解脲支原体浓度与精液活动力的相关性研究

陈早庆 张涛 邢发枢

解脲支原体是一种无细胞壁、结构简单的原核微生物。大小0.3～0.5μm，菌落小，直径15～30μm。国内外对支原体感染是否会影响精液质量，以及精液检查支原体阳性者应否抗感染治疗存在截然不同的观点。临床中见有支原体感染，但精液质量正常，且生育没有受到影响的病人。亦可见有病例在支原体杀灭后，精液质量明显改善。我们研究支原体感染浓度与精液活动力是否存在相关性，以指导临床治疗。

1 资料与方法

1.1 临床资料

2008年5月～2010年1月男科门诊育前检查，177例精液培养法解脲支原体阳性的自愿者，年龄22～33岁，平均26岁。外生殖器体检无异常，抗精子抗体阴性。精液淋球菌培养阴性。

1.2 标本采集

手淫取精液，注意无操作。取精后立即接种。

1.3 方法

1.3.1 精液分析 将精液置于37℃孵育10m in，液化后检测精液量、精子密度、存活率、活动力形态等。

1.3.2 PCR法 由中山大学达安基因股分有限公司提供的解脲支原体PCR荧光定量检测试剂盒。

1.3.3 DNA提取 标本处理：取0.1m l精液加入1m l灭菌生理盐水，充分震荡摇匀，吸取全部液体转至1.5m l离心管中，12000rpm离心5m in。去上清，沉淀加灭菌生理盐水1m l混匀，12000rpm离心5m in。去上清，沉淀中加入50μl DNA提取液充分混匀，100℃恒温处理(10±1)m in。12000rpm离心5m in，备用。将阴性质控品、临界阳性质控品、强阳性质控品、阳性定量参考品分别离心备用。

1.3.4 PCR扩增 于PE Gene Am p5700操作。取PCR反应管若干，分别加入处理后的样品上清液2μl，8000rpm离心数秒，放入仪器样品 。反应温度及时间分别为93℃预变性2m in，93℃变性45s，55℃复性60s，10个循环；93℃变性30s，55℃复性45s，30个循环。反应结束后，仪器自动分析标本支原体数值。

2 结果

精液PCR法检测支原体浓度与精液活动力分析见表1。精液活动力具有向前运动的精子(a+b级)＞50%或a级＞25%为正常；小于此值为异常。

两组支原体感染后精子活动力使用x2检验，P＜0.05，有显著性差异。检测结果显示，支原体感染浓度＞105拷贝组，精子活动力正常的仅占8.3%，支原体感染浓度＜105拷贝组，精子活动力正常的占54.3%。随着感染的支原体浓度增高，精子的活动力明显降低。＜103拷贝的病例，精子活动力未见异常。

3 讨论

3.1 支原体感染对精子活动力影响的可能机制

表1 两组精液活动力比较(例)

解脲支原体是泌尿生殖系感染常见的病原体。其可感染副性腺，引起精浆异常；亦可感染睾丸，引起精子形态、发育异常。其对精子的活动力的影响，可通过多方面机制起作用。

支原体性前列腺炎／精囊炎对精子活动力的影响。作为副性腺，前列腺、精囊分泌的前列腺液、精囊液对精子起营养、活化作用。前列腺炎／精囊感染支原体后，前列腺、精囊分泌减少，尤其使精液液化的蛋白水解酶的减少[1]，精子的活动力降低。临床上可表现有尿频、尿急、会阴胀痛、精液量少等。支原体带菌者，由于感染的病原体少，前列腺及精囊的炎症反应轻，前列腺液和精囊液没有改变，精子的活动力没有受到影响。

有研究认为，支原体感染后可吸附在精子头尾部，造成精子膜的结构损伤。精子变得臃肿、形态异常，尾部发生折角卷曲。有些精子发生凝集现象。支原体感染后精子畸形率上升，尖头、大头、双头、无尾等异常形态增多，经洗涤分离后精子与支原体共孵育过夜后，精子运动速度、运动轨迹等参数和精子形态较对照组改变明显，精子膜完整性及功能异常[2]。

3.2 支原体感染浓度与精子的活动力有明显的相关性

我们的研究发现，并非所有的支原体感染会影响精子活动力。当低浓度的支原体感染时(＜105拷贝)，泌尿生殖系症状和体征不明显，精液质量亦没有明显的降低，或降低比例小。＜103拷贝，精液活动力基本无影响，我们称之为支原体带菌者。当浓度达到＞105拷贝时，病人有尿频、尿急、会阴胀等不适，精子的活动力明显降低。我们称之为有意义的支原体感染者。这类感染有较强的致病力。

并非所有的支原体病原学检查阳性，就需要抗生素治疗。对于精液中支原体＞105拷贝，提示为高浓度支原体感染，给予积极、有效的抗感染治疗是必须的；而对于精液支原体浓度＜103拷贝，提示为支原体带菌者，可无需治疗；浓度介于两者之间的病例，若无泌尿生殖系感染症状，精液检查提示质量没有受到影响，亦可无需治疗。在我们研究的病例中，有意义的支原体感染病人，经有效的抗感染治疗后，复查精子的活动力得到明显改善，a+b级精子数占比大部恢复正常。而对于极个别精液活动力低下的支原体带菌者，即使给予足够疗程的抗生素治疗，复查精液活动力亦无进一步改善。

临床工作中，对怀疑有支原体感染者，应常规行支原体PCR浓度测定。严格把握支原体感染的治疗标准，避免滥用抗生素，防止过度治疗，减少耐药菌株的形成。

[1]钱宪明,王益鑫,江峰,等.男性生殖道非特异性感染性不育的精液变化[J].中国男性学杂志,1991,5(3):153.

[2]武蓉珍,金帆,潘永苗.解脲支原体与男性不育之间的关系及其机制[J].国际生殖健康/计划生育杂志,2008,27(4):230-232.