核桃楸果水提物抗肿瘤作用的实验研究

张 厂 金周汉 宋崇顺

(1北京中医药大学东方医院消化科,北京丰台区方庄芳星园一区六号,100078;2北京中医药大学;3北京中医药大学东直门医院中药药理学实验室)

核桃楸(Juglans Mandshurica Maxim)为胡桃科胡桃属植物,核桃楸果是核桃楸的果实,文献记载其具有行气止痛的功效,可治疗脘腹疼痛,而东北民间长期流传有应用其抗肿瘤的经验。本实验研究对核桃楸果水提物的抗肿瘤作用进行了初步探讨。

1 实验材料

药物:1)核桃楸果水提物:按照每 30g市售核桃楸果水煎为 200mL的比例进行煎煮(人用量为200mL/日),并继续在水浴上浓缩,lmL浓缩液相当于原液 6.3mL。2)注射用丝裂霉素:协和工业株式会社制造销售,批号为 879AIL,10mg/支。3)5-氟尿嘧啶注射液(5-FU):上海旭东海普药业有限公司出品,批号为 000404,0.25g/10mL。4)足叶乙甙:北京制药工业研究所试验药厂,批号为 990810,100mg/5mg。动物:清洁级 ICR小鼠,北京维通利华实验动物技术有限公司供给,许可证号为京动许字(2000)第 004号总049号。实验环境:小鼠实验在清洁级动物实验室内进行,合格证号为 SYXK11-00-0029。瘤株:瘤株为肉瘤 180(S180),肝癌 22(H22),Liwise肺癌(LWS),由医学科学院药物研究所肿瘤室供给。

2 实验方法

将小鼠随机分为 6组,1)造型组:0.5%CMC液,10mL/kg。2)核桃楸果水提物大剂量组(简称为大剂量组),给药剂量为 63mL原液/kg,相当于 10mL浓缩液/kg。3)核桃楸果水提物中剂量组(简称为中剂量组),给药剂量为 31.5mL原液/kg,相当于 5mL浓缩液/kg。4)核桃楸果水提物小剂量组(简称为小剂量组),给药剂量为 15.75mL原液/kg,相当于 2.5mL浓缩液/kg。5)阳性药丝裂霉素对照组(简称为丝裂霉素组),0.6mg/kg。阳性药 5-FU对照组(简称为 5-FU组),1.39mg/kg。阳性药足叶乙甙对照组(简称为足叶乙甙组),3.33mg/kg。6)正常对照:0.5%CMC液,10mL/kg。以上各组均口服给药,0.1mL/10g体重。

以上各组均在无菌条件下进行操作,除对照组外,其他各实验组均用 S180瘤株造型,首先将 S180、H22、LWS瘤组织用织研磨器均浆,生理盐水和瘤株的 W:V比值为 4:1,在无菌条件下接种于小鼠左前肢腋下,0.2mL/只)后 24h开始给药,0.1mL/10g体重。对照组,在无菌条件下将生理盐水接种于左前肢腋下,0.2mL/只,造型 24h后随机分组给药,以上各组均连续给药 14天,分别于给药给水前、给药给水后 7天、14天称体重,第 14天体重 =体重 -瘤重。取血后,拉断脊髓处死小鼠,取出肿瘤、胸腺、脾脏,称重。百克体重增长百分率 =(给药后体重 -给药前体重)/给药前体重 ×100,肿瘤抑瘤率 =(造型组瘤重 -不同剂量组瘤重)/造型组瘤重 ×100。

3 结果

体重变化结果见表 1、2、3。胸腺、脾脏、肿瘤重量变化结果见表 4、5、6。

表1 核桃楸果水提物对S180肉瘤造型小鼠体重影响比较表

从表 1可看出,模型组小鼠体重明显低于对照组,表明模型组小鼠体重的减轻是由于肿瘤生长造成的。同造型组小鼠相比,在造型后第 14天,小鼠体重减去肿瘤重量后,给药大、中、小剂量组,丝裂酶素组小鼠体重明显增加,体重增长百分率也明显增加,表明核桃楸果水提物对小鼠体重起到明显保护作用。

从表 2可看出,模型组小鼠体重明显低于对照组,表明模型组小鼠体重的减轻是由于肿瘤生长造成的。同造型组小鼠相比,在造型后第 14天,小鼠体重减去肿瘤重量后,给药大、中、小剂量组,小鼠体重明显增加,体重增长百分率也明显增加;5-FU组明显减轻,体重增长百分率也明显减轻,表明核桃楸果水提物对小鼠体重起到明显保护作用,5-FU对小鼠体重不但没表现保护作用,还表现出一定的毒性作用。

