风寒感冒分散片流浸膏解热、镇痛及抗炎作用的观察
2010-07-25姚素波孙秋艳
陈 睿, 姚素波, 汪 茜, 孙秋艳, 曾 阳, 包 旭*
(1.青海师范大学生命与地理科学院,青海西宁810008;2.四川大学华西医院金卡医院;3.四川大学华西药学院,四川成都610041)
感冒属上呼吸道感染范畴临床上以发热及鼻咽部卡他症状为主要表现,是最常见的呼吸道传染病、多发病。本实验以风寒感冒片解表发汗,疏风散寒功效为指标观察采用分散片工艺流浸膏的解热、镇痛、抗炎的作用。
1 材料
1.1 药物 风寒感冒分散片流浸膏:规格5 g(生药)/mL,由河北万岁药业有限公司提供,批号:040808,用生理盐水配制成 0.52 g、0.26 g、0.13 g(生药)/mL 的浓度作为药物高、中、低剂量供实验用。风寒感冒颗粒:8 g/袋,1.3 g(生药)/1 g颗粒,由德阳三九药业有限公司生产,批号:0306001,用生理盐水配制成0.52 g(生药)/mL浓度供实验用。阿司匹林肠溶片,0.3 g/片,西北第二合成制药厂生产,批号:9812022,以生理盐水配制成30 mg/mL浓度供实验用。冰醋酸:500 mL/瓶,分析纯,由中国成都化学试剂厂生产,批号:20040523。伊文思蓝:上海化学试剂采购供应站经销,行知中学办工厂分装,批号:820805。盐酸吗啡:规格1 g/瓶,由国营东北第六制药厂生产,批号:590002。醋酸:分析纯,成都石羊化学试剂厂产品,批号:870330。2.4-二硝基酚:上海试剂三厂生产,批号:900915。酵母粉:由中外合营梅山——马利酵母有限公司生产,批号:980630。
1.2 动物 昆明种小鼠,体重17~22 g,♀♂兼用,由四川大学实验动物中心提供,动物级别:一级。SD大鼠,体重160~180g,由四川大学实验动物中心提供,动物级别:一级。
1.3 仪器 SHH.W21.Cr600恒温水浴,北京长安科学仪器厂出品;BS210s电子天平,Sartorius公司;T1000电子天平,ELECTRONIC SCALE;MC-3B型电脑数字式体温计,欧姆龙大连有限公司。
2 方法与结果
2.1 对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响 取昆明种小鼠按体重随机分成风寒感冒分散片流浸膏高、中、低剂量组,风寒感冒颗粒组,阳性对照阿司匹林组,阴性对照组,每组12只,♀♂各半。各组按0.4 mL/20 g灌胃给予相应药物,阴性对照组灌服等体积生理盐水,每日给药1次,连续给药5 d,于末次给药后1 h,用二甲苯0.05 mL/鼠涂抹每鼠右耳致炎,左耳作对照,致炎后30 min脱颈椎处死小鼠,以7 mm直径打孔器取下耳缘左、右耳片,分别用电子天平称重,以右、左耳片重量差表示肿胀度(肿胀度=右耳片重-左耳片重),结果见表1。
表1 风寒感冒分散片流浸膏对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响
表1结果显示风寒感冒分散片流浸膏高、中、低剂量肿胀度与阴性组比较具有显著性差异,表明其能明显减轻二甲苯致小鼠耳廓炎症反应。
