黄芪多糖对早期断奶仔猪血清中SOD、MDA及NO的影响

张 飞 许静波 沈国顺

黄芪多糖(Astragalus polysaccharide，APS)是黄芪的主要活性成分之一，其具有调节免疫、抗病毒、抗肿瘤、抗衰老、抗氧化、抗辐射和抗应激等作用，在临床上已经用于治疗肝炎、肿瘤等疾病。研究表明黄芪多糖抗氧化和衰老作用的机制可能与其提高机体免疫功能，清除自由基及抗脂质过氧化有关。正常机体内自由基的产生和清除保持着动态平衡，超氧化物歧化酶(SOD)是机体重要的抗氧化系统成员之一，能清除超氧阴离子自由基(AOR)，保护细胞免受损伤，检测SOD的活性和脂质过氧化物丙二醛(MDA)的含量反映了机体清除自由基的能力及细胞受损的严重程度。一氧化氮（NO）是由机体内多种细胞产生的一种多功能介质，作为内源性舒张因子及神经递质参与免疫防御，也参与炎症和免疫介导的组织损伤。本试验以20日龄断奶仔猪为研究对象，探讨黄芪多糖对早期断奶仔猪抗氧化性能的影响，为进一步研究黄芪多糖的免疫机制提供相关参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

杜×长×大三元杂交仔猪由沈阳农业大学实验种猪场提供；黄芪多糖注射液由哈尔滨市高升兽药厂提供（生产批号20080720），黄芪多糖含量为10 mg/ml。

1.2 试验方法

1.2.1 试验分组

选择三窝胎次相近、体重相近的杜×长×大三元杂交仔猪24头，20日龄断乳，随机分为4组：对照组、试验组1、试验组2、试验组3。各组仔猪在20日龄、35日龄时分别给药一次，每次连续给药3 d，试验组1每头仔猪肌肉注射黄芪多糖2 ml；试验组2每头仔猪肌肉注射黄芪多糖4 ml；试验组3每头仔猪肌肉注射黄芪多糖6 ml；对照组每头仔猪肌肉注射生理盐水2 ml。在仔猪20日龄、35日龄、50日龄时，从仔猪前腔颈静脉窦各采血一次，分离血清，进行生化指标检测。

1.2.2 测定指标

血清中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）测定采用南京建成生物工程研究所生产的试剂盒（批号20080520）。

1.3 数据处理

所有数据采用SPSS11.5软件进行方差分析，多重比较用邓肯式法。P＜0.05时确定为差异显著。所有数据均以“平均值±标准误”表示。

2 试验结果与分析

2.1 黄芪多糖对早期断奶仔猪血清中SOD含量的影响（见表1）

表1 黄芪多糖对早期断奶仔猪血清中SOD含量的影响(IU/ml)

由表1可知，早期断奶仔猪血清中SOD含量在35日龄时，试验2组显著高于对照组（P＜0.05），其他各组差异不显著（P＞0.05）；50日龄时，试验2组显著高于对照组和试验3组（P＜0.05），其他各组差异不显著（P＞0.05）。在 35～50日龄用药期间，各试验组，以试验2组最高，对照组最低。

2.2 黄芪多糖对早期断奶仔猪血清中MDA含量的影响（见表2）

表2 黄芪多糖对早期断奶仔猪血清中MDA含量的影响(nmol/ml)

由表2可知，35日龄时，早期断奶仔猪血清中MDA含量对照组极显著高于试验组（P＜0.05），各试验组间差异不显著（P＞0.05）；50日龄时，对照组显著高于试验2组和试验3组（P＜0.05），试验1组显著高于试验2组和试验3组（P＜0.05），对照组与试验1组差异不显著（P＞0.05）。

2.3 黄芪多糖对早期断奶仔猪血清中NO含量的影响（见表3）

表3 黄芪多糖对早期断奶仔猪血清中NO含量的影响(μmol/l)

由表3可知，35日龄时，早期断奶仔猪血清中NO含量对照组显著高于试验1组和试验2组（P＜0.05），各试验组，以试验2组最低，试验3组最高，差异不显著（P＞0.05）；50日龄时，各组间差异均不显著（P＞0.05）。

3 讨论

动物机体在新陈代谢的过程中，活性氧自由基(O2-)的产生和消除保持着一种动态平衡，O2-的消除主要依赖于机体完整的抗氧化防御系统的预防性或阻断性控制。SOD对机体的氧化与抗氧化平衡起着至关重要的作用，他能清除超氧阴离子(O2-)，保护细胞免受损伤，其活性的高低间接反映机体清除自由基的能力，MDA是脂质过氧化作用的终产物，其含量的高低间接反映机体受氧自由基攻击的严重程度。

本研究中各试验组断奶仔猪血清中SOD含量均高于对照组，其中35～50日龄期间试验2组最高；35日龄试验组断奶仔猪血清中MDA含量显著低于对照组（P＜0.05）；50日龄，试验 2、3组显著低于对照组和试验1组。这表明黄芪多糖能够提高机体SOD活性，增强机体清除自由基的能力，减少过氧化作用的发生，增强机体的抗氧化能力。

近年来，NO作为机体细胞功能的信使分子和效应分子被人们所接受，但在机体内过量生成的NO却有明显的细胞毒性。许多试验结果证实，炎症期致炎因子刺激诱导型NO合酶(iNOS)，合成大量的NO，促进炎症反应。当NO浓度过高时，一方面抑制细胞线粒体呼吸机能，进而抑制细胞内ATP和DNA的合成，导致细胞死亡。另一方面，NO极易与氧、超氧阴离子、过氧化氢反应生成NO3-和 NO2-，其中 NO3-在生理pH值时产生较强的细胞毒性和氧化性，NO3-质子化迅速分解成具有高反应性的羟自由基，诱发生物膜的多种不饱和脂肪酸的脂质过氧化作用，造成细胞损伤。另外，NO在免疫反应中有着十分广泛而复杂的作用。它通过非特异性杀伤细菌、真菌及寄生虫和瘤细胞而增强非特异性免疫功能，但NO对特异性免疫功能的影响则较为复杂，一般认为NO的产生常伴有免疫功能的抑制，表现为淋巴细胞有丝分裂减低，淋巴细胞增殖缓慢，抗体产生及多种淋巴因子的分泌受抑制等。适度的NO合酶(NOS)表达有助于宿主抗感染及抗肿瘤，并在免疫反应中起微妙的调节作用，但NOS的过度表达致NO产生过量时往往促发免疫病理过程而造成组织损伤。NO的这种非特异性毒性作用直接引起广泛性组织损伤，器官功能障碍，特异性免疫功能低下，增加机体易感性，使病情不但不能缓解，反而体况更加恶化。NO生成过多成为许多疾病的重要促进因素。

本研究中，早期断奶应激、环境应激及饲料变化等可能引起仔猪体内NO合酶(NOS)表达，从而使血清中NO含量升高。35日龄时，各试验组断奶仔猪血清中NO含量均低于对照组，试验2组最低（P＜0.05）。这说明黄芪多糖能有效恢复血清中NO的含量，防止脂质过氧化作用的发生，保护机体组织不受损伤。

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