酵母硒对围产前期奶牛全血硒含量和血液抗氧化能力的影响

东北农业大学动物科学技术学院 雒国彬 赵洪波 文奇男 王志博 张永根＊

奶牛在围产期（产前21 d至产后21 d）由于生理状态、组织代谢的变化以及泌乳开始对营养物质需求的急剧增加，都会使其神经内分泌和免疫状态发生很大的变化（Goff和Horst，1997）。 围产期对奶牛健康是非常关键的阶段。奶牛在围产期可能经历氧化应激，氧化应激可以引起围产期奶牛机能紊乱，从而导致相关的代谢疾病（Ronchi等，2000）。硒作为谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的组成成分具有抗氧化作用。酵母硒作为有机硒，具有毒性低、对环境污染小、生物利用率高等优点（钟荣珍等，2005）。本试验研究了不同水平酵母硒对围产前期（产前21 d至分娩）奶牛全血硒含量和血液抗氧化能力的影响，以便为酵母硒在奶牛养殖业的应用提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验动物 选取20头处于干奶期 （产前4周），体况评分相近（3.25 ～ 3.75），胎次相近（3 ～ 4胎），预产期相近的中国荷斯坦奶牛。

1.2 试验设计 试验采用完全随机区组设计，随机分为4组（A、B、C和D组），每组5头奶牛。A组（对照组）：饲喂基础日粮（硒含量0.29 mg/kg DM）；B组：饲喂基础日粮+酵母硒 2.4 g/d（硒含量0.49 mg/kg DM）；C组：饲喂基础日粮+酵母硒4.8 g/d（硒含量 0.69 mg/kg DM）；D 组：饲喂基础日粮+酵母硒7.2 g/d（硒含量0.89 mg/kg DM）。所用的酵母硒（商品名：赛乐硒，英文名称：SELPLEX）成分：酵母硒、干啤酒酵母，硒1000 mg/kg（由北京奥特奇生物制品有限公司提供）。试验期为3周，预试期1周，从预产前4周（产前28 d）开始，持续到分娩当天。

1.3 饲养管理 试验牛按牛场常规饲养管理程序进行。试验组和对照组饲喂配制相同的基础日粮，日粮组成及营养水平见表1。每天分早 （06∶00）、中（13∶00）、晚（20∶00）3 次给料，牛只全天自由采食。试验各组根据施加的处理不同，饲喂不同水平的酵母硒。每日酵母硒平均成3份，分3次饲喂，酵母硒与适量基础日粮混合进行饲喂，以保证准确采食。同时每头牛补充维生素E 800 mg/d，以满足奶牛的需要。

表1 基础日粮组成及营养水平（干物质基础）

1.4 样品收集与分析 分别在产前14、7 d和分娩当天，尾静脉采集血液20 mL，其中取10 mL用一次性真空采血管（规格：肝素管）收集，用于测定全血硒含量，采用荧光法测定参照GB/T 5009.93-2003《食品中硒的测定》；另取10 mL用一次性真空采血管 （规格：无添加剂管）收集，3000 r/min离心15 min，分离制得血清，-20℃冷冻保存。使用南京建成生物工程研究所提供试剂盒测定血清中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、总抗氧化能力 （T-AOC）、总超氧化物歧化酶 （TSOD）的活力和丙二醛（MDA）的含量，按试剂盒说明进行操作。

1.5 数据处理 应用SAS 9.1统计分析软件的ANOVA过程进行方差分析，采用Duncan’s方法进行多重比较，数据以平均数±标准差的形式表示。

2 结果

2.1 酵母硒对围产前期奶牛全血硒含量的影响见表2。由表2可以看出，在产前14 d，B、C、D组分别比对照组提高了16.67%、25%和16.67%（P<0.05）；在产前 7 d，饲喂酵母硒各组与对照组相比差异不显著（P<0.05）；在分娩当天，D组比对照组提高20%（P<0.05），B组和C组都提高了6.67%，差异不显著（P＞0.05）。

表2 酵母硒对奶牛全血硒含量的影响μg/mL

2.2 酵母硒对围产前期奶牛血清抗氧化能力的影响

2.2.1 酵母硒对GSH-Px活力的影响 见表3。通过表3可以看出，在产前14 d，D组奶牛血清中GSH-Px活力比对照组提高11.81%（P<0.05）；在产前7 d，B组比对照组提高38.33%，C组和D组与对照组相比无显著差异（P＞0.05）；在分娩当天，C组比对照组提高20.69%（P<0.05），D组比对照组提高46.67%（P<0.01）。

