穿心莲内酯分散片的制备及质量研究

林素静， 范 铭

(深圳职业技术学院，广东深圳518055;江苏云阳集团药业有限公司，江苏丹阳212300)

穿心莲内酯(Andrographolide)是自爵床科植物穿心莲(Andrographis Paniculata(Burm.f)Ness)中提取得到的二萜内酯类化合物，是中药穿心莲的主要有效成分之一。现代药理研究表明，穿心莲内酯具有消炎抗菌、抗病毒感染、抗疟、抗肿瘤、免疫刺激、抗心血管疾病、保肝利胆等作用，临床上常用于菌痢、钩端螺旋体病、脑膜炎、肺炎、细菌性与病毒性上呼吸道感染等病症的治疗［1］。但穿心莲内酯具有强疏水性，普通片剂中药物的溶出速度和溶解度差，生物利用度低，分散片遇水能迅速崩解并均匀分散，也可在水中分散后饮用，适宜儿童、老人和吞咽困难者服用。本文将穿心莲内酯制成分散片，同时对其进行质量研究和稳定性初步考察，以期解决穿心莲内酯溶出度低的问题，保证制剂的临床疗效。

1 仪器与材料

1.1 仪器

ZRS-8G智能溶出仪(天津天大天发科技有限公司);LC-10AT高效液相色谱仪(日本岛津公司);SPD-10A紫外可见检测器(日本岛津公司);UV-2450紫外可见分光光度计(日本岛津公司);SHK-6湿法制粒机(上海美阳机械发展有限公司);DP-50单冲压片机(上海美阳机械发展有限公司);BT25S电子天平(塞多利斯科学仪器有限公司)。

1.2 材料

穿心莲内酯原料药(四川省玉鑫药业有限公司);穿心莲内酯对照品(中国药品生物制品检定所，批号:110797-200307);微晶纤维素(MCC)、乳糖、羧甲基淀粉钠(CMSNa)、微粉硅胶、硬脂酸镁、聚维酮(PVPk30)(浙江湖州展望化学药业有限公司);甲醇(色谱纯);所用试剂均为分析纯，水为重蒸水。

2 方法

2.1 穿心莲内酯分散片的制备

将穿心莲内酯原料药、微晶纤维素、乳糖、微粉硅胶及羧甲基淀粉钠过100目筛，混合均匀，以聚维酮k30溶液作为黏合剂，制软材，湿法制粒，60℃干燥，过筛整粒，加硬脂酸镁，混合均匀，压片，每片含穿心莲内酯0.05 g。

2.2 穿心莲内酯分散片的处方筛选

2.2.1 崩解剂的筛选

固定处方中其它成分的量，改变羧甲基淀粉钠的内加量和外加量，按“2.1”项下方法制备穿心莲内酯分散片，考察分散均匀性及溶出度。

固定处方中其它成分的量，改变聚维酮溶液的溶剂和浓度，按“2.1”项下方法制备穿心莲内酯分散片，考察分散均匀性、溶出度及颗粒成型状况。

2.3 分散均匀性考察［2］

取穿心莲内酯分散片2片，置100mL(20±1)℃水中振摇，3min应全部崩解且完全均匀分散并通过2号筛。

2.4 溶出度测定

取穿心莲内酯分散片，照《中国药典》2005年版二部附录ⅩC溶出度测定法中的第二法［3］，以0.2%十二烷基硫酸钠为溶出介质，转速(50±1)r/min，温度(37±0.5)℃，依法操作，45 min 时，取样10 mL，0.45 μm 微孔滤膜滤过，取续滤液2 mL，加溶出介质稀释至10 mL，作为供试品溶液;另精密称取穿心莲内酯对照品适量，加适量乙醇溶解后，加溶出介质稀释制成每mL中约含10 μg的溶液。按中国药典2005版附录照紫外-可见分光光度法，在224 nm处测定吸光度，计算每片的溶出量。

2.5 含量测定

2.5.1 色谱条件

Inertsil ODS-SP(4.6 mm × 250 mm，5 μm);流动相:甲醇-水(50:50，v/v);流速:1.0 mL/min;检测波长:224 nm;柱温:40℃;进样量:20 μL。

2.5.2 标准曲线的绘制

精密称取穿心莲内酯对照品10 mg，置100 mL量瓶中，用流动相溶解稀释至刻度，摇匀，得100 μg/mL作为标准贮备液，分别精密移取适量，配制浓度分别为 5，10，15，20，30，40，60 μg/mL的对照品溶液，分别取 20 μL 注入液相色谱仪，记录色谱图，以峰面积对浓度进行线性回归。

2.5.3 回收率试验

Hyperplastic polyp, adenomatous polyp, malignant polyp.

