胃癌组织中 CD44 V6、E-钙黏附素的表达变化及意义

魏 民

(濮阳市油田总医院,河南濮阳 457000)

研究发现,微转移可能是造成肿瘤转移的重要原因之一。CD44V6可参与癌细胞与基质的黏附及淋巴细胞归巢,从而有利于癌细胞的扩散与转移。E-钙黏附素(E-cadherin)已被认为在上皮源性恶性肿瘤的转移中起重要作用。2003年 9月 ～2008年12月,我们采用免疫组化法检测了胃癌组织中的CD44V6和 E-cadherin,探讨二者在肿瘤转移过程中的作用。

1 资料与方法

1.1 临床资料 198例胃癌患者,男 128例、女 70例,年龄 23～76岁；TNM分期 Ⅰ期 65例,Ⅱ期 44例,Ⅲ期 55例,Ⅳ期 34例。患者术前均未行放化疗,收集其手术切除癌组织及癌旁正常胃组织。

1.2 方法

1.2.1 CD44V6、E-cadherin检测方法 采用免疫组化 SP法,按试剂盒说明书操作。结果判断:CD44V6、E-cadherin胃癌细胞膜呈现棕黄色颗粒为阳性细胞。染色程度:无着色为 0分,浅黄色 1分,棕黄色为 2分,棕褐色 3分；阳性细胞百分数:≤10%为 0分,～50%为 1分,～75%为 2分,＞75%为 3分。两项相乘≥4判为阳性,＜4为阴性。

1.2.2 胃癌淋巴结微转移检测 采用免疫组化 SP法对胃癌常规病理检查阴性的淋巴结进行检测,以单克隆抗体细胞角蛋白(AE1/AE3)作为标记,AE1/AE3只定位于转移的胃癌细胞胞质内,DAB显色后呈棕黄色颗粒为阳性细胞。在淋巴结组织中发现阳性细胞判为胃癌淋巴结微转移。

1.2.3 统计学方法 采用 SPSS13.0统计软件。率的比较用 χ2检验,相关关系采用 Pearson相关分析。P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 CD44V6、E-cadherin表达及其与胃癌临床病理参数的关系 胃癌组织中 CD44V6、E-cadherin的阳性率分别为 78.79%(156/198)、55.05%(109/198),正常胃黏膜组织中分别为 0、100%。两者相比,P均 ＜0.05。CD44V6、E-cadherin表达与胃癌临床病理参数的关系见表1。由表可见,CD44V6与胃癌生长方式、浸润程度及 TNM分期显著相关(P均＜0.05),E-cadherin与胃癌分化程度、浸润程度及TNM分期显著相关(P均 ＜0.05)。二者在胃癌组织中的表达呈负相关(r=-0.462,P＜0.01)。

2.2 CD44V6、E-cadherin表达与胃癌淋巴结微转移的关系 胃癌患者中,淋巴结转移 108例,淋巴微转移 64例。CD44V6表达与淋巴结转移呈正相关(r=0.573,P＜0.05),而与淋巴结微转移呈负相关(r=-0.329,P＜0.05)。E-cadherin与淋巴结转移及淋巴结微转移均呈负相关 (r分别为 -0.496、-0.407,P均 ＜0.05)。

3 讨论

CD44基因位于11号染色体短臂,有 20个高度保守的外显子。CD44V6是含外显子 6的变异体,其表达可改变癌细胞表面黏附分子的构成和功能,有助于癌细胞获得转移潜能。研究认为,CD44V6在胃癌中的表达对癌细胞转移至淋巴结起着重要作用。范开席等[1]研究认为,CD44V6的异常表达开始于胃癌早期,且贯穿于胃癌的整个浸润过程,其阳性率与淋巴转移呈正相关。周东辉等[2]研究表明,CD44V6表达分析有助于检测区域淋巴结的微转移。本研究结果显示,CD44V6在胃癌中的阳性率为 78.79%,且与胃癌生长方式、浸润程度及 TNM分期有关,表明 CD44V6阳性者更具有侵袭性和转移性,预后差。本研究中 CD44V6表达与微转移呈负相关,而与淋巴结转移呈正相关,提示 CD44V6在胃癌转移的不同状态下可能起不同作用。我们认为,在发生淋巴结微转移状态时,可能存在某种抵抗 CD44V6发挥作用的因素或机制,而在淋巴结转移瘤形成时 CD44V6开始起主导作用,但具体机制有待进一步研究证实。

表1 CD 44 V 6、E-cadherin表达与胃癌临床病理参数的关系

E-cadherin存在于各类上皮细胞膜上,介导同种细胞间紧密连接,维持组织结构完整性,建立与保持上皮细胞极性的钙依赖性黏附分子。E-cadherin基因被认为是一种转移抑制基因,其低表达说明肿瘤存在发生转移的潜在危险。本研究发现,胃癌组织中 E-cadherin阴性。E-cadherin表达下降或缺失,细胞间的相互黏附力下降,使细胞易于分散并向外周浸润性生长。这已在甲状腺乳头状癌、膀胱癌、前列腺癌和胆囊癌等研究中得到证实[3,4]。本研究结果显示,E-cadherin在胃癌组织中的表达与淋巴结转移及淋巴结微转移呈负相关,且与胃癌分化程度、临床分期、浸润深度显著相关,提示 E-cadherin在抑制肿瘤浸润和转移方面发挥重要作用[5,6]。

本研究发现,CD44V6与 E-cadherin存在着一定的依从性,即随着胃癌组织中 CD44V6表达的增高,E-cadherin有低表达的趋势。这提示在胃癌的发生发展过程中,CD44V6与 E-cadherin具有反向协同作用,前者的激活和后者的失活共同促进肿瘤细胞的侵袭和转移。

[1]范开席,仲伟霞,孙兰萍,等.胃癌中 p16、CD44V6的表达及其相关性的研究[J].实用肿瘤杂志,2000,15(6):391-393.

[2]周东辉,马志敏,冯懿正,等.CD44V6在胃癌中的表达及其临床意义[J].实用肿瘤杂志,2000,15(5):326-328.

[3]Naito A,Lease H,Kuzushina T,et al.Clinical significance of E-cadherin expression in thyroid neoplasms[J].J Surg Oneol,2001,76(3):176-180.

[4]谷化平,刘艳茹,尚培中.nm23 H1和 E-eadherin基因蛋白在胆囊癌组织中的表达[J].中国现代普通外科进展杂志,2002,5(1):29-31.

[5]Chen HC,Chu RY,Hsu PN,et al.Loss of E-cadherin expression correlates with poor differentiation and invasion into adjacent organs in gastric adenocarcinomas[J].Cancer Lett,2003,201(1):97-106.

[6]Hirohashi S,Kanai Y.Cell adhesion system and human cancer morphogenesis[J].Cancer Sci,2003,94(7):575-581.