气相色谱法测定砂仁中乙酸龙脑酯的含量

隆 颖，栗建明

（1.广东省药品检验所，广东广州 510180；2.广州市药品检验所，广东广州 510160)

砂仁为姜科植物阳春砂Amomum villosum Lour.、绿壳砂Amomum villosum Lour.var.xanthioides T.L.Wu et Senjen或海南砂Amomum longiligulare T.L.Wu的干燥成熟果实，具有化湿开胃，温脾止泻，理气安胎的的功效，用于湿浊中阻，脘痞不饥，脾胃虚寒，呕吐泄泻，妊娠恶阻，胎动不安。挥发油成分是砂仁重要的药效物质基础，其中乙酸龙脑酯为砂仁挥发油中主要成分[1]，具有镇静、镇痛、抗感染、止泻等药理作用[2]。笔者采用气相色谱法建立了乙酸龙脑酯的含量测定方法，并对不同产地的砂仁中乙酸龙脑酯的含量进行测定。

1 仪器与试药

SHIMADZU GC-2010气相色谱仪；电子天平（Sartorius CP225D）；KQ-300DA型数控超声波清洗器；乙酸龙脑酯对照品（中国药品生物制品检定所，供含量测定用，批号：110759-200303）；试剂均为分析纯；砂仁样品26批产自广东、海南、广西等地。

2 方法与结果

2.1 色谱条件[2]

Agilent DB-1（30 m×0.25 mm，0.25 μm）石英毛细管柱；载气为高纯度氮气；流速：1.3 ml/min；温度：100℃，气化室温度：230℃；火焰离子化检测器（FID）；检测器温度：250℃。 GC图谱见图1。

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照品溶液的制备 取乙酸龙脑酯对照品适量，精密称定，加无水乙醇制成每毫升含0.3 mg的溶液，摇匀，即得。

2.2.2 供试品溶液的制备 取砂仁粉末（过三号筛）约1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入无水乙醇25 ml，密塞，称定重量，超声处理（功率300 W，频率 40 kHz）30 min，放冷，无水乙醇补足减失的重量，摇匀，过滤，制成供试品溶液。

2.3 线性关系考察

精密吸取乙酸龙脑酯对照品溶液（6.0185 mg/ml），配制成系列对照品溶液。分别精密吸取1 μl，注入气相色谱仪，按含量测定方法测定，以对照品浓度（X）为横坐标，测得的峰面积（Y）为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程：Y=1000000X-9636（r=0.9999）。结果表明，乙酸龙脑酯进样浓度在0.0301～1.2037 mg/ml范围内与其峰面积呈良好的线性关系。

2.4 精密度试验

精密吸取乙酸龙脑酯对照品溶液1 μl，连续进样6次，按照上述色谱方法测定，计算对照品峰面积的平均值为219831.2，RSD=0.4%，结果表明该法精密度良好。

2.5 重现性试验

同一批样品适量，按照“2.2.2”项下方法制备样品溶液，精密吸取1 μl，进样，按照上述色谱方法测定6次，计算平均含量为10.02 mg/g，RSD=2.0%，结果表明该法重现性良好。

2.6 稳定性试验

取“2.2.2”项下供试品溶液，分别在放置 0、2、4、6、8、12、24 h后进样，按照上述色谱方法测定，结果24 h内7次测定平均峰面积为526948.3734，RSD=1.5%。结果表明样品在24 h内基本稳定。

2.7 加样回收率试验

取同一批已知含量（10.0194 mg/g）的样品6份，各加入一定量的乙酸龙脑酯，按含量测定方法确定，计算乙酸龙脑酯回收率。结果平均回收率为101.30%，RSD=2.20%，见表1。

表1 回收率试验结果（n=6）Tab.1 Results of recovery test(n=6)

2.8 样品含量测定

取26批样品，按照“2.2.2”项下方法制备样品溶液，分别精密吸取1 μl，注入气相色谱仪，按上述方法进行测定，结果见表2。

表2 样品含量测定结果（%，n=3）Tab.2 Content determination results of samples(%，n=3)

3 讨论

砂仁药材收载于《中国药典》2005年版一部，以其主要成分挥发油含量测定作为质量鉴定的重要指标[3]，但挥发油为混合物，组成和性质均不稳定，作为定量标准不完善。砂仁的主要功效成分为挥发油，而乙酸龙脑酯为砂仁的挥发油中的主要成分。传统认为砂仁的主要有效成分是挥发油，许多实验也证实了砂仁挥发油显著的药理活性[4-5]。乙酸龙脑酯是砂仁挥发油中的主要成分，含量可高达80%以上[6-8]，又具有与砂仁功效主治相关的药理作用，这对于砂仁质量研究具有重要意义。

在预试验中，笔者曾考察了挥发油提取法、超声提取法、回流提取法以及浸泡过夜提取法等几种提取方法，结果以超声提取法效果最佳。本方法操作简便，测定准确，同时可以消除杂质成分的干扰。

[1]余竞光,孙兰,周立东,等.中药砂仁化学成分研究[J].中国中药杂志,1997,22(4):231.

[2]李晓光,叶富强,徐鸿华.砂仁挥发油中乙酸龙脑酯的药理作用研究[J].华西药学杂志,2001,16(5):356-358.

[3]国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].二部.北京:化学工业出版社,2005:177.

[4]邱赛红,首第武,陈立峰,等.芳香化湿药挥发油部分与水溶液部分药理作用的比较[J].中国中药杂志,1999,24(5):297-299.

[5]王红武,张明发,沈雅琴,等.砂仁对消化系统药理作用的实验研究[J].中国中医药科技,1997,4(5):284.

[6]徐国钧.常用中药材品种整理和质量研究[M].福州:福建科学技术出版社,1994:633.

[7]徐春明.HPLC法测定盐酸美他环素片的含量[J].药学与临床研究,2008,16(4):121-123.

[8]罗阳.高效液相色谱法测定兽用氧氟沙星注射液中氧氟沙星的含量[J].分析仪器,2008,(6):289-290.