高效液相色谱法测定救尔心胶囊中原儿茶醛含量

付凌燕，李亚荣

(吉林省吉林市食品药品检验所，吉林 吉林 132001)

救尔心胶囊由三七、川芎、红花、丹参、泽泻、刺五加6味中药制成，具有活血通脉、化瘀生新的功效，临床用于治疗冠心病、心绞痛[1]，疗效良好。处方中丹参具有祛瘀止痛、活血通经、清心除烦的作用，原儿茶醛是其主要有效成分，原质量标准中只有化学鉴别和薄层鉴别。为更好地控制制剂质量，笔者采用高效液相色谱法测定了救尔心胶囊中原儿茶醛的含量，现报道如下。

1 仪器与试药

LC－2010 A型高效液相色谱仪，CLASS－VP色谱工作站。原儿茶醛对照品(供含量测定用，批号为110810－200506，中国药品生物制品检定所);救尔心胶囊(吉林百姓堂药业有限公司，批号分别为 20080101，20080503，20080801，规格为 0.45 g/粒);甲醇为色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件与系统适用性试验

色谱柱:Phenomenex C18柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm);流动相:甲醇－1%醋酸溶液(12∶88);检测波长:279 nm;流速:0.8 mL/min;柱温:24℃。理论板数按原儿茶醛峰计应不低于2 000。

2.2 溶液制备

精密称取经五氧化二磷减压干燥12 h以上的原儿茶醛对照品适量，加甲醇制成0.099 9 g/L的对照品贮备液;再精密量取对照品贮备液适量，加甲醇制成9.990 μg/mL的对照品溶液。取装量差异项下的样品内容物约3.5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 mL，密塞，称定质量，加热回流1 h，放冷，再称定质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25 mL，蒸干，残渣用水10 mL溶解，再用稀盐酸调pH至2，乙醚提取4次，每次10 mL，合并乙醚提取液，挥干，残渣用甲醇溶解，转移至10 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液[2]。取处方中除丹参外的其余药材，按1/10处方量依法制成胶囊，再按供试品溶液制备方法制成阴性对照品溶液。

2.3 方法学考察

专属性试验:分别精密吸取供试品溶液、阴性对照品溶液和对照品溶液各10 μL，注入液相色谱仪，记录色谱图(图1)。由图1可见，供试品溶液色谱中，在与对照品溶液色谱相应位置上有相同保留时间的色谱峰，阴性对照品溶液无干扰，表明方法可行。

线性关系考察:精密吸取原儿茶醛对照品贮备液(质量浓度为 0.099 9 g/L)适量各5份，分别置50 mL量瓶中，用甲醇定容，配成质量浓度分别为 1.998，4.995，9.990，14.985，19.980 μg/mL 的溶液，摇匀，用 0.45 μm 微孔滤膜过滤。精密吸取续滤液各10 μL，注入液相色谱仪，测量峰面积。以峰面积(A)为纵坐标、质量浓度(C)为横坐标绘制标准曲线，得原儿茶醛回归方程 A=56 696.40 C － 1 888.48，r=1.000 0(n=5)。结果表明，原儿茶醛质量浓度在 1.998～19.980 μg/mL范围内与峰面积线性关系良好。

图1 高效液相色谱图

精密度试验:精密吸取原儿茶醛对照品溶液(9.990 μg/mL)10 μL，重复进样 5次。结果峰面积的 RSD为0.3%(n=5)，表明仪器精密度较好。

稳定性试验:取同一供试品溶液，于 0，4，8，12，24 h 时分别进样测定。结果的 RSD为0.9%(n=5)，表明供试品溶液在24 h内稳定。

重复性试验:取批号为20080101的样品5份，依法制备供试品溶液并测定。结果原儿茶醛含量的 RSD为0.6%(n=5)，表明方法重复性较好。

加样回收试验:精密称取已知含量的样品(批号为20080101，原儿茶醛含量为8.596μg/mL，平均粒重0.4564 g/粒)适量，共6份，分别精密加入低、中、高3种不同质量浓度的原儿茶醛对照品溶液适量，按供试品溶液制备方法制备溶液，依法测定[3]。结果见表1。

表1 原儿茶醛加样回收试验(n=6)

2.4 样品含量测定

分别精密吸取供试品溶液与对照品溶液各10 μL，注入液相色谱仪，测定3批样品的原儿茶醛峰面积，按外标法计算含量。结果批号为20080101，20080503，20080801的3批样品，平均粒重分别为 0.456 4，0.452 1，0.453 3 g，平均含量分别为 22.49，21.38，20.93 μg/粒(n=5)。

3 讨论

3批样品中原儿茶醛含量测定结果为最高22.49 μg/粒，最低20.93 μg/粒，综合考虑后确定限量为每粒含原儿茶醛不低于15 μg。试验中比较了体积比均为12∶88的流动相，即甲醇－0.2 mol/L醋酸铵(用硫酸调pH至2.2)[4]和甲醇－1%醋酸溶液，结果表明，用甲醇－1%醋酸溶液(12∶88)时，色谱图基线较稳，分离效果较好。

本方法准确、简便，重现性及回收率均理想，可以作为该制剂的质量控制方法。

[1]WS3－B－1629－93，卫生部颁药品标准(中药成方制剂第八册)[S].

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:化学工业出版社，2005:327－328.

[3]王维礼，付 利，程晓英，等.高效液相色谱法测定咽炎片中没食子酸含量[J].中国药业，2008，17(11):30－31.

[4]WS3－B－3766－98，卫生部颁药品标准(中药成方制剂第二十册)[S].