高效液相色谱法测定泮托拉唑在健康人血中的浓度

蔡颖 羊强 符策浩

（海南医学院附属医院国家药物临床试验机构 海南海口 571101）

本品为泮托拉唑为一种人工合成的质子泵抑制剂，主要用于治疗胃、十二指肠溃疡，也可以治疗胃泌素瘤导致的溃疡。本文采用的HPLC外标法测定泮托拉唑血浆药物浓度，方法简便，重现性好，可用于泮托拉唑人体药代动力学研究。

1 仪器与试剂

Waters1525液相色谱仪、Waters2487检测器(美国)；TL-16R台式高速冷冻离心机(上海市离心机械研究所),XW-80A旋涡混合器(上海医科大学仪器厂),岛津AX200型电子天平(日本)，SZ-Ⅲ型自动三重纯水蒸馏器（上海嘉鹏科技有限公司），PHS 3C精密pH计（上海精密科学仪器有限公司）等。

泮托拉唑钠对照品由国家药品生物制品检定所提供(100575-200301含量:95.1%)。乙腈(美国Fisher公司生产,色谱纯),磷酸二氢钠、磷酸氢二钠(均为广州化学试剂厂,AR)，磷酸（广州化学试剂厂），纯化水（自制）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

流动相：乙腈：磷酸盐缓冲液（磷酸氢二钠1.25g，磷酸二氢钠0.3g，加纯化水至1000mL，用磷酸调pH值至5.6）(33:67)，色谱柱：依利特Spherisorb C8,5um ，4.6mm×150mm，柱温为30℃，紫外检测波长288nm，流速为1.2mL/min。

2.2 血浆样品处理

取肝素化血浆0.2mL，加入乙腈0.3mL,涡旋1min，10000rpm/min，温度25℃，离心5min,吸取上清液50uL定量环进样，用峰面积进行定量分析。在上述色谱条件下，泮托拉唑的出峰时间约为4.6min，与血浆中内源性物质分离良好。

2.3 血浆标准曲线制作

用空白血浆配制相当于泮托拉唑浓度分别为0.05、0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0ug/mL的样品，按“血浆样品处理”项下操作，记录对照品峰面积，以泮托拉唑峰面积对样品浓度(ug/ml)作直线回归，线性方程：Y=27705X-882.85，线性范围为0.05～5.0ug/mL,相关系数R2＝0.9996。

2.4 方法精密度和回收率

配制含泮托拉唑0.1、1.0、5.0ug/mL血浆标准品数份，分别于1d内每个浓度平行5份按血浆样品处理方法处理并测定，评价本法测定血浆中泮托拉唑含量的回收率及日内精密度。连续3d配制并测定上述浓度样品，考察方法日间精密度。3个浓度的萃取回收率在66.3%～73.6%之间，方法的回收率均在96.40%～111.6%之内，日内RSD<3%、日间中、高浓度RSD均<11%，低浓度<20%。符合生物等效性研究的方法学要求。

2.5 稳定性考察

按照标准曲线制备方法，制备低、中、高浓度样品数份，分别置室温、冻存、冻融条件下存放不同时间后，按“2.2”项下方法处理并测定，考察样品放置稳定性，并考察了处理完的溶液的室温稳定性，结果表明泮托拉唑血浆样品在室温条件下至少能稳定12h；冻存条件（-20℃）下至少能稳定30d；在冻融4周期内含量没有下降。

3 讨论

本品为泮托拉唑为一种人工合成的质子泵抑制剂，主要用于治疗胃、十二指肠溃疡，也可以治疗胃泌素瘤导致的溃疡。口服后吸收迅速、完全，单次口服40mg后,2～3h左右即可达到血药浓度峰值，其口服制剂的绝对生物利用度为77%。80%的代谢产物通过肾脏排出，其余经胆汁进入粪便排出。泮托拉唑血药浓度检测方法国内外均有文献报道，大多采用HPLC内标法[1～3]，本文用HPLC外标法测定人血浆中泮托拉唑浓度，结果表明它与内源性杂质分离良好，样处理简便，完全可以满足临床药代动力学以及药物代谢的要求。

[1]师少军,李忠芳,陈华庭,等.泮托拉唑钠肠溶片在中国男性健康志愿者体内的药动学和相对生物利用度研究[J].中国临床药理学与治疗学,2005,10(11):1236～1239.

[2]李佐军,雷建平,吴翠芳,等.泮托拉唑钠肠溶胶囊在健康人体中的生物等效性研究[J].中国药师,2006,9(9):797～799.

[3]王永庆,吴春勇,张静,等.泮托拉唑肠溶胶囊人体生物利用度及生物等效性研究[J].中国药业，2009,18(3):3～4.