消癥丸的制备及质量控制

黄祖光， 孙 臻， 梁建珍

(三亚市中医院，海南三亚572000)

消癥丸由川芎、浙贝母、丹参、枳实、柴胡、红花、鳖甲(醋)、穿山甲(炮)等14味中药组成的中药制剂。具有疏肝理气，化瘀散结之功效。主要用于乳腺增生，卵巢囊肿，子宫肌瘤，以及输卵管不通等症。其中主药川芎活血祛瘀，行气开郁，祛风止痛。其主要有效成分川芎嗪，原标准中无含量测定项目，为有效地控制该制剂的质量;采用高效液相色谱法对川芎中川芎嗪进行了含量测定［1，2］，在原基础上提高了质量标准，也能更好的控制消癥丸的质量。

1 仪器与试剂

PERKIN ELMER高效液相色谱仪，295紫外-可见波长检测器，1022数据处理机(美国);甲醇(色谱级);盐酸川芎嗪对照品(来源:中国药品生物制品检定所，批号:110817-200305);川芎对照药材(来源:中国药品生物制品检定所，批号:120918-200406);浙贝母对照药材(来源:中国药品生物制品检定所，批号:120972-200404);丹参对照药材(来源:中国药品生物制品检定所，批号:120923-200509);丹参酮IIA对照品(来源:中国药品生物制品检定所，批号:110766-200417);消癥丸(三亚市中医院制剂室自制);AEL-40SM1/100000称量天平(日本Shimadzu公司);硅胶G(青岛海洋化工厂，批号:980803);水为蒸馏水;乙醚(上海振兴化工一厂，AR级);其它试剂均为分析纯。

2 处方及制备

2.1 处方 柴胡84 g，枳实105 g，红花56 g，浙贝母105 g，海藻 105 g，昆布 105 g，丹参 140 g，川芎 105 g，山楂(焦)210 g，青皮 105 g，龟板(制)140 g，鳖甲(醋)140 g，穿山甲(炮)35 g，牡蛎 210 g，共制成 1000 g。

2.2 制法 以上14味药材，将枳实、浙贝母、川芎、丹参、青皮、龟板(制)、鳖甲(醋)、穿山甲(炮)粉碎成粗粉，混匀，得粗粉备用。其余柴胡等6味加10倍水煎煮2次，每次1.5 h，合并煎液，滤过，浓缩成为相对密度:1.20 ～1.28(60 °C)的清膏，与上述粗粉混匀，干燥，粉碎成细粉，过筛，混匀，用适量蒸馏水泛丸，干燥，打光，即得。

3 质量标准

3.1 性状

本品为灰棕色至灰褐色圆形小丸，气香，味微苦。

3.2 薄层色谱法［3］

3.2.1 川芎的薄层色谱鉴别［3］:取本品 3 g，加硅藻土 2 g，研匀，加乙醚20 mL，加热回流1 h，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯1 mL溶解，作为供试品溶液;另取川芎对照药材1 g，同法制成对照药材溶液;再取盐酸川芎嗪对照品，加乙酸乙酯制成每1 mL含1 mg的溶液，作为对照品溶液;又再取缺川芎的阴性样品，同法制成阴性溶液。照薄层色谱法(附录VIB)试验，吸取上述4种溶液各5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯(9∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点。阴性对照试验无干扰。

3.2.2 浙贝母的薄层色谱鉴别［4］:取本品粉末5 g，加浓氨试液3 mL与氯仿25 mL，超声处理15 min，放置过夜，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿0.5 mL使溶解，作为供试品溶液;另取浙贝母对照药材1 g，同法制成对照药材溶液;再取缺浙贝母的阴性样品，同法制成阴性溶液。照薄层色谱法(附录VIB)试验，吸取上述3种溶液5 μL，分别点于同一2%氢氧化钠硅胶G薄层板上，以氯仿-乙酸乙酯-甲醇-水(30∶40∶15∶10)10℃以下放置后的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液和亚硝酸钠乙醇试液置日光下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性对照试验无干扰。

3.2.3 丹参的薄层色谱鉴别［3］:取本品 3 g，加乙醚 20 mL，振摇，放置1 h，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯1 mL使溶解，作为供试品溶液;另取丹参对照药材1 g，同法制成对照药材溶液;再取丹参酮IIA对照品，加乙酸乙酯制成每1 mL含1 mg的溶液，作为对照品溶液;又再取缺丹参的阴性样品，同法制成阴性溶液。照薄层色谱法(附录VIB)试验，吸取上述4种溶液各5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-乙酸乙酯(19∶1)为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性对照试验无干扰。