2.2 对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性的影响 取昆明种小鼠按体重随机分为6组,每组10只,♀♂各半。给药剂量及方法同2.1项,于末次给药后1 h,各鼠均尾静脉注射0.4%伊文思蓝生理盐水溶液0.1 mL/10 g,然后随即腹腔注射0.6%醋酸0.2 mL/只,30 min后脱颈椎处死,仰位固定小鼠,剪开腹部皮肤,用6 mL生理盐水注入腹膜内,轻揉小鼠腹部,自腹膜中央剪一小孔,吸取腹腔液3 mL,以2000 r/min离心10 min,取上清液用UV-2201紫外分光光度计,在590 nm处测其光密度,结果见表2。
表2 风寒感冒分散片对小鼠腹腔毛细血管通透性影响
表2显示,风寒感冒分散片流浸膏高、中剂量能明显抑制H+所致小鼠腹腔毛细血管通透性亢进,与阴性组比较有显著性差异。表明风寒感冒分散片流浸膏具有的抗炎作用。
2.3 对醋酸致小鼠疼痛作用的影响 取健康昆明种小鼠依体重随机分为6组,每组♀♂各半,除阳性药物盐酸吗啡组外其余各组操作同2.1项,盐酸吗啡组各鼠仅在实验当日以0.67 mg/mL 的浓度腹腔注射 0.4 mL/20 g(13.4 mg/kg)1次。末次给药后30 min,各组各鼠腹腔注射0.6%醋酸0.2 mL/鼠,观察记录各鼠在腹腔注射醋酸后的15 min内扭体次数,进行组间比较其显著差异性,结果见表3。
表3 风寒感冒分散片流浸膏对醋酸致小鼠疼痛反应的影响
表3结果显示风寒感冒分散片流浸膏高、中、低剂量组均能抑制小鼠腹腔注射醋酸所引起的扭体反应次数,与阴性对照组比较具有显著或显著性差异,说明风寒感冒分散片流浸膏具有显著的镇痛作用。
2.4 对热刺激致痛的影响 取昆明种♀性小鼠放置入(55±0.5)℃水浴恒温的铝盘上,以小鼠舔后足为痛反应指标,记录痛反应出现的时间(痛阈值),测定两次平均值小于30 s且不跳跃的小鼠选供实验用。将合格的小鼠60只按体重、痛阈值随机分成6组,给风寒感冒分散片流浸膏高、中、低剂量组、风寒感冒颗粒组动物灌服相应药物0.4 mL/20 g,阴性对照组动物灌服等体积溶媒,给阳性对照组动物腹腔注射盐酸吗啡0.4 mL/20 g,以上各组在给药后的30 min、60 min、90 min、120 min测定各小鼠的痛阈值,痛阈值若超过60 s则以60 s计,计算各组小鼠痛阈提高率,痛阈提高率(%)=(给药后平均痛阈值-给药前平均痛阈值)÷给药前平均痛阈值×100%,结果见表4。
表4结果显示,风寒感冒分散片流浸膏高剂量组与阴性组比较,于给药后的30、60、90 min对热刺激所致足垫疼痛反应具有显著的抑制作用,其痛阈提高百分率有明显的提高,并具有极显著差异。表明风寒感冒分散片具有一定的镇痛作用。
2.5 对2.4-二硝基酚致热作用的影响 实验前以体温计测大鼠肛温2次,取肛温均值在36~38℃的大鼠依体重随机分成6组,每组♀♂各半,给风寒感冒分散片流浸膏高、中、低剂量组、风寒感冒颗粒组、阳性药物(6%阿司匹林)组动物灌服1.0 mL/100 g相应药物,给阴性组动物灌服等体积蒸馏水。每日给药1次,连续5 d。末次给药前,测各鼠肛温。给药30 min后各组各鼠背部皮下注射1.0%2.4-二硝基酚溶液0.2 mL/100 g体重致热,分别于注射后 0.5、1.0、2.0、3.0 h测定各鼠肛温,与致热前肛温的差值进行组间比较,结果见表5。
表4 风寒感冒分散片对热刺激小鼠疼痛反应的影响
表5结果显示,风寒感冒分散片流浸膏高剂量组于2.4二硝基酚致热后的0.5、1.0 h的肛温差与阴性组比较有显著和极显著性差异,风寒感冒分散片流浸膏中剂量组在致热后的0.5 h肛温差与阴性对照组比较有显著性差异。由此表明风寒感冒分散片对2.4二硝基酚的致热具有解热作用。
