白花蛇舌草配方颗粒薄层色谱鉴别方法研究

陈培胜 廖彩震 成守玲 郭洋 曹勇

白花蛇舌草配方颗粒是茜草科植物白花蛇舌草(OldenlandiadiffusaWilld)的干燥全草制成的配方颗粒[1]，具有清热解毒、活血消肿、利湿退黄的作用；用于肺热咳嗽、肺痈、咽喉肿痛、肠痈、痈肿疮疡、毒蛇咬伤、热淋涩痛、水肿、痢疾肠炎、湿热黄疸、癌肿[2]。中药配方颗粒是传统中药汤剂的剂型改革，配方颗粒在不具备中药饮片外形后的鉴别方法研究尤为重要。为此安徽省中药配方颗粒工程技术研究中心根据国家食品药品监督管理局颁发的《中药配方颗粒管理暂行规定》要求，以白花蛇舌草中有效成分齐墩果酸为对照品，进行白花蛇舌草配方颗粒的薄层鉴别方法实验研究。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

硅胶G薄层自制板(10 cm×10 cm)，硅胶由青岛海洋化工有限公司提供；薄层摄像仪：瑞士CAMAG DigiStore 2；试验所用试剂均为分析纯。

1.2 试验药品

齐墩果酸对照品，购自中国药品生物制品检定所，批号：110709-200505；白花蛇舌草对照药材购自安徽亳州中药材交易市场，产地江西，经安徽中医学院生药教研室杨俊教授鉴定为白花蛇舌草(OldenlandiadiffusaWilld)；白花蛇舌草配方颗粒由安徽省中药配方颗粒工程技术研究中心提供。

1.3 供试品溶液的制备

取本品粉末1 g，加乙酸乙酯20 ml，回流提取30分钟，滤过，滤液水浴蒸干，残渣加乙酸乙酯1 ml使溶解，即得。

1.4 对照药材溶液的制备

取白花蛇舌草对照药材5 g，加水100 ml，煮沸30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯20 ml，同供试品溶液制备法制成对照药材溶液[3]。

1.5 对照品溶液的制备

取齐墩果酸对照品，加甲醇制成每1 ml含1 mg的溶液，即得。

1.6 显色条件的改进

本实验试用了甲苯-丙酮-冰醋酸(10∶1∶0.9)[4]，展开，喷10%硫硫酸乙醇溶液，置紫外光灯(254 nm)下检视，结果Rf值太小；后调整冰醋酸比例如下：甲苯—丙酮—冰醋酸(10∶2∶0.2)，结果见图1，在Rf值为0.9处有两斑点分离不清晰，分析总结认为该展开系统不适合用于对白花蛇舌草配方颗粒的薄层鉴别；另外试用以下系统展开：三氯甲烷—丙酮(7∶1)，三氯甲烷—乙酸乙酯(5∶3)，结果均不理想；又以甲苯—丙酮(0.5∶1)为展开剂，另槽用少量冰醋酸熏，展开后Rf值适中，斑点清晰。所以最终确定以甲苯—丙酮(0.5∶1)(另槽用冰醋酸熏)为白花蛇舌草配方颗粒薄层鉴别的展开剂。

2 结果

照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液、对照药材溶液各15 μl、对照品溶液4 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯—丙酮(0.5∶1)(另槽用冰醋酸熏)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365 nm)下检视：供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，对照品色谱未见荧光斑点；再喷以10%硫酸乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰，置日光下检视：供试品色谱中，在与对照药材色谱、对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。实验结果见下图2、图3。(彩图见彩插3)

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3 讨论与结论

本实验在试用了甲苯—丙酮—冰醋酸(10∶2∶0.2)，甲苯—丙酮—冰醋酸(10∶2∶0.9)，三氯甲烷—丙酮(7∶1)与三氯甲烷—乙酸乙酯(5∶3)等多种溶剂系统展开结果均不理想的基础上，再试用甲苯—丙酮(0.5∶1)(另槽用冰醋酸熏)为展开剂展开，结果供试品与对照药材、对照品斑点对应良好，Rf值适中。所以最终确定以甲苯-丙酮(0.5∶1)(另槽用冰醋酸熏)为白花蛇舌草配方颗粒薄层鉴别的展开剂。采用该方法重复试验表明，该薄层鉴别方法重现性好，专属性强，可以作为白花蛇舌草配方颗粒的薄层鉴别方法，用于白花蛇舌草配方颗粒的质量控制。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京：中国医药科技出版社，2010：附录21.

[2]江苏新医学院.中药大辞典(下册)[M] .上海：上海科学技术出版社，2006：1039.

[3]谢培山.中药配方颗粒薄层色谱彩色图集[M]．江苏：江苏科学技术出版社，2004：49.

[4]郑虎占，董泽宏，佘靖．中药现代研究与应用[M]．北京：学苑出版社，1997：1533.