液基细胞学与HPV检测在早期宫颈病变中的应用对比分析

黄东莉 纪爱玲

835000 新疆伊犁农四师医院妇产科 (黄东莉) 新疆伊犁州计生办 (纪爱玲)

HPV高危型病毒可以引起宫颈癌，而低危型只引起良性病变[1-2]。本文为此将宫颈液基细胞学检查(TCT)与HPV检测技术联合进行宫颈病变早期筛查，希望找出一种高效的宫颈病变早期筛查手段，以利于妇科病普查工作顺利有效的开展。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2007年9月～2009年7月于本院妇科门诊要求进行宫颈病变筛查的750例患者给予宫颈液基细胞学检查和高危型HPV检测及电子阴道镜下宫颈活组织病理检查。所有患者无宫颈物理治疗史，3个月内无任何宫颈药物治疗及阴道炎病史。患者年龄19～68岁，平均年龄为(36.7±7.2)岁。孕次0～10次，产次0～6次，均有性生活史。

1.2 检测方法

1.2.1 宫颈液基细胞学检测 采用美国liquid-protest系统进行检测。充分暴露宫颈，若分泌物较多时可用棉签轻轻拭去，不可用力擦。将Rovers毛刷中央部分轻轻深插入子宫颈管，以使较短的刷毛能完全接触到子宫颈，柔和地向前抵住毛刷，并按同一个时针方向转动毛刷5周以上，切勿来回转动。取下Rovers毛刷刷头放入保存小瓶中，拧紧瓶盖。按照TBS分类系统对宫颈病变诊断，包括：(1)正常范围(Within normal limits，WNL)；(2)意义不明的不典型鳞状细胞(typical squamous cell of undermined significance，ASCUS)；(3)低度鳞状上皮内病变(Low-grade squamous intraepithelial lesions，LSIL)；(4)高度鳞状上皮内病变(high-grade squamous intmepithelial lesions，HSIL)；(5)鳞癌(squamous cell carcinoma，SCC)。仍采用细胞学和组织学相对应的诊断术语。细胞学诊断阳性是指ASCUS及以上病变。

表1 TCT、HR-HPV检查结果与阴道镜下活检结果比较

1.2.2 HPV检测 HR-HPV检测采用Digene公司hybrid captureⅡ方法，取一定量与液基细胞学相同的方法采集的样本，进行DNA抽取30min，PCR基因扩增120min，应用导流杂交仪进行导流杂交15min，显色5min，结果分析。检测13种HR-HPV，包括16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68型，HR-HPV≥1.0pg/ml为阳性诊断标准。

1.2.3 阴道镜下活检 采用Olympus公司的阴道镜数字成像系统进行检测。采用3%冰醋酸试验，绿色镜观察血管形态。碘溶液涂宫颈，检查是否着色，用活检钳于可疑区取组织，若镜下未发现可疑病变部位，则常规在移行带3、6、9、12点做活检。诊断标准分为：宫颈慢性炎症；上皮内瘤变I级和(或)湿疣(Ⅱ级)；上皮内瘤变Ⅱ/Ⅲ级(CINII/CINⅢ)，其中CⅢ包括原位癌；鳞癌；腺癌。

1.3 统计学处理 以阴道镜活检诊断的HSIL(CI2/3)和SCC为标准与细胞学结果及HPV-DNA检出率对照。差异显著性分析采用t检验，显著性差异界限为P＜0.05。各种检测均双盲进行。

2 结果

本组研究资料中，细胞学结果有异常的患者150例，占20.0%(150/750)。ASCUS和LSIL是异常细胞学结果中最常见的两种，约占病例数的76.7%(115/150)；ASCUS中，其阳性检出率为3.75%(3/80)；HR-HPV检出者仅为4例，阳性检出率为8.0%(4/80)，均以组织学检查作为金标准，阳性检出率指CINⅡ及其以上病变，因为大部分的CINI不治疗也能自然消退。LSIL组阳性检出率为7/35(20.0%)，与ASCUS组相比，两组阳性检出率有显著性差异。同时HSIL，SCC与活检符合率分别为91.9%和100%，HR-HPV与活检符合率分别为96.7%和100%。TCT、HR-HPV两者阳性检出率两组间均无显著性差异。随着TCT的级别越高，阴道镜下活检符合率越高。具体情况见表1。

3 讨论

近年来我国宫颈病变的发生有明显上升和年轻化趋势，国内外研究表明宫颈病变是一个从宫颈CIN-早期浸润癌-浸润癌由量变到质变的连续发展过程。早期宫颈病变的治疗效果好，据报道宫颈浸润性癌5年生存率67%，早期癌为90%，原位癌CINI～Ⅲ为100%[3-4]。

我国近年来一些大城市及经济发达地区也应用LCT及TBS系统进行宫颈病变的普查工作，使宫颈病变及CIN的检出率明显的提高。不过其检测也有一定的局限性。(1)在组织病理学上，根据组织结构、细胞排列和形态很容易分辨和判断，但在LCT抹片中均为脱落的上皮细胞，有时伴有细胞变性。又缺乏组织结构的支持，可能造成一定程度的混淆，不易判断。(2)LCT取材的范围较广，规范的取材方法需要将取样器深入宫颈口一定深度，给予一定压力的情况下。旋转5圈。这样获得的样本，基本涵盖了宫颈全周的脱落细胞，而组织病理学取材的范围较窄，主要是取材医师在阴道镜下，判断可疑病变部位进行活组织取材，通常仅取病变最重处，这样获得的标本仅代表取材部位的病变。二者取材范围的差异，可能导致组织病理学为假阴性诊断，而非细胞学诊断为假阳性，必要时应对病例进行随访。

本文通过HPV检测阳性、宫颈细胞学阳性分别与宫颈组织活检病理结果比较：CIN I级及以上级别阳性符合率都在90%以上，差异无显著性(P＞0.05)。这表明HPV与液基细胞学检测在宫颈组织活检病理高级别中阳性结果相近。HPV联合TCT检测结果中LSIL、HSIL、癌的检出率均高于同期单纯TCT性检出率。其中LSIL及TCT阳性总检出率两组比较，差异有显著性(P＜0.05)。这与相关研究一致。故对于LSIL级以上病变，HR—HPV检测可不作为常规。阴道镜检查最大的优点是可发现肉眼看不见的亚临床病变，并在可疑病变处取活检，从而提高活检的阳性率和诊断准确率。但由于宫颈管内病变较难观察，存在一定假阴性，因此，阴道镜下活检，可能漏掉一些严重病例，尤其是宫颈管内病变。因此，将HPV检测与TCT检测技术联合应用于宫颈病变的检查中，切实可行。

[1] 杨英捷,赵健,李雪倩,等.人乳头瘤病毒同亚型感染与宫颈病变的相关性[J].中国妇产科临床,2006,7(4):253-256.

[2] 李亚里,杨怡卓.人乳头瘤病毒亚型检测在宫颈病变分流管理中的意义[J].中国实用妇科与产科杂志,2007,23(7):501-503.

[3] 苏光,钱莉芸,刘阳,等.多重人乳头瘤病毒感染检测在宫颈病变诊断中的价值[J].中国实用妇科与产科杂志,2007,23(9):706-707.

[4] 卞美璐.WHO(2006)宫颈病变综合防治实践指南简介[J].中国实用妇科与产科杂志,2007,23(7):557-560.