乳腺基底细胞样癌的病理形态及免疫表型特点

牛春波,崔亚南,陈桂秋,王雪梅,王丽萍

(吉林大学中日联谊医院病理科,吉林长春130021)

乳腺癌是一种高度异质性的疾病,不同类型的乳腺癌在组织形态、生物学行为、治疗效果以及预后等方面都存在着很大的差异。2000年Perou等[1]率先应用基因芯片技术开始了乳腺癌的基因表型研究,至目前[2]将乳腺癌分为五种基因亚型:腔A型(Luminal A):ER阳性,HER-2阴性;腔B型(Luminal B):ER和HER-2均阳性;HER-2过表达型(HER2 overexpressing):ER阴性,HER-2阳性;基底细胞样型(basal like):ER和HER-2阴性,基底细胞相关基因阳性;正常乳腺样型(normal breast like):ER、HER-2以及基底细胞相关基因均阴性。前三种类型大多能够通过雌孕激素受体和HER-2蛋白表达分类,而后两种由于雌孕激素和HER-2蛋白表达均阴性仍难于鉴别和诊断[3],因此BLBC的病理形态特征和免疫表型特点国内外均未完全形成一致的判定标准,成为目前乳腺癌研究领域的热点之一。本研究通过分析乳腺基底细胞样癌的病理形态特征和免疫表型特点,探讨乳腺基底细胞样癌多种相关蛋白表达在其病理诊断中的作用。

1 材料与方法

1.1材料

选择吉林大学中日联谊医院 2009年 4月-2010年3月乳腺癌手术标本,标本均为10%中性福尔马林液固定,常规石蜡包埋。检测ER、PR及HER-2三阴者35例标本 CK5/6、CK14、Vimentin、P53及EGFR蛋白表达,选择CK5/6或CK14和/或EGFR阳性表达(BLBC)者16例以及ER阳性HER-2阴性(管腔A型)20例进行观察:根据Elston和Ellis法进行乳腺癌组织学分级及细胞核分级,并观察癌组织排列结构、细胞形态、坏死、间质纤维化及淋巴细胞浸润、淋巴结转移等指标。

1.2方法

蛋白表达检测及结果判定:应用免疫组化SP法检测16例乳腺基底细胞样癌各相关蛋白表达,ER、PR 、HER-2、CK5/6 、CK14、Vimentin、P53及 EGFR 均为即用型抗体,购自福州迈新生物技术开发有限公司,按试剂盒说明书步骤进行染色。用PBS代替一抗作阴性对照,用已知阳性组织作为阳性对照。ER、PR和P53均为细胞核阳性,CK14为细胞浆阳性,HER-2、CK5/6、EGFR和Vimentin为细胞膜阳性。

1.3统计学分析采用SPSS1010软件进行统计分析,组间比较用 χ2检验。

2 结果

2.1乳腺基底细胞样癌的病理形态特征16例BLBC13例为浸润性导管癌Ⅲ级,3例为浸润性导管癌Ⅱ级,其中1例局部伴磷化;核分级Ⅲ级15例,Ⅱ级1例;肿瘤细胞膜不清晰,细胞质少,核呈圆形或卵圆形,异型性大,核浆比例高,核分裂象和细胞凋亡多见;瘤细胞排列呈实性巢状、片块状及缎带状结构;肿瘤周边推挤式生长14例,浸润性生长2例;16例均有不同程度的灶状及片状坏死,其中灶状坏死7例,片状坏死9例;15例见淋巴细胞浸润及10例间质纤维化;淋巴结转移7例,无转移9例。与20例管腔A型乳腺癌形态特征对比分析(表1),结果发现两种类型的乳腺癌在组织学分级、细胞核分级、生长方式以及片状坏死方面存在显著差异(P＜0.001)。

