泌尿系感染大肠埃希菌的耐药分析

斗 章,张吉生,李雅江,李慧玲,王芳,孙玉鸿,张晓丽

(佳木斯大学临床医学院检验系,黑龙江佳木斯154002)

大肠埃希菌(E.coli)是泌尿感染最常见的细菌[1],随着抗生素的广泛使用,特别是广谱抗生素的滥用,使得临床上越来越多的菌株出现了耐药的现象。近年来产ESBLs的大肠埃希菌越来越多,为了更好的了解我院泌尿系大肠埃希菌感染的耐药情况,本研究对我院尿液标本中分离的大肠埃希菌株进行了药物敏感性试验分析,旨在为临床的合理用药提供参考。

1 材料与方法

1.1菌株来源2008年5月-2009年10月本院门诊及住院患者有怀疑尿路感染者分离132株大肠埃希菌。

1.2细菌鉴定与药敏试验MicroScan Walkway40全自动微生物分析仪及配套复合板进行鉴定及药敏试验,并同时进行产ESBLs菌的初筛试验。抗菌药物敏感试验按照美国国家临床实验室标准化委员会2008年版的标准判断结果。经过头孢泊肟等三代头孢菌素初筛试验后,再采用双纸片协同试验进行确证。

1.3超广谱β-内酰胺酶确证试验对药敏实验测定结果报告为产或疑产超广谱β-内酰胺酶的菌株,参照2006年美国临床实验室标准化研究所文件M100-S16推荐的纸片确证扩散法标准进行,采用头孢噻肟、头孢噻肟/克拉维酸、头孢他啶、头孢他啶/克拉维酸纸片检测,两组中任何一种药物加克拉维酸的抑菌圈直径与不加克拉维酸的抑菌圈直径相比,差值≥5 mm时,即为超广谱β-内酰胺酶阳性的菌株。ESBLs阴性质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922,阳性质控菌株为肺炎克雷伯菌ATCC700603(卫生部临检中心)。所用药敏纸片和培养基均购自英国Oxoid公司。

1.4统计方法用世界卫生组织细菌耐药性监测网提供的WHONET 5.3软件进行数据统计分析。

2 结果

在分离的132株大肠埃希菌中,得到产ESBLs大肠埃希菌27株(占20.4%);药敏结果显示,产ESBLs大肠埃希菌与不产ESBLs大肠埃希菌对碳青霉烯类药物(亚胺培南)和阿米卡星的耐药率较低,结果见表。

表 产ESBLs大肠埃希菌和非产ESBLs大埃希菌的耐药结果

3 讨论

大肠埃希菌常引起泌尿系统原发和继发性感染。近年来随着广谱和超广谱抗生素的大量应用及现代诊疗技术的广泛使用,E.coli的感染不断增多,再加上抗生素的滥用现象比较严重,导致ESBLs菌株不断增加,耐药情况日趋严重。大肠埃希菌的耐药主要与产生 β-内酰胺酶、ESBLs、头孢菌素 I型(AmPC)酶和膜通透性有关。由于临床各科用药习惯不同,大量使用β-内酰胺类抗生素可形成选择压力,增加了产酶菌株的检出。

药敏试验结果表明,大肠埃希菌对氨苄西林、头孢唑啉、环丙沙星、哌拉西林、复方新诺明的耐药率高于60%,可见大肠埃希菌对青霉素类抗菌药物耐药率最高,与相关报道一致[2]。对含酶抑制剂哌拉西林/他唑巴坦、替卡西林/棒酸、氨苄西林舒巴坦、阿米卡星耐药率较低。碳青酶烯类的亚胺培南是所测定抗菌药物中作用最强的抗菌药物。临床经验用药应该谨慎,需根据药敏试验结果加以合理选用。

非产ESBLs大肠埃希菌对氨苄西林和头孢唑林的耐药率高达90.2%和50.9%,提示在临床经验用药中,治疗非产ESBLs大肠埃希菌引起的感染,不宜选用青霉素类和第一、二代头孢菌素类。非产ESBLs大肠埃希菌株对碳青酶烯类亚胺培南和第三代头孢菌素头孢噻肟、头孢他啶的耐药率均很低(27.6%、21.9%)。因此,对于非产ESBLs大肠埃希菌的感染,临床可以考虑首选第三代头孢菌素进行抗菌治疗,同时临床上以加强此类菌株耐药性检测和监测工作。阿米卡星虽然敏感性相对较高,耐药率为9.52%,但由于其具有肾毒性、耳毒性,应慎重选用。氟喹诺酮类药物在肾脏和前列腺中药物浓度高,曾被广泛应用于治疗尿路感染,但近年来发现大肠埃希菌对氟喹诺酮类药物耐药性迅速上升,存在明显交叉耐药性,经验用药时不宜首选[3]。

ESBLs是由质粒或染色体介导的能裂解大多数青霉素、头孢菌素和氨曲南的β-内酰胺酶,主要见于大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌。ESBLs菌除了对β-内酰胺类抗生素固有耐药外,还对其他如氨基糖甙类和喹诺酮类等抗生素也呈多重耐药,成为目前临床用药的关键问题[4-5]。随着头孢菌素类药物在尿路感染治疗中的广泛应用,近年来耐药率呈增长趋势,并导致多药耐药的肠杆菌科细菌的出现。我们的结果显示产酶大肠埃希菌对第3代头孢菌素中的头孢噻肟、头孢他啶、头孢曲松耐药率(41.9%、31.8%、53.8%)低于第1、2代头孢菌素,但有研究发现体内药敏结果并不好[6],临床应加以考虑。根据CLSI提示,产ESBLs菌株应避免使用青霉素、头孢菌素类和氨曲南类药物。我们的研究显示,大肠埃希菌产ESBLs率为20.4%,这可能与本院大量使用头孢类药物有关,产ESBLs菌对某些抗菌药物的耐药性比非产ESBLs菌株明显增高(P＜0.05)。碳青霉烯类抗生素对ESBLs高度稳定,体外及体内均有良好抗菌活性,发生耐药的几率较小,疗效较好,并且对已产生交叉耐药的多重耐药菌株有强大抗菌作用[7],我们的结果显示所有产ESBLs菌株对亚胺培南敏感。同时酶抑制剂复合物的药敏结果显示,β-内酰胺抗菌药物与β-内酰胺酶抑制剂的联用增强了前者的抗菌活性,如哌拉西林耐药率100%,而哌拉西林/他唑巴坦耐药仅为29.63%,相关报道也显示含酶抑制剂较好的疗效[8],可见当临床实验室报告产酶阳性,应首选酶抑制复合物或碳青霉烯类抗生素。

总之,加强细菌耐药监测工作,将会对指导临床合理用药、减少耐药菌的耐药性和及时有效地控制泌尿系统感染具有极为重要的意义。

[1]陈 刚,蒋冬香,王玉春.大肠埃希菌的临床分布及其耐药性分析[J].中华医院感染学杂志[J].2009,19(5):586.

[2]李 蓉,李文林,石小玉,等.医院分离致病菌的临床分布和耐药性监测[J].中山大学学报(医学科学版),2007,28(3):353.

[3]胡素侠.48株尿路感染大肠埃希菌的药敏试验分析[J].检验医学与临床,2009,6(22):1895.

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[6]NCCLS.Performance for antimicrobial susceptibility testing[S].Ninth infor mational supplement[J].NCCLS,2003,1.

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