乳腺癌组织中nm23、PS2蛋白的表达及临床意义

张恒

近年来乳腺癌的发病有年轻化的趋势。尽早的筛选出高、低危组人群进行有针对性的治疗对于改善预后尤为重要。nm23是一种肿瘤转移抑制基因，其蛋白表达水平与肿瘤的浸润转移能力有关，高表达者具有低转移性［1］。PS2蛋白是雌激素诱导蛋白的一种，其表达能确切地反映乳腺癌对激素的依赖［2］。2008年5至6月，我们采用免疫组化SP法检查了60例乳腺癌患者肿瘤组织和50例乳腺良性疾病患者乳腺组织中的um23、PS2蛋白。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 2002年5月至2003年5月我院收治的60例乳腺癌患者，年龄29～73岁，平均52.3岁;病理分级按Carfl'-Bloom-Richardson系统进行分级，I级7例，Ⅱ级26例，Ⅲ级27例;临床分期采用2001国际TNM分期标准：I期ll例，Ⅱ期40例，Ⅲ期9例;同侧腋窝淋巴结转移20例，无淋巴结转移43例;雌激素受体(ER)阳性44例，ER阴性19例，术前均未进行新辅助化疗。所有乳腺癌病例均行改良或保乳根治术，手术切除标本经甲醛固定、取材、常规脱水及包埋，为观察组。另取50例乳腺良性疾病患者的手术切除标本为对照组。

1.2 nm23、PS2蛋白检测方法所有标本均经过10%甲醛固定，石蜡包埋，石蜡切片机3pm连续切片。采用免疫组化SP两步法检测nm23蛋白和PS2蛋白的表达情况。所采用鼠抗人nm-23单克隆抗体、鼠抗人PS2蛋白单克隆抗体和免疫组化SP染色试剂盒为美国Maxim公司生产。用PBS缓冲液代替一抗作为阴性对照，以已知阳性的切片作为阳性对照。nm23蛋白以细胞质内出现棕黄色颗粒为阳性染色。基本不着色者为0分，着色淡者为1分，着色适中者为2分，着色深者为3分。着色细胞占计数细胞百分率≤5%为0分，6%～25%为1分，26% ～50%为2分，≥51%为3分。将每张切片着色程度得分与着色细胞百分率得分相乘，即为阳性系数。阳性系数为0～1分为(-)，2～3分为(+)，4～6分为(++)，7～9分为(+++)。PS2蛋白的阳性表达定位于细胞质。染色强度分为3级：1级浅棕色;3级深褐色;2级介于级和3级之间。阳性细胞占总肿瘤细胞的比例≤10%为(-)，11% ～25%为(+)，26%-50%为(4++)，≥51%为(+++)。(+)及以上者为PS2蛋白阳性表达。

1.3 统计学方法 采用SPSS 13.0统计软件 组间比较采用t检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

观察组nm23蛋白、PS2蛋白阳性率分别为80.00%(48/60)和70.00%(42/60)，对照组分别为98.16%(49/50)和96.00%(48/50)，两组相比，P均 ＜0.05。乳腺癌组织中nm23、PS2蛋白表达与肿瘤临床病理指标的关系见表1。观察组nm23蛋白、PS2蛋白均阳性者37例(A组)，nm23蛋白阳性PS2蛋白阴性11例(B组)，nm23蛋白阴性PS2蛋白阳性5例(C组)，nm23白、PS2蛋白均阴性10例(D组)，两者的表达存在正相关关系，χ2=9.84，r=0.955，P ＜0.01。A、B、C、D组分别有34、9、4、6例患者术后5年无瘤生存，两两比较除A、D组患者5年生存率比较P＜0.05外，其余各组两两比较，P 均 ＞0.05。

3 讨论

肿瘤的发生在很大程度上归咎于癌基因和抑癌基因的异常及由此引起的蛋白产物的质和量的变化，这些变化最终引起细胞的生长、增殖、分化、成熟、衰老和死亡的异常，从而导致肿瘤的发生。

