在促进葡萄糖的摄取和利用方面受损,即一定量的胰岛素产生生物学效应低于预计正常水平。此时机体为了尽可能将血糖维持在正常水平,代偿性分泌过多胰岛素,导致高胰岛素血症。本研究采用高脂高糖饲料喂养大鼠复制 IR动物模型,经计算 ISI,证实模型复制成功[5]。实验结果显示,降糖复方 1.5g生药 /m L、0.75g生药 /m L均能增加 IR大鼠的ISI,降低其 TC、LDL-C、TG水平,升高 HDL-C水平。有研究发现肥胖与 IR密切相关,通过减肥可以减轻 IR,改善胰岛素的敏感性。但在本实验中,IR大鼠的体重并不明显增加,各给药组的体重亦无显著差别,提示在体重正常的情况下亦可出现 IR,这与 IR在发病过程中的临床表现一致[6]。IR时,出现脂质代谢紊乱,脂蛋白脂酶活性下降,TG分解减慢,富含 TG的极低密度脂蛋白的乳靡微粒分解代谢受阻,导致在 IR时血中 TG、LDLC、TC含量升高,HDL-C含量下降[7]。降糖复方能显著降低 IR大鼠和 2型糖尿病患者血脂水平的结果提示可能是其增加胰岛素敏感性,改善 IR状态的机制之一。

本研究所观察的临床病例,治疗前空腹血糖及餐后血糖均较高,高峰值后移至餐后 2h,餐后 3h未能降至基础值,经过降糖复方 6个月的治疗,各时相血糖值均降低,提示降糖复方对 2型糖尿病患者糖代谢紊乱有良好的改善作用。治疗前各时相胰岛素和 C-肽均较高,高峰值在餐后 2h,对糖负荷刺激反应迟钝,具有高胰岛素血症特点[8]。治疗后胰岛素和 C-肽值在空腹和餐后 2、3h均降低且高峰前移,提示降糖复方能改善高胰岛素血症及胰岛素抵抗,胰岛 B细胞负荷降低,对糖负荷刺激的反应性增强。

以上结果提示,降糖复方可通过多个环节,如降低血糖、血脂、减轻胰岛素抵抗及增加胰岛素敏感性等治疗 2型糖尿病。Met是临床常用的降糖药之一,可促进脂肪组织对葡萄糖的摄取,抑制胰高血糖素的释放,改善患者的高胰岛素状态,降糖复方的作用机制是否与其相似或有关,尚有待进一步的研究。

[1]李光伟,潘孝仁.检测人群胰岛素敏感性的一项新指数 [J].中华内科杂志,1993,10(32):656-660.

[2]陈家伦.浅谈治疗糖尿病中药的研究与开发 [J].国外医学内分泌学分册,2004,24(3):150.

[3]周 艺.对治疗 2型糖尿病 73首有效方药应用规律的探讨[J].福建中医药,2007,38(2):52-53.

[4]吴 童.唐宋时期消渴病证治方药统计分析 [J].中华中医药杂志,2008,23(10):918-920.

[5]李 慧,张 岩.喂养型胰岛素抵抗动物模型的建立与评价 [J].中国误诊学杂志,2003,3(10),1531-1532.

[6]Francesco,Roberto,Mafalda.Obesity and body fat distribution induce endothelial dysfunction by oxidative stress.Diabetes,2001,50:159-165.

[7]Marja-Riitta,Taskinen. Diabetic dyslipidemia.Atherosclerosis supplements.2002,3:47-51.

[8]林 兰.中西医结合糖尿病学[M].北京:中国医药科技出版社,1999:115.