光合细菌对畜禽粪便中三种成分物质的降解作用
2010-06-07唐湘华徐国良黄遵锡
金 梅 唐湘华 刘 磊 徐国良 黄遵锡
畜禽粪便是有机肥料的重要组成部分,是我国自古以来就普遍施用的一类有机肥料。但随着我国畜禽养殖业朝着规模化、集约化、现代化的方向快速发展,畜禽的粪便和污水排放量急剧增加,大量的粪便污水和恶臭有毒有害污染物集中在有限的土地上,这些污染物对生态环境造成了严重的损害。畜禽粪便是由碳、氢、氧、氮等元素组成的,畜禽粪的氮素主要以低分子的氨态氮的形式挥发,除了产生氨氮化合物外,还会产生硫化氢、甲硫醇、硫化甲醇、二硫化甲醇等,是形成恶臭的主要成分,会对空气造成污染;粪便中的磷会造成土壤板结或进入水体使水体发生富营养化,所以畜禽粪便中氨态氮、磷、硫化物的污染是最主要的问题。
光合细菌(photosynthetic bacteria,PSB)是一种微生物类饲料添加剂,在以往研究中发现,光合细菌添加入饲料后,畜禽粪便产生的臭味会有所下降。但光合细菌进入畜禽体内后,在消化道内及排出体外的粪便中对氮、磷、硫等成分有何具体作用并未见详细报道。由于光合细菌在不同的自然条件下,具有固氮、脱氢、固碳、氧化硫化物等多种功能,而且饲料中添加光合细菌具有明显提高增重、提高机体免疫力、拮抗病原菌等作用。本试验旨在筛选出既能够提高动物生产性能和宿主免疫功能,又能有效降低畜禽粪便污染的光合细菌。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 菌种来源
本实验室保存紫色非硫细菌。
1.1.2 培养基(液态)
MgCl20.8 g,NaCl 0.8 g,NH4Cl 1 g,KH2PO40.2 g,NaHCO30.4 g,YE 4 g,丁二酸钠 5 g,水 1000 ml,pH=7.0。
1.1.3 主要使用仪器
GDYS-101M多参数水质分析仪及配套试剂(长春吉大小天鹅仪器有限公司)。
1.2 研究方法
1.2.1 菌株筛选
对本试验室保存的紫色非硫细菌进行活化培养,并进行硫化物耐受性试验,挑选生长旺盛、对硫化物耐受性好的10株菌进行试验。
1.2.2 测定项目
1.2.2.1 测定菌株对氨氮的降解情况
(1)配制培养基,分装于15×150的小试管内,每管9 ml,灭菌;测定空白培养基中的氨氮含量。
(2)分别在试管中按10%的接种量接入不同菌种,橡皮塞密封,放入30℃光照条件下培养,接种后第2 d开始每天取样测定其中氨氮含量变化,连续测5 d。
1.2.2.2 测定菌株对磷的降解情况
步骤同上,但测定的是培养基中总磷含量变化。
1.2.2.3 测定菌株对硫化物的降解情况
(1)配制浓度为2 g/l的Na2S溶液(无菌水中加入Na2S)作为培养液,测定空白培养液中硫化物含量。
(2)将溶液分装于15×150的灭菌小试管中,每管9 ml,按10%的接种量接入菌种,橡皮塞密封。(以上步骤无菌操作)
(3)放入30℃光照条件下培养,接种后第2 d开始每天取样测定其中硫化物含量变化,连续测5 d。
1.2.2.4 空白对照
为防止培养基中物质因自然降解的因素影响实验结果,以上各项都保留2管没有接种的空白培养基对照管,在同样密封、30℃光照条件下放置,5 d后测定其中氨态氮、磷、硫化物含量。
2 结果与分析
2.1 菌株对氨态氮的降解情况
畜禽粪的氮素主要以低分子的氨态氮的形式挥发,主要有氨、三甲胺、二甲胺、一甲胺等,是形成恶臭的主要成分,如果能迅速有效地将粪便中的氨态氮利用,则能有效减少恶臭的发生。试验中观察到,10株菌对氨态氮的降解能力不同(见表1),其中Z12、C1两株菌的降解程度最高,分别为49%和46.2%。
表1 培养过程中培养基氨氮浓度的变化(mg/l)
2.2 菌株对磷的降解情况
畜禽粪便中,磷主要是对土壤和水体造成污染。磷在土壤中的移动性较差,容易在土壤中累积,磷、铜等吸附在土壤表面,与土壤中的钙、铜、铝等元素结合生成不溶性的复合物,造成土壤板结,使土壤的通透性降低,危害植物;畜禽粪尿中的一部分磷通过物理的、化学的、生物的反应过程,随地表径流流入江河湖泊,使水体发生富营养化。试验中发现,不同菌株对培养基中的磷都能加以利用,从而使磷的浓度降低(见表2),其中Z15和Z6的降解效果显著,达到了94.3%和89.8%。
表2 培养过程中培养基总磷浓度的变化(mg/l)
2.3 菌株对硫化物的降解情况
畜禽粪在贮存过程中除了排放氨氮化合物外,还会产生排放硫化氢、甲硫醇、硫化甲醇、二硫化甲醇恶臭物质,如果能有效减少粪便中硫化物的含量,则能有效减少恶臭的产生。在试验中发现,菌株对培养液中的硫化物有很好的降解作用(见表3),其中Z15和Y3的效果最好,降解率达到94.3%和70.1%。
表3 培养过程中培养基硫化物浓度的变化(mg/l)
2.4 空白对照测定结果
氨态氮含量5 d后测定结果为338 mg/l,总磷含量5 d后测定结果为425 mg/l,硫化物含量5 d后测定结果为144 mg/l。
3 讨论
2003年我国畜禽粪便产生量约为31.90亿t,畜禽粪便中的总氮量为1394.60万t,总磷量为378.50万t。畜禽粪便的产生量已经超过工业固体废物,成为环境污染的主要来源。试验中可以看出,光合细菌对氨态氮、磷、硫化物有较好的降解作用。筛选出几株有较强降解作用的光合细菌,进一步研究将其组合试验后作为饲料添加剂使用,对提高畜禽养殖成效、降低畜禽粪便的处理成本、解决畜禽养殖的环境污染问题等方面具有很好的应用前景。
4 小结
4.1 从空白对照管测定结果来看,培养基中三种物质在密封、30℃光照条件下放置5 d后含量略有下降,但对测定结果无明显影响。
4.2 10株菌对氨态氮、磷、硫化物都有降解作用,其中Z15对总磷和硫化物的降解效果最好,Z12、C1、Z6、Y3对氨态氮、磷、硫化物有较好降解作用。
10篇,刊略,需者可函索)