2.6 对酵母粉所致大鼠发热作用的影响 取两次平均肛温为36~38℃大鼠于各鼠背部皮下注射7%酵母液2.0 mL/100 g选择6 h肛温升高超过0.8℃的大鼠供实验用。分别灌胃给予风寒感冒分散片流浸膏高、中、低剂量组、风寒感冒颗粒组、阳性药物(6%阿司匹林)组动物相应药物1.0 mL/100 g,给阴性组动物灌服等体积蒸馏水。给药后0.5、1.0、 2.0、3.0、4.0 h分别测各组各鼠肛温1次,结果见表6。
表5 风寒感冒分散片对2.4-二硝基酚致大鼠发热的影响
表6 风寒感冒分散片对大鼠酵母致热作用的影响(℃,±s)
表6 风寒感冒分散片对大鼠酵母致热作用的影响(℃,±s)
注:① 与阴性组比较,*P <0.05,**P <0.01,***P <0.001。②因经两次肛温测定不符合要求的大鼠被剔除,故各组动物数不等,但均在10只以上。
给药后/h肛温0.5 1.0 2.0 3.0 4.0阴性对照 - 10 37.04 ±0.37组 别 剂量/(g生药/kg)动物数/只正常肛温/℃致热6 h肛温/℃0.31阿司匹林 0.6 g/kg 11 37.01 ±0.2838.37 ±0.4238.52 ±0.4538.51 ±0.3938.41 ±0.3338.34 ±0.3438.14 ±38.19 ±0.22风寒感冒分散37.23 ±0.26***风寒感冒38.36 ±0.2937.96 ±0.33**37.79 ±0.26***37.56 ±0.23***37.37 ±0.27***颗粒 10.4 11 37.05 ±0.4038.49 ±0.3538.11 ±0.27*38.09 ±0.31*38.25 ±0.2738.29 ±0.2238.22 ±0.30风寒感冒分散片流浸膏 10.4 11 37.13 ±0.4238.53 ±0.4338.06 ±0.35*37.97 ±0.30**38.10 ±0.24*38.29 ±0.3038.20 ±0.18风寒感冒分散片流浸膏 5.2 11 37.08 ±0.3838.52 ±0.3538.13 ±0.33*38.09 ±0.23*38.35 ±0.2438.40 ±0.21片流浸膏 2.6 10 36.99 ±0.410.2538.39 ±0.3438.05 ±0.34*38.34 ±0.3038.31 ±0.2638.24 ±0.2938.21 ±
表6结果显示,风寒感冒分散片流浸膏高、中、低剂量组在给药0.5 h时具显著的解热作用,其中高、中剂量组解热持续时间分别为 2.0、1.0 h。
3 讨论
风寒感冒片是由麻黄、葛根、紫苏叶、防风、桂枝、白芷、陈皮、苦杏仁、桔梗、甘草、干姜11味药组成的。方中麻黄、桂枝发汗解表散寒,为主药;辅以葛根解肌退热,苏叶、防风、白芷辛温发散,发表疏风,散寒镇痛;辅以陈皮、杏仁、桔梗宣肺化痰止咳,干姜温肺散寒,燥湿化痰;甘草调和诸药,为使。诸药合用,共奏发汗解表,疏风散寒,化痰止咳之功。动物实验结果风寒感冒分散片流浸膏能减轻二甲苯致小鼠耳廓炎症反应,明显抑制H+所致小鼠腹腔毛细血管通透性亢进,抑制小鼠腹腔注射醋酸所引起的扭体反应次数,提高热刺激痛阈值,对于2,4-二硝基酚及酵母所致大鼠体温升高亦有显著抑制作用。表明风寒感冒分散片流浸膏确有抗炎、镇痛、解热功效。
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