3.3 含量测定

3.3.1 色谱条件 色谱柱为Symmetry C18柱(150 mm×3.9 mm，5 μm);流动相为甲醇-水(60 ∶40);流速为 1.0 mL/min;检测波长为296 nm;柱温为室温;进样量为10 μL。

3.3.2 对照品溶液的制备 精密称取盐酸川芎嗪对照品80 mg，置200 mL量瓶中，加甲醇溶解，稀释至刻度，摇匀，精密吸取5 mL，置50 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得盐酸川芎嗪的对照液。

3.3.3 供试品溶液的制备 精密称取消癥丸2 g。用乙醚15 mL加热回流1 h，放冷，滤过，滤液置100 mL量瓶中，再加入25%的盐酸使溶液的pH值为2～3，挥干，残渣加甲醇稀释至刻度，摇匀，精密吸取5 mL，置50 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。

3.3.4 阴性对照液的制备 按处方比例，取除川芎外的其他几味药材，按生产工艺制备阴性样品，并依3.3.3项下方法制成阴性样品溶液。

3.3.5 系统适用性试验 分别吸取对照品溶液、阴性样品溶液、供试品溶液各10 μL，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，从图中可见阴性样品无干扰。结果见图1。

3.3.6 线性关系考察 精密称取盐酸川芎嗪对照品80 mg，置200 mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。精密吸取上述溶液1、2、4、6、8 和10 mL，置50 mL 量瓶中，用甲醇稀释至刻度，得每1 mL含盐酸川芎嗪分别为 8、16、32、48、64、80 μg标准系列溶液，分别精密吸取上述各标准溶液10 μL注入色谱系统中，记录峰面积，以峰面积对浓度计算回归方程为:A=405.86+21052.47C，r=0.99999，n=6，川芎嗪浓度在8～80 μg/mL范围内呈良好的线性关系。

图1 消癥丸的高效液相色谱图

3.3.7 精密度试验 取对照品按供试品溶液的制备方法制备供试液，重复进样6次，记录色谱，RSD为0.4%(n=6)。结果表明仪器精密度良好。

3.3.8 稳定性试验 取同一供试品溶液，分别在0、3、6、9、12、24 h进样，记录色谱图，测定峰面积。结果，RSD=1.56%(n=6)，表明供试品溶液在24 h内稳定。

3.3.9 重复性试验 取供试品(批号:070516)按供试品溶液的制备方法制备6份供试液，分别进样，记录色谱，RSD为0.34%(n=6)。结果表明本法重复性良好。

3.3.10 加样回收率试验 取已知含量的同一批(批号:070516)样品粉末适量，精密称取6份，分别精密加入盐酸川芎嗪对照品约80 mg，按3.3.3项下方法制成供试品溶液，分别精密吸取10 μL，记录色谱峰面积，计算回收率。平均回收率为100.10%，RSD 为1.70%，结果详见表1。

表1 加样回收率试验结果(n=6)

3.3.11 样品含量测定

按供试品溶液的制备方法制备供试液和对照品溶液，分别进样，记录色谱，测定峰面积。测定了6批样品中盐酸川芎嗪含量。结果详见表2。

4 讨论

本标准对消癥丸中的川芎、浙贝母和丹参进行了薄层色谱考察，结果与对照药材及对照品斑点一致，效果较好，可作为定性控制指标;以川芎中有效成分川芎嗪为含量测定指标，用高效液相色谱法进行含量测定，选择甲醇-水(60∶40)为流动相，使川芎嗪与其它组分能较好地分离，不会出现拖尾现象。

表2 6批样品含量测定结果(n=6)

由于川芎嗪在高温条件下不稳定、易氧化和见光易分解，而在酸性条件下相对稳定，故选用盐酸川芎嗪作为含量测定指标。对消癥丸进行定量分析，可有效控制该制剂的质量。

［1］张 嵩，陈蔚林，饶高堂，等.HPLC法测定盐酸川芎嗪的含量［J］，中国药业，2000，9(6):18-19.

［2］赵志春，俞惠琴，陆克平，等.中药制剂川芎嗪含量的高效液相色谱法测定［J］.中国中药杂志，1991，16(12):729-730.

［3］中国药典［S］.一部.2005:28，52.

［4］中华人民共和国卫生部药典委员会编.中药薄层色谱彩色图集［M］.广州:广东科技出版社，1995:66.