复方鹿花盘胶囊对乳腺增生小鼠子宫、卵巢重量影响及作用机制的研究

赵文静，赵向上，旺建伟，刚宏林，姜虹，王艳宏，张晓琳

(1.黑龙江中医药大学，黑龙江 哈尔滨 150040;2.哈尔滨市第二医院，黑龙江 哈尔滨 150056;3.哈尔滨市食品药品监督管理局，黑龙江 哈尔滨 150028)

乳腺增生病(Hyperplasia of Mammary Gland，HMG)又称乳腺结构不良，是女性常见、多发疾病，病变是以乳腺固有组织增生为主的非炎症性、非肿瘤性病变，主要包括乳腺囊性增生病、小叶增生、腺病、纤维性病［1］。近年来其癌变率有逐年升高的趋势。子宫、卵巢是调节性激素的重要器官，它们重量的轻微变化会影响性激素对乳房刺激的敏感性及持续的时间，而FSH含量的变化是子宫、卵巢的功能正常与否的客观指标。鹿花盘是梅花鹿 (Cerrus nippon Temminck)每年春季长新茸时自然脱落的部分，《神农本草经》认为，该品有温补肝肾、活血消肿之功效，能治疗阴证疮疡，乳痈初起，瘀血肿痛等疾患［2］。本实验应用鹿花盘与其他中药配伍，制成复方鹿花盘胶囊，观察其对乳腺增生小鼠子宫、卵巢重量及重量指数和对FSH含量的影响，进而判断乳腺增生的疗效及预后。

1 实验材料

1.1 药材及制剂

中药鹿花盘取材于黑龙江省禄宝益生鹿业开发有限公司，柴胡、白芍、三棱、莪术、浙贝母、淫羊藿等中药由黑龙江中医药大学附属第一医院提供。复方鹿花盘胶囊浓缩后用蒸馏水配制成浓度分别为217g·L－1、434g·L－1、868g·L－1的低、中、高三种溶液备用。

1.2 实验动物

清洁级昆明种小白鼠，体重18～22g，雌性，由黑龙江中医药大学实验动物中心提供，动物合格证号:黑动字第09－2－2号。

1.3 药品及试剂

苯甲酸雌二醇注射液(Estradiol Benzoate Injection，上海通用药业股份有限公司);促卵泡生成素(FSH)放免试剂盒(北京市福瑞生物工程公司);他莫昔芬(Tamoxifen，上海华联制药有限公司)。

1.4 实验仪器

电子天平(梅特勒－托利多仪器(上海)有限公司);低速离心机(科大创新股份有限公司中佳分公司)。

2 实验方法

2.1 模型制备、分组与灌胃剂量

实验前禁食不禁水16h，空白对照组10只常规饲养，不施加任何药物，其他小鼠在同等条件下，腹腔注射苯甲酸雌二醇，每2日1次，每次0.5mg·kg－1，共注射15次，在注射苯甲酸雌二醇后第4d小白鼠均出现不同程度的乳腺隆起外观。取模型制备成功小鼠，按体重随机分模型组、他莫昔芬组、鹿低剂量组、鹿中剂量组、鹿高剂量组五组，每组各10只。于造模第5d开始分别用药灌胃治疗，空白对照组不用任何药物，模型组生理盐水 15mL·kg－1，他莫昔芬组3.9mg·kg－1，复方鹿花盘胶囊低、中、高剂量组分别是3.25、6.5、13g·kg－1，连续灌胃 30d［3］。

2.2 标本取材

连续灌胃30d后，分离子宫、卵巢，剔除周围的脂肪组织等，迅速称重，测定子宫、卵巢指数［4，5］。

将各组小鼠称重后摘除眼球各取血3mL，室温静置2h后于3000r·min－1离心3min，吸取上部取血清，－20℃保存待测。依照试剂盒说明进行。采用放免分析法测定血清中FSH的含量［6］。

2.3 统计学处理

采用SPSS 12.0软件，实验结果数据采用平均值±标准差(±s)表示，组间差异显著性用t检验比较。

3 结果

3.1 复方鹿花盘胶囊对乳腺增生小鼠FSH含量的影响

实验结果如表1所示，他莫昔芬、鹿中、高剂量组均能升高模型组FSH含量，且有非常显著性差异(P<0.01)，鹿低剂量组与模型组无统计学意义，且鹿花盘三剂量组彼此无显著性差别。结果见表1。

表1 复方鹿花盘胶囊对乳腺增生小鼠FSH含量的影响(±s)

表1 复方鹿花盘胶囊对乳腺增生小鼠FSH含量的影响(±s)

注:与模型组相比较，**P<0.01;与空白对照组比较，▲▲P<0.01。

3.48±0.29模型组 15mL 2.57±0.31▲▲他莫昔芬组 3.9mg 3.37±0.22**鹿低剂量组 3.25 2.90±0.48鹿中剂量组 6.5 3.22±0.35**鹿高剂量组 13 3.36±0.36空白对照组－**