表2 核桃楸果水提物对 H22造型小鼠体重影响比较表

表3 核桃楸果水提物对 LWS造型小鼠体重影响比较表

从表 3可看出,模型组小鼠同对照组相比,体重、体重增长百分率均未见明显差别。同造型组小鼠相比,在造型后第 14天,小鼠体重减去肿瘤重量后,给药大、中、小剂量组小鼠体重、体重增长百分率均有不同程度的增加,但均未见明显差别。足叶乙甙组小鼠体重、体重增长百分率明显低于造型组,足叶乙甙组对小鼠体重不但没表现保护作用,还表现出一定的毒性作用。

表4 核桃楸果水提物对S180造型小鼠肿瘤、胸腺、脾脏重量影响比较表

从表 4可看出,S180造型小鼠脾脏均比对照组明显增加,胸腺明显减轻,这可能与肿瘤瘤株进入机体后,机体自然产生抗病能力有关,也正说明机体处于抵抗阶段。胸腺重量的减轻又表明机体的抵抗能力开始下降,免疫功能减弱。同造型组相比,给药大、中、小剂量组,丝裂酶素组小鼠肿瘤重量均明显减轻。丝裂酶素组小鼠胸腺、脾脏重量指数明显减少,表明化疗药物在抑制肿瘤细胞的同时,对机体也产生明显的副作用,使机体抗病能力明显下降。给药大、中、小剂量组小鼠胸腺、脾脏重量指数均比造型组均有不同的增加,大、中剂量组增加明显,表明核桃楸果水提物能增强机体抗病能力和免疫功能,对小鼠机体起到明显保护作用。

表 5可看出,S180造型小鼠脾脏均比对照组明显增加,胸腺明显减轻,这可能与肿瘤瘤株进入机体后,机体自然产生抗病能力有关,也正说明机体处于抵抗阶段。胸腺重量的减轻又表明机体的抵抗能力开始下降,免疫功能减弱。同造型组相比,给药大、中、小剂量组,丝裂酶素组小鼠肿瘤重量均明显减轻。丝裂酶素组小鼠胸腺、脾脏重量指数明显减少,表明化疗药物在抑制肿瘤细胞的同时,对机体也产生明显的副作用,使机体抗病能力明显下降。给药大、中、小剂量组小鼠胸腺、脾脏重量指数均比造型组均有不同的增加,大、中剂量组增加明显,表明核桃楸果水提物能增强机体抗病能力和免疫功能,对小鼠机体起到明显保护作用。

表6 核桃楸果水提物对LWS造型小鼠肿瘤、胸腺、脾脏重量影响比较表

表 6可看出,LWS造型小鼠脾脏均比对照组明显增加,胸腺明显减轻,这可能与肿瘤瘤株进入机体后,机体自然产生抗病能力有关,也正说明机体处于抵抗阶段。胸腺重量的减轻又表明机体的抵抗能力开始下降,免疫功能减弱。同造型组相比,给药大、中、小剂量组,丝裂酶素组小鼠肿瘤重量均明显减轻。丝裂酶素组小鼠胸腺、脾脏重量指数明显减少,表明化疗药物在抑制肿瘤细胞的同时,对机体也产生明显的副作用,使机体抗病能力明显下降。给药大、中、小剂量组小鼠胸腺、脾脏重量指数均比造型组均有不同的增加,大、中剂量组增加明显,表明核桃楸果水提物能增强机体抗病能力和免疫功能,对小鼠机体起到明显保护作用。

4 讨论

核桃楸果水提物对 S180、H22、LWS造型小鼠肿瘤均有一定的抑制作用,大剂量组的抑瘤率分别为的抑瘤率分别为 19.02%、41.21%、41.40%;中剂量组的抑瘤率分别为 16.09%、37.70%、37.19%;小剂量组的抑瘤率分别为 11.70%、30.35%、33.00%。表明核桃楸果水提物对 S180瘤株的抑制作用较弱,对 H22、LWS瘤株的抑制作用较强。S180、H22、LWS模型组小鼠同对照组相比,体重、体重增长百分率均未见明显差别。同造型组小鼠相比,在造型后第 14天,小鼠体重减去肿瘤重量后,核桃楸果水提物大、中、小剂量组小鼠体重、体重增长百分率均有不同程度的增加,但均未见明显差别。足叶乙甙组、5-FU小鼠体重、体重增长百分率不但未见增加,还明显低于 H22、LWS模型组,足叶乙甙组、5-FU对小鼠体重不但没表现保护作用,还表现出一定的毒性作用。

胸腺和脾脏是机体主要的免疫器官,与机体抗病能力密切相关。实验结果表明,H22、S180、LWS造型小鼠脾脏均比对照组明显增加,胸腺均比对照组明显减轻,这与肿瘤瘤株进入机体后,机体自然产生抗病能力有关,也正说明机体处于抵抗阶段。胸腺重量的减轻又表明机体的抵抗能力开始下降,免疫功能减弱。同造型组相比,核桃楸果水提物不但对造型小鼠胸腺起到明显保护作用、还可使脾脏重量明显增加,表明核桃楸果水提物能明显增强机体抗病能力和免疫功能,可能是核桃楸果水提物抗瘤作用的机理之一。