HPLC测定青参胶囊中青藤碱的含量

2010-05-14何法霖郑玉胜董海鹏

世界中医药 2010年3期

关键词：青藤批号供试

何法霖柏冬郑玉胜周玥刘路董海鹏

(1卫生部北京医院，北京东单大华路 1号，100730;2北京中医药大学;3同仁堂天然药物有限公司;4世界中医药学会联合会;5国家知识产权局专利局)

青参胶囊由青风藤、黄连、苦参等 5味中药组成，可以祛风湿，通经络，临床上用于治疗风湿痹痛，关节肿胀，麻痹瘙痒，具有很好的疗效。我们建立了高效液相色谱法测定青参胶囊中青藤碱含量的方法，报道如下。

1 仪器与试药

1.1 仪器 Agilent 1200系列高效液相色谱仪，包括在线脱气机、四元泵、自动进样器、柱温箱、二极管阵列检测器、Agilent ChemStation工作站);梅特勒 AE240电子分析天平;超纯水发生器(Millpore)。

1.2 试药青藤碱对照品(110704-200318，供含量测定用)由中国药品生物制品检定所提供;青参胶囊(批号:20081201，20081202，20081203);乙腈 (色谱纯，飞世尔科技)、重蒸水、其他试剂为分析纯。

2 色谱条件

色谱柱:Waters Nova-Pak C18柱 (250mm×3.9mm，4μm);流动相为 0.033mol/L磷酸二氢钾溶液-乙腈(90∶10);流速 1.0mL/min;检测波长 262nm。

3 方法与结果

3.1 对照品溶液的制备取青藤碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每 mL含青藤碱 0.0735mg的溶液，作为对照品溶液。

3.2 供试品溶液的制备取供试品 0.5g，精密称定，精密加入甲醇 50mL，称定重量，超声提取 30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，作为供试品溶液。

3.3 线性关系考察取青藤碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成含青藤碱 0.735mg/mL的对照品贮备液，精密吸取贮备液 1、1.2、1.6、2.0、2.5、3.0、4.0mL至 25mL量瓶中，加甲醇定容。分别精密量取上述溶液各 10μL注入液相色谱仪，以峰面积 Y为纵坐标，进样浓度 X(μg/mL)为横坐标，绘制标准曲线，得青藤碱的线性回归方程为 Y=825.26X+10.31(r=0.9997，n=6)，表明青藤碱进样量在 0.294～1.176μg范围内呈良好的线性关系。

3.4 精密度试验分别精密吸取青藤碱对照品溶液10μL，连续重复进样 6次，峰面积的 RSD为 0.21%(n=6)，表明本方法精密度良好。

3.5 重现性试验取同一生产批号(20081201)样品，按照供试品溶液制备方法和上述色谱条件平行测定 6次，得到青藤碱平均含量为7.05mg/g，RSD=0.44(n=6)，表明本方法重现性良好。

3.6 稳定性试验取同一生产批号(20081201)的供试品溶液，分别在 0、2、4、8、12及 24h进样 10μL，测定峰面积，青藤碱平均含量为 7.03mg/g，RSD=0.37%(n=6)，表明样品溶液放置 24h内稳定。

3.7 回收率试验取已知含量的同一生产批号(20081201)的样品，采用加样回收试验，分别以样品量的 80%，100%，120%的比例精密加入青藤碱对照品，按样品测定项下的方法测定含量，平均回收率为99.38%，RSD=0.46%(n=9)，结果见表 1。