基质分散固相萃取 GC/MS法检测人体血液中去痛片的主要成分

王迎春, 韩 驰, 谢增瑞

(1.铁道警官高等专科学校,河南郑州 450053;2.河南省郑州市公安局刑科所,河南郑州 450004)

0 引言

去痛片(compound aminopyrine phenacetin tablets),又称索米痛(Somedon),其主要成分为氨基比林、非那西丁、咖啡因和苯巴比妥,具有较强的镇痛、解热及抗炎作用,常用于发热、头痛、神经痛、牙痛、关节痛、肌肉痛、痛经等症[1-2]。由于其疗效好、价格低、易于获得,故每年因意外、自杀而造成中毒、死亡的案件时有发生,关于它的检验方法也屡见报道[3-4],但这些方法在药物提取时不仅溶剂用量大、污染严重,而且费时费力。为了办案需要我们采用基质分散固相萃取法对人体血液中的去痛片成分进行了检验研究,并取得了满意的结果。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

仪器:Agilent 6890/5975i气——质联用仪及化学工作站(美国安捷伦公司);TDL-40B离心机(湖南星科科学仪器有限公司);DSY-Ⅲ型浓缩仪(北京精华苑技术研究所)。试剂:乙腈、硫酸镁、氯化钠等(均为分析纯);吸附剂:石墨化碳、PSA、C18(均为美国安捷伦公司提供);标准样品:氨基比林、非那西丁、咖啡因、苯巴比妥、SKF525A(均为公安部物证鉴定中心提供,临用时配制成浓度为 1mg/m L的标准溶液)。

1.2 仪器条件

色谱柱:J＆W 30m×0.25mm×0.25 um DB-5/MS柱;柱温:50℃保持 1min,以 20℃/min升至 260℃,保持 5min;载气:高纯氦(1.0m L/min);电离方式:EI(70 eV);离子源温度:230℃;四级杆温度:130℃;质量范围:60～350 aum;定量离子(m/z):内标物 165、非那西丁 108、氨基比林 231、咖啡因 194、苯巴比妥 204。

1.3 样品处理与检验

准确量取待测血样 5mL,置于一 50mL的具塞试管中。另取空白血样 5mL,首先向其中添加氨基比林、非那西丁、咖啡因和苯巴比妥各 10 ug,然后向上述两血样中各加入 10mL乙腈,强力振摇 1min,再加入 4克无水 MgSO4及 1克 NaCl,振摇 1min后,加入 10 ug内标物,振摇 30 s,4 000 r/min离心 2 m in。将上清液移入另外两支具塞试管中,各加入0.5克 MgSO4、0.1克 PSA和 0.1克 C18(色素过重时加 0.1克石墨化碳),振荡 30 s离心,上清液置氮吹仪上在 60℃浓缩后定容至 1 mL,进样。用谱库检索进行定性(结果见图1),用内标法进样定量。

图1 去痛片中四种主要药物的总离子流色谱图

2 结果与讨论

2.1 线性关系的测定

分别取非那西丁、氨基比林、咖啡因和苯巴比妥的标准液 ,均配制成浓度为 2、4、6、8、10 ug/m L的工作曲线测定液,按上述实验条件进行测定,以药物与内标物的峰面积比为纵坐标,药物浓度为横坐标进行线性回归,结果四种药物的浓度与其对应的峰面积比均呈良好的线性关系,其相关系数(r)分别为:0.9972、0.993 0、0.995 6和 0.991 3。

2.2 内标物回收率的测定

取空白血样 5 mL,加入 1mg/mL的内标物 10 uL,按上述实验方法进行提取。用自动进样器分别抽取空白血样添加内标物的提取液及用等量内标物配制的标准液,各进样三次,按下式计算:

结果内标物回收率三次测定的平均值为82.58%。

2.3 检测限的测定

取空白血样 5m L,添加 10 ug的氨基比林,按上述实验条件提取净化后定容至 10mL,在全扫描模式下进样 1 uL,以 3倍信噪比计算,氨基比林的检出限为 0.21 ng。

3 结语

基质分散固相萃取是近年来国际上新兴的一种快速高效的多残留检测前处理技术,该技术不仅能有效地消除基质干扰,进一步提高检测的准确度和灵敏度,而且摒弃了药物提取时需调节样品酸度的繁琐,使不同极性的药物提取、净化一次完成,避免了药物的漏检,提高了分析速度、减少了试剂用量。因此,该方法对药物盲测检验不失为一种简便、快捷的理想方法。

[1] 龙焜,李万亥.临床药物手册(修订版)[M].北京:金盾出版社,2002:529-530.

[2] 陈顺纶.中国商品大辞典(药品分册)[M].北京;中国商业出版社,1992:147-148.

[3] 王皓玉,曹洁.血中去痛片有效成分的分析[J].山西医科大学学报,2007,38(6):518-522.

[4] 范红梅,李凌云.去痛片的薄层色谱鉴别[J].中国药师,2003,6(4):252.