表3 酵母硒对奶牛血清GSH-Px活力的影响U/mL

2.2.2 酵母硒对血清T-AOC的影响 见表4。通过表4可以看出，在产前14 d，各饲喂酵母硒组血清中T-AOC与对照组相比都有提高，但差异不显著（P＞0.05）；在产前7 d，B组比对照组提高36.46%（P<0.01）；在分娩当天，B组比对照组提高 31.47%（P<0.05）。

2.2.3 酵母硒对血清T-SOD活力的影响 见表5。通过表5可以看出，在产前14 d，C组奶牛血清中T-SOD活力比对照组提高9.67%（P<0.01），在产前7 d，C组和D组比对照组分别提高7.51%和5.26%（P<0.05）；在分娩当天，各饲喂酵母硒组都比对照组有提高，但差异不显著（P＞0.05）。

表4 酵母硒对奶牛血清T-AOC的影响U/mL

表5 酵母硒对奶牛血清T-SOD活力的影响U/mL

2.2.4 酵母硒对血清MDA的影响 见表6。通过表6可以看出，在产前14 d，各组之间差异不显著（P ＞ 0.05）；产前 7 d，B、C 组和 D 组分别比对照组降低 45.60%、38.38%和 32.17%（P<0.05），饲喂酵母硒各组之间差异不显著 （P＞0.05）；在分娩当天，B组比对照组降低56.77%（P＜ 0.01），C 组比对照组降低 23.35%（P ＜ 0.05），D组与对照组相比差异不显著（P＞0.05）。

表6 酵母硒对奶牛血清MDA的影响nmol/mL

3 讨论

与无机来源硒相比，给反刍动物饲喂有机来源的硒（包括酵母硒和富硒饲料）通常能提高血液和组织中的硒浓度和提高GSH-Px的活性 （许宗运等，2007）在本次研究中，产前14 d和分娩当天得到的结果证明这一点，而在产前7 d饲喂酵母硒各组与对照组没有显著差异（P＞0.05），这可能是因为所选择的试验奶牛的生产阶段不同造成的，此阶段奶牛可能动员内源硒使血硒浓度提高，机理有待进一步研究。

本研究中奶牛血清中GSH-Px活力在产前7 d，T-SOD活力在产前14 d和7 d的变化表明：适宜水平的酵母硒提高了GSH-Px活力和T-SOD活力，随着酵母硒水平的提高，都呈下降的趋势，这与许宗运等（2007）和刘强（2008）报道相同。硒在低浓度范围内可清除活性氧自由基（ROS），且清除效果随硒浓度增大而增强，使ROS含量不断减少。此时，硒的生物效应表现为营养作用。当硒处于高浓度范围内时，硒催化产生ROS，且随硒浓度增大，ROS产生量增多，硒的生物效应表现为毒性作用（徐辉碧，2001）。这说明高浓度的硒催化产生了ROS，机体清除过多的ROS，导致GSH-Px活力和T-SOD活力的降低。丙二醛（MDA）含量在产前7 d和分娩当天随着酵母硒水平的提高，呈上升的趋势，说明高浓度的硒催化产生过多ROS，使机体脂质过氧化速度加快，产生过氧化物增多，导致过氧化物代谢终产物MDA的含量升高。适宜的酵母硒水平提高血清中T-AOC，随着酵母硒添加水平提高，T-AOC降低，这与许宗运等（2007）报道相同，这表明适宜的酵母硒添加水平提高了血清的总抗氧化能力，而酵母硒添加水平过高会降低血清的抗氧化能力。

4 结论

从本研究可以得出，围产前期奶牛添加酵母硒2.4 g/d能够提高全血硒含量和抗氧化能力。

[1]刘强.反刍动物营养调控研究 [M].北京.中国农业科学技术出版社，2008.106～137.

[2]徐辉碧，杨祥良，刘琼.硒的生物疚的两面性[A].中国营养学会.中国营养学会第七届微量元素营养学术会议论文摘要汇编[C].201.16～25.

[3]许宗运，张丽娟，韩俊文.不同水平酵母硒对奶牛血液抗氧化能力的影响[J].动物营养学报，2007，6：753 ～ 757.

[4]中华人民共和国卫生部，中国国家标准化管理委员会.GB/T5009-2003.食品中硒的测定[S].北京：中国标准出版社，2003.

[5]钟荣珍，李建国，房义，等.反刍动物硒营养研究进展[J].黄牛杂志，2005，6：44 ～ 46.

[6]Goff J P，Horst R L.Physiological Changes at Par-turition and Their Relationship to Metaboli Disor-ders[J].Journal of Dairy Science，1997，80：1260～1268.

[7]Ronchi B，Bernabucci U，Lacetera N，et al.2000.Oxidative and metabolic status of high yielding dairy cows in different nutritional conditions during the transition period[A].51st Annu[C].Mtg.E.A.A.P，Vienna.2000.125.