表1 BLBCs与腔A型乳腺癌的形态学特征

2.2乳腺基底细胞样癌的免疫表型16例乳腺基底细胞样癌ER、RP及HER-2均阴性,CK5/6阳性13例,阴性 3例;CK14阳性5例,阴性11例;EGFR阳性9例,阴性7例;P53阳性阳性12例,阴性4例;Vimentin阳性14例,阴性2例(表2)。结合形态学分析结果,CK5/6与CK14联合应用能够用于乳腺基底细胞样癌的病理诊断。乳腺基底细胞样癌常有EGFR、P53和Vimentin阳性表达。

表2 BLBCs与腔A型乳腺癌的免疫表型特征(n=16例)

3 讨论

乳腺基底细胞样癌(basal-Iike breast Carcinoma,BLBC)是近年通过基因分型新认识的一类乳腺癌,具有独特的病理特征和生物学行为以及明显的不良预后[4]。正常乳腺腺管系统主要由腺上皮细胞和肌上皮细胞构成,以往研究认为乳腺癌主要起源于腺上皮细胞,并一直根据受体和癌基因的蛋白表型指导治疗和分析预后。直至2000年Perou等[1]率先应用基因芯片技术进行了乳腺癌的基因表型研究,他们检测了42例乳腺癌的65份标本,筛选出由若干基因构成的乳腺癌“内在基因群”,并结合患者的预后采用聚类分析法将乳腺癌分为4种不同分子亚型。其后经过近几年基因分型研究补充[5-7],完善为目前国内外公认的5种基因亚型:腔A型、腔B型、HER2过表达型、正常乳腺样型及基底细胞样型。为了使基因分型广泛应用,开始了蛋白表达的替代诊断研究[8],其中基底细胞样乳腺癌的蛋白替代诊断最为复杂[9]。正常乳腺腺上皮表达腺上皮型细胞角蛋白CK7、CK8、CK18和CK19等,而肌上皮细胞主要表达基底细胞型角蛋白 CK5/6、CK14和CK17,此外尚有 SMA、CD10、vimentin 及 p63,不表达腺上皮型角蛋白。目前蛋白表达替代基因型诊断的研究发现,乳腺基底细胞样癌大多表达CK5/6、CK14和vimentin,很少表达CK17和其它肌上皮标记物SMA、p63及CD10,又由于vimentin对判断基底细胞来源无特异性,因此CK5/6和/或CK14阳性表达可能成为其病理诊断的标准。

本研究以CK5/6和/或CK14阳性为诊断标准,选择了16例乳腺基底细胞样癌,通过观察其病理形态特点,发现乳腺基底细胞样癌大多为浸润性导管癌Ⅲ级,MBNG多为Ⅲ级;肿瘤周边推挤式生长,有不同程度的片状坏死及淋巴细胞浸润;瘤细胞排列呈实性巢状、片块状及缎带状结构,肿瘤细胞膜不清晰,细胞质少,核呈圆形或卵圆形,异型性大,核浆比例高,核分裂象多见,以上形态特点与文献报道一致,表明CK5/6和/或CK14阳性可以用于乳腺基底细胞样癌的病理诊断。同时发现乳腺基底细胞样癌多数表达Vimentin和P53,也可表达EGFR,可作为病理诊断的参考指标。P53基因突变是人类乳腺癌最常见的抑癌基因突变,目前研究报道有25%-45%的乳腺癌发生P53基因突变,且其突变与乳腺癌的发生发展及预后密切相关[10-11]。本研究显示乳腺基底细胞样癌P53突变表达率为75%,显著高于普通类型乳腺癌,可作为诊断基底细胞型乳腺癌的参考指标,同时是其预后不良的标志。

乳腺基底细胞样癌雌孕激素受体及HER-2均阴性,抗雌孕激素及抗HER-2治疗均无效,有研究认为其化疗反应好于其他类型乳腺癌,但其总体预后仍比其它类型乳腺癌差。乳腺基底细胞样癌做为一种独立的乳腺导管癌亚型,正在被逐步认识和深入研究,分析其独特的病理形态特征和免疫组化特点,是乳腺基底细胞样癌诊断治疗和分析预后的依据。

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