六君子汤对脾虚证大鼠胃肠激素影响的实验研究

张仲林， 臧志和， 钟 玲， 辛志伟， 杨 胜

（成都医学院药学院，四川成都 610083）

六君子汤方出《医学正传》，由人参、白术、茯苓、陈皮、半夏和甘草等六味药组成，具有益气健脾、燥湿化痰之功，六君子汤或其加减方临床主要常用于治疗功能性消化不良［1－2］。本研究采用的六君子汤系根据古方六君子汤药物组成采用现代制剂工艺制备的药液，并根据文献采用饮食控制法复制脾虚证大鼠动物模型，探讨六君子汤对模型大鼠胃肠激素的影响，为临床应用该方治疗脾虚证提供实验基础。

1 材料

1.1 药物 六君子汤，生药含量0.8 g/mL，由成都医学院药物研究所制备，实验批号20090306。六君子丸，由山东步长制药有限公司生产，批准文号:国药准字Z37020873，生产批号20070601。吗丁啉，西安杨森制药有限公司生产，批准文号:国药准字H10910003，生产批号20070728。

1.2 实验动物 SD大鼠40只，♀♂各半，体重（200±20）g。由四川医学科学院动物中心提供，合格证号:SCXK川2008－24，于自然光线、自由饮水摄食条件下适应性喂养1周备用。

1.3 主要试剂及仪器 胃泌素（MTL）放免药盒由北京北方生物技术研究所提供;胃动素（GAS）、血管活性肠肽（VIP）和生长抑素（SS）药盒均由北京科锐生物技术中心提供。小鼠自主活动测试仪，型号ZZ－6，由成都泰盟科技有限公司生产。

2 方法

取SD大鼠50只，随机等分为5组:正常对照组、脾虚模型组、吗丁啉组、六君子丸组和六君子汤组，各组10只。按照文献［3］方法复制大鼠脾虚动物模型，10 d后各组分别灌喂生理盐水、生理盐水、吗叮啉、六君子丸和六君子汤药液10 mL/kg。连续5 d，实验第15天，用电子天平测定每只大鼠24 h摄食量、体重，用小动物活动记录仪测定5 min内自发活动，观察大便性状，逐日记录观察一般状态变化。第16天股静脉采血4 mL，分别置于2只试管中，Ⅰ管2 mL，离心（2 000 r/min）5 min，分离血清，置－20℃冰箱保存，待测血清 GAS;Ⅱ管2 mL，管中加入10%NA－EDTA 30 μL 及抑肽酶30 μL，充分混匀，离心（2 000 r/min）5 min，分离取血浆，置－20℃冰箱保存，待测血浆MTL、VIP、SS。按照药盒规定要求，采用放射免疫法（RIA）测定血清 GAS，血浆 MTL、VIP、SS。结果用SPSS13.0统计软件处理，组间比较用单因素方差分析。

3 结果

3.1 对脾虚大鼠一般状态的影响 脾虚证大鼠于造模后出现竖毛，被毛粗糙无光泽、拱背、自发活动减少、腹胀。随后出现被毛枯槁，倦卧嗜唾、活动明显减少，四肢乏力，腹胀明显，便少而干或便溏，肛周污秽;与正常对照组比较有极显著性差异（P＜0.01，P＜0.00 1）。经六君子汤治疗后，动物以上症状逐渐减退或消失，摄食量增加，大便恢复正常，自发活动与体重均明显增加，与脾虚模型组比较有显著性或极显著性异（P＜0.05，P＜0.01）。结果详见表1、表2。

3.2 六君子丸对脾虚大鼠胃动素（MTL）和胃泌素（GAS）的影响 造模后模型组大鼠血浆MTL和血清GAS含量与正常对照组相比明显下降（P＜0.05），经六君子汤治疗后，大鼠MTL含量有上升的趋势，但与模型组相比无显著意义;大鼠GAS含量明显提高，与模型组相比有显著性差异（P＜0.05）。结果详见表3。

3.3 六君子丸对脾虚大鼠血管活性肠肽（VIP）和生长抑素（SS）的影响 造模后模型组大鼠的VIP含量显著升高，与正常组比较有极显着性差异（P＜0.01），经六君子汤治疗后大鼠的血浆VIP含量显著降低，与模型组比较有极显著性差异（P＜0.01）。SD大鼠造模后，模型组大鼠血浆SS的含量显著降低，与正常组比较有极显著性差异（P＜0.01），经六君子汤治疗后大鼠血浆SS含量显著上升，与模型组比较有显著性差异（P＜0.05）。结果详见表4。

表1 六君子丸对脾虚大鼠摄食量、自发活动、体重的影响（±s，n=10，15 d）

表1 六君子丸对脾虚大鼠摄食量、自发活动、体重的影响（±s，n=10，15 d）

注:与正常对照组比较，△△P＜0.01，△△△P ＜0.001;与脾虚模型组比较，*P＜0.05，**P ＜0.01，***P ＜0.001。

/g正常对照组 等容积组别 剂量/（g/kg） 摄食量/（g/d） 自发活动数/5 min 体重NS 220.11±16.35 320.60±25.14 235.00±29.23脾虚模型组 等容积NS 141.26±25.05△△△ 200.16±32.88△△△ 195.60±18.09△△吗丁啉组 0.02 198.65±17.52*** 261.70±28.03** 266.68±19.87***六君子丸组 6 167.03±9.18** 240.33±45.29* 230.00±37.77*六君子汤组 8 158.14±8.87* 250.55±34.76** 222.53±30.98*