3.1 nm23蛋白表达与肿瘤临床病理参数的关系nm23基因是Steeg等［3］在1988年采用消减杂交法从7个转移潜力不同的K-1735鼠黑色素瘤细胞株中分离鉴定出来的，其在低转移细胞株中的表达强度是高转移细胞株内10倍;有淋巴结转移者的癌细胞nm 23蛋白、PS2蛋白表达与乳腺癌临床病理参数的关系注：同一临床病理参致内比较。P＜0.05胞均有低水平的nm23 RNA表达，远处转移者的癌细胞有较高水平的nm23 RNA表达。Belev等［4］的研究也显示，nm23蛋白阳性表达与淋巴结转移呈负相关，与预后呈正相关，nm23蛋白阳性者淋巴结转移少，5年生存率高。本研究结果显示nm23蛋白在乳腺良性疾病中的表达要高于在乳腺癌组织中的表达。在乳腺癌组织中nm23蛋白的表达与年龄无关;与组织学分级、临床分期、淋巴结转移呈负相关。组织学分级越低、临床分期越早、无淋巴结转移者nm23蛋白阳性率越高，反之nm23蛋白阳性率越低，癌细胞转移浸润能力强，发生转移的危险性高，预后差，与文献报道研究结果一致［5］;与ER状态呈正相关，ER阳性乳腺癌nm23蛋白表达阳性率高于ER阴性者。因此，nm23蛋白低表达或无表达可能与乳腺癌发生转移有关，可作为乳腺癌转移潜能的判断指标，通过对nm23蛋白表达程度的检测，有助于判断肿瘤转移情况和评估预后［6］。

3.2 PS2蛋白表达与肿瘤临床病理参数的关系在乳腺癌细胞内，PS2蛋白只雌激素控制下才能被转录，从而认为PS2蛋白一种乳腺癌雌激素诱发蛋白。PS2蛋白的表达依靠肿瘤中的ER的存在。该蛋白表达与细胞分化有关。国内杨新华等［9］研究发现PS2蛋白的表达与患者年龄、病理类型和腋窝淋巴结转有关，与肿瘤大小移无关。本研究实验结果也提示PS2蛋白在不同年龄阶段患者中的表达存在差异性，其在中青年组的表达水平明显高于老年组，这也说明了雌激素刺激对PS2蛋白表达的调控作用［10］。本研究结果提示不同病理类型的乳腺癌组织PS2蛋白的表达差异无统计学意义，这可能与实验方法、阳性判定标准及病例数量有关。本研究结果还提示PS2蛋白的表达与组织学分级呈负相关，与ER表达呈正相关，与文献报道一致。

3.3 nm23蛋白和PS2蛋白表达与患者预后的关系国内外的很多文献报道nm23蛋白的表达水平与患者的预后有关，高表达患者5年生存率高，阴性或低表达者预后较差。本研究结果显示两者均阳性患者5年无瘤生存率要高于均阴性患者，这也又一次印证了nm23蛋白与PS2蛋白检测在指导乳腺癌患者治疗与判定患者预后方面的价值。

综上所述，nm23蛋白和PS2蛋白表达之间可能存在着相互协同的关系。nm23蛋白阴性和PS2蛋白阴性的乳腺癌患者细胞恶性化程度高，更容易发生淋巴结转移，而两者均阳性的患者则其分化程度更高，恶性程度更低，不易发生腋窝淋巴结转移，且更容易通过内分泌治疗获益。两者联合检测可以作为独立指标来估计乳腺癌的生物学行为，在区分乳腺癌高、低危患者及预测乳腺癌患者预后方面更有经验交流意义。

［1］Maure CA，Graber HU，Friess H.Reduced expression of the metastasis suppressor gene KAI 1 in advanced colon cancer and its metastasis，1999(05).

［2］Elston CW.Ellis IO The value of histological grade in breast cancer：experience from a large study with long-term follow-up，2002(03).

［3］Steeg PS.Bevilacqua G.Kopper L Evidence for a novel gene associated with a low tumor metastatic potential，1988(03).

［4］Belev B.Alerie I.Vrbanec D nm23 gene product expression in invasive breast cancer immunohistochemical analysis and clinicopathological correlation，2002(04).

［5］Kapitanovic S.Cacev T.Berkovic M nm23-H1 expression and loss of heterozygosity in colon adenocarcinoma，2004(12).

［6］Gong SJ.Rha SY.JEUNG HC.Bilateral breast cancer：differential diagnosis using histological and biological parameters，2007(7).

［7］Kroger N.Milde langosch K.Prognostic and predictive effects of immunohistochemical factors in high-risk primary breast cancer patients，2006(1).

［8］Al Ahwal MS.HER-2 positivity and correlations with other histopathologic features in breast cancer patients-hospital based study，2006(2).

［9］杨新华，姜军，卞修武.乳腺癌PS2蛋白表达的临床意义.第三军医大学学报，2003(23).

［10］薄爱华，芦广萍，闫爱春，雷杰.EGFR和VEGF在乳腺癌中表达的临床意义.中国肿瘤临床，2007(23).