精密称取穿心莲内酯对照品适量，加入处方量混合辅料，配成药物浓度分别为16、20、24 μg/mL的溶液，分别进样20 μL，记录色谱图，计算回收率。

2.5.4 精密度试验

取“2.5.2”项下的标准贮备液适量，配制成浓度为20 μg/mL的穿心莲内酯对照品溶液，重复进样6次，记录色谱图，计算RSD。

2.5.5 重复性试验

取穿心莲内酯分散片20片，精密称定，研细，分别精密称取细粉6份(约相当于穿心莲内酯10 mg)置100 mL量瓶中，流动相溶解稀释至刻度，摇匀，滤过。精密移取续滤液5 mL置25 mL量瓶中，流动相稀释至刻度，摇匀，分别进样20 μL，记录色谱图，计算RSD。

2.5.6 穿心莲内酯分散片的含量测定

按“2.5.5”项下配制供试品溶液;另精密称取穿心莲内酯对照品适量，加流动相溶解并稀释制成每mL中约含20 μg的溶液。各取20 μL注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算含量。

2.6 制剂稳定性影响因素试验

参考中国药典2005年版附录，按终处方制备样品，在高温(60℃)，高湿(RH 90% ±5%)，强光(4500Lx±500Lx)条件下进行为期10 d的影响因素试验，分别于0、5、10 d测定含量、溶出度，考察分散均匀性。

3 结果

3.1 穿心莲内酯分散片的处方筛选

3.1.1 崩解剂的筛选 崩解剂的筛选结果 见表1。

处方1在1 min内全部崩解并通过2号筛，但是溶出度测定显示45 min仅溶出了58.3%。处方2在处方1的基础上增加了CMS-Na的用量，溶出度得到改善。处方3调整了CMS-Na的用量，使可压性更佳。由于外加了CMS-Na，压片前细粉较多。处方4将CMS-Na全部内加，制得的片剂分散均匀性和溶出度均较好，但是细粉仍较多，故以处方4为基础进一步对黏合剂进行筛选。

表1 崩解剂用量的筛选

3.1.2 黏合剂的筛选

确定处方中CMS-Na的用量为6%，加入方式为内加，进一步进行黏合剂的溶剂和用量的筛选，结果见表2。以水为溶剂时，所得颗粒细粉量较以乙醇为溶剂时多，且分散均匀时间长。当PVPk30的浓度为5%时，分散均匀时间减少。因此确定以5%PVPk30无水乙醇溶液为黏合剂。

表2 黏合剂的筛选

3.2 溶出度测定

以穿心莲内酯的吸收度(A)对穿心莲内酯的浓度(C)进行回归，得标准曲线方程为:A=0.0354C+0.0047，r=0.9996(n=7)，线性范围为4 ～16 μg/mL。穿心莲内酯的平均回收率为100.4%，RSD为0.93%。按照终处方制备三批穿心莲内酯分散片，3批样品的溶出度测定结果见表3。

表3 3批样品溶出度测定结果

3.3 含量测定

以穿心莲内酯的峰面积(A)为横坐标，穿心莲内酯的浓度(C)为纵坐标，进行线性回归，得回归方程为:A=28964C-128886，r=0.9999(n=7)。结果表明:穿心莲内酯在5～60 μg/mL的范围内，峰面积与浓度呈良好的线性关系。回收率试验结果显示，该方法的回收率均在98% ～102%，符合规定。精密度试验结果显示，RSD=0.25%。重复性良好，RSD=0.14%。测定3批样品的含量，结果分别为50.72 mg，50.77 mg，49.77 mg。

3.4 制剂稳定性影响因素试验

取三批样品中一批，进行制剂稳定性影响因素试验，考察穿心莲内酯分散片的初步稳定性。试验结果见表4。

表4 穿心莲内酯分散片稳定性影响因素的试验结果

结果表明，穿心莲内酯分散片在高温及强光条件下放置5 d、10 d，与0 d相比，外观及内在质量均无明显变化。而在高湿条件下放置5 d后，片剂吸湿，分散时间延长，表明本品保存时应注意防潮。

4 讨论

穿心莲内酯分散片采用湿法制粒制备，生产工艺简单，操作简便，易于产业化。采用处方筛选确定的最优处方制备穿心莲内酯分散片，体外溶出度考察结果显示，其在45 min时累积溶出度可达90%以上，大大提高了穿心莲内酯的溶出速度;且分散均匀性良好，在1 min内即可完全分散，明显优于普通片剂。处方中加入乳糖，使口感得到改善。所建立的穿心莲内酯分散片中穿心莲内酯的溶出度测定方法和含量测定方法均简便、准确、可靠，可作为该制剂的质量控制方法。制剂稳定性影响因素试验结果表明，除高湿条件，其它条件下穿心莲内酯分散片均具有较好的稳定性。

［1］李曙光，叶再元.穿心莲内酯的药理活性作用［J］.中华中医药学刊，2008，26(5):984-986.

［2］中国药典［S］.二部.2005:附录5.