表2 六君子丸对脾虚大鼠大便性状的影响（±s，n=10，15 d）

表2 六君子丸对脾虚大鼠大便性状的影响（±s，n=10，15 d）

注:与正常对照比较，△P＜0.05，△△P＜0.05;与脾虚模型组比较，*P＜0.05。

组别 剂量/（g/kg）造模后 治疗后便常便少而干便溏正常对照组 等容积便常便少而干便溏NS 10 0 0 10 0 0脾虚模型组 等容积NS 1 3 6△△ 2 3 5△吗丁啉组 0.02 0 2 8 9 1 0*六君子丸组 6 0 1 9 5 2 3*六君子汤组 8 0 2 8 6 1 3*

表3 六君子丸对脾虚大鼠胃泌素（GAS）和胃动素（MTL）的影响（±s）

表3 六君子丸对脾虚大鼠胃泌素（GAS）和胃动素（MTL）的影响（±s）

注:与正常对照组比较，△P＜0.05;与模型组比较，*P＜0.05，**P ＜0.01。

组别 动物数/只剂量/（g/kg）GAS/（pg/mL）MTL/（pg/mL）NS 61.06±13.07 382.15±100.44模型对照 10 等容积NS 48.04±12.59△293.57±49.88△吗丁啉组 10 0.02 65.10±9.87**368.65±46.47**六君子丸组 10 6 60.16±7.15* 340.08±40.19六君子汤组 10 8 59.32±8.52* 339.65±29.83正常对照 10 等容积*

表4 六君子丸胶囊对脾虚大鼠血管活性肠肽（VIP）生长抑素（SS）的影响（±s）

表4 六君子丸胶囊对脾虚大鼠血管活性肠肽（VIP）生长抑素（SS）的影响（±s）

注:与正常组比较，△△P＜0.01;与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01。

组别 剂量/（g/kg）动物数/只VIP/（pg/mL）SS/（pg/mL）正常对照组 等容积NS 10 47.02±13.11 105.54±18.02模型对照组 等容积NS 10 73.57±18.02△△ 74.87±18.69△△吗丁啉组 0.02 10 49.75±14.03** 96.58±17.05*六君子丸组 6 10 58.03±9.42* 92.14±11.35*六君子汤组 8 10 54.41±12.25** 95.38±16.19*

4 讨论

脾胃学说从宏观把握脾胃生理病理规律，疏于微观;胃肠激素研究详于微观，偏缺于整体观念，两者结合无疑是互补的、创造性的研究思路［4］。脾虚证是中医脾胃证候中的常见证型，是因素体脾虚或饮食不节、情志因素、劳逸失调等原因引起脾的功能虚衰、不足的病证，以精神疲倦、食后困倦、食欲不振，食后腹胀，大便稀、舌体胖和脉虚弱等为主要临床症状。胃肠激素是由散在分布于消化道的内分泌细胞和肠神经系统神经元所分泌的起激素作用的生物活性多肽，这些肽类物质主要存在于胃肠道中［5］。许多胃肠激素对消化道运动有促进或抑制作用，胃泌素（GAS）主要由胃窦及小肠上部黏膜的G细胞分泌，能强力刺激胃酸、胃蛋白酶的分泌，营养胃黏膜，促胃肠肌收缩，从而促进胃肠运动［6－7］。胃动素（MTL）主要由十二指肠和近端空肠黏膜分泌，是参与调节胃肠运动的兴奋性脑肠肽，引起平滑肌收缩，调解胃肠运动［8］。生长抑素（SS）由肠壁神经丛、胃及胰腺的D细胞分泌，其分泌活动具有明显的旁分泌性质，生理作用主要是对神经传递、腺体分泌、平滑肌收缩等广泛抑制，对胃肠道的运动、吸收及胃酸、胃蛋白酶的分泌等功能具有普遍的抑制作用［9］。VIP具有舒张胃肠括约肌，刺激胰液和肠液分泌，保护肠黏膜，调节胃肠吸收等功能［10］。因此，用 GAS、MTL、SS和 VIP等胃肠激素指标从微观层面揭示脾虚证的相关胃肠运动机制，可以赋予传统中医的“脾虚证”以现代科学含义;并可为中医临床有效治疗脾虚证提供胃肠激素评价指标和依据。

从现代胃肠病学角度看，脾虚证主要表现为胃肠运动减弱，消化功能抑制而出现的系列综合症，应属于胃肠动力不足的功能性消化不良疾病（fuctional dyspepsia，FD）的范畴［11－12］。本实验选用外周多巴胺阻滞剂——吗丁啉作为阳性对照药，该药可使胃肠道上部的蠕动和张力恢复正常，促进胃窦和十二指肠运动，协调幽门收缩，为较好的胃肠动力药，可以很好地针对脾虚证胃肠动力不足的病因病理。实验结果表明，六君子汤能明显改善脾虚模型大鼠的一般状态，显著升高血浆中MTL、SS的含量，明显降低血浆VIP含量，有升高血清GAS的趋势。结果提示，六君子汤具有明显治疗脾虚证的作用，其作用机制可能是通过调节脾虚证胃肠激素水平来实现的。

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