3.2 复方鹿花盘胶囊对乳腺增生小鼠子宫、卵巢的影响

实验结果如表2所示，模型组与空白对照组比较，子宫重量增加，且有显著性差异(P<0.05)，鹿高剂量组能明显降低模型组子宫重量，两组有显著性差异(P<0.05)，并且鹿高剂量组与空白对照组子宫重量实际数据非常接近;同时，西药他莫昔芬组与空白对照组比较，子宫重量低于空白对照组，且有显著性差异(P<0.05)，从实际数据也反映出西药组过度降低乳腺增生小鼠子宫重量(P<0.05)，导致低于正常子宫的重量范围;在对乳腺增生小鼠卵巢方面的影响实验中，鹿低、中、高剂量组与模型组均无显著性差别，在这点上，鹿低、中、高三剂量组均不如西药他莫昔芬组作用更明显。结果见表2。

表2 复方鹿花盘胶囊对乳腺增生小鼠子宫卵巢的影响(±s，n=10)

表2 复方鹿花盘胶囊对乳腺增生小鼠子宫卵巢的影响(±s，n=10)

注:与模型组相比较，*P<0.05，**P<0.01;与空白对照组比较，▲P<0.05。

空白对照组－ 118.51±43.78 0.372±0.119 20.63±7.00 0.067±0.026模型组 15mL 166.39±41.08▲ 0.562±0.127▲ 20.05±8.380 069±0.032他莫昔芬组 3.9mg 78.16±25.55▲** 0.268±0.072▲** 12.62±2.73* 0.044±0.011*鹿低剂量组 3.25 125.94±51.52 0.425±0.180 14.52±5.68 0.049±0.021鹿中剂量组 6.5 161.43±186.35 0.563±0.653 16.34±4.23 0.058±0.014鹿高剂量组 13 118.94±29.26* 0.389±0.090*14.30±6.24 0.047±0.021

4 讨论

乳房为性激素作用的靶器官，其生长发育到衰退均受到下丘脑－垂体－卵巢轴的调控，子宫内膜也受该系统的控制，所以卵巢、子宫、乳房三者在发生乳腺增生病的时候关系最为密切、直接。而子宫、卵巢起着调节和平衡雌、孕激素的重要作用，它们在形态重量上的轻微变化常常会引起女性性激素水平明显的起落，一旦发生乳腺增生病，往往伴有子宫、卵巢在形态学上的异常变化，由此也可以初步推断到其调节内分泌的功能也会有相应的失调;妇女的月经周期基本可分为卵泡期、黄体期，这两个期性激素水平会有其周期性的变化，而FSH含量变化可以影响及反应子宫、卵巢调节性激素的功能，进而间接影响性激素对乳房刺激的强度和持续的时间。

本课题是通过复方鹿花盘胶囊的不同剂量组和西药对照组相比较，来观察该胶囊对实验性乳腺增生小鼠子宫、卵巢重量的变化，结果是鹿高剂量组能明显降低乳腺增生模型组子宫重量，差异性显著，且实际数据接近空白对照组子宫重量，提示该剂量有很好的恢复乳腺增生小鼠子宫形态作用，同时也优于西药组对子宫重量过度降低的作用，而鹿低、中剂量组在这方面与模型组比较没有统计学意义;在对卵巢重量影响方面，鹿三个剂量组弱于西药对照组;在对于FSH含量影响方面，鹿中、高剂量组疗效较显著。

由此可以推断，复方鹿花盘胶囊一定剂量可以直接作用于子宫，恢复实验性乳腺增生小鼠子宫重量，并通过调节FSH含量间接的促进子宫、卵巢功能，加强对下丘脑－垂体－卵巢轴的调控，从而平衡性激素的含量而使乳腺组织受到性激素良性、周期性的合理刺激，最终达到治疗乳腺增生的目的。

［1］蔡国良，王友和.对乳腺增生的再认识［J］.陕西中医学院学报，2002，25(1):24－25.

［2］王振玉.鹿花盘注射液研究［J］.生化药物杂志，1987(2):10－12.

［3］李建国，朱建宙，张玉芝，等.“药味乳康罩”抑制小白鼠乳腺小叶增生病理组织学观察研究［J］.河南中医，1993，13(3):111－112.

［4］张少卓，柳占彪.乳乐宁对小鼠雌激素活性的影响［J］.内蒙古中医药，2004，23(4):41－42.

［5］邹世洁，陈小野，蒋小丽，等.雌激素对大鼠性腺乳腺影响观察［J］.中医药学刊，2006，24(1):52－54.

［6］戴丽军，廖军，黄月玲，等.Fmr1基因敲除小鼠血清雌性激素含量的比较研究［J］.中国比较医学杂志，2006，16(8):459－462.