当归精油香薰疗法对大鼠痛经模型的影响1)

殷 玲,徐 莹,叶 红,沈升万,应立英

原发性痛经是青年女性常见病之一,严重影响正常生活和工作质量。其病因复杂,前列腺素合成酶抑制剂为目前的常用治疗药物,但存在恶心、胃肠黏膜溃疡、腹痛、粒细胞减少等副反应。中医认为痛经是因血液淤阻而致。当归(angelica sinensis diels)作为妇科常用药,具有补血活血、调经止痛等功效,它的化学成分主要为当归精油和水溶性物质。本研究拟采用当归精油对大鼠痛经模型进行香薰,旨在探讨通过香薰这种无明显副反应的护理干预途径,了解当归精油对痛经的影响,以期为此疗法的临床应用提供更多的依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 Wistar雌性大鼠 24只,体重(225.0±13.7)g。由浙江中医药大学动物实验研究中心提供[合格证号:SCXK(沪)2008—0016],实验前适应环境饲养1周。本实验于浙江中医药大学动物实验中心清洁级动物实验室完成。

1.1.2 药物和试剂 ①缩宫素注射液:由上海禾丰制药有限公司生产,每支10 IU/mL,批号 090506。②苯甲酸雌二醇注射液:由上海通用药业股份有限公司生产,每支 2 mg/mL,批号 090502。③当归精油:由江西省吉安市天玉天然香料油有限公司提供,是自新鲜当归中分离提取而来,精油含蒿苯内酯 50%以上,相对密度0.908～0.932,折光 1.448～1.476。④β-内啡肽(β-EP)试剂盒(编号E02E0214)、血栓素B2(TXB2)试剂盒(编号E02T0003)、6酮前列腺素F1a(6-K-PGF1a)试剂盒(编号E02K0012),均由上海蓝基生物科技有限公司提供。

1.1.3 装置和仪器 香薰装置为1个68 cm×50 cm×42 cm塑料箱子,中间用铁丝网隔开放置插电式香薰灯(广州鸿盛电子科技有限公司),周围饲养大鼠,箱子两侧壁留下直径为1.5 cm的圆孔各3个,顶部为塑料盖板以便操作和观察。采血玻璃管、离心机、离心管、血清冷冻冰箱由浙江中医药大学动物实验研究中心提供。大鼠β-内啡肽、血栓素B2、6酮前列腺素 F1a的检测仪器由上海蓝基生物科技有限公司提供。

1.2 方法

1.2.1 造模方法 大鼠痛经模型按文献[1]方法制备。在大鼠股部皮下注射苯甲酸雌二醇 10 d,每日1次,第1日、第10日每只0.5 mg,第2日～第9日每只0.2 mg,第11日腹腔注射缩宫素每只2 IU。

1.2.2 实验方法 取同批Wistar雌性大鼠24只,测量体重,按体重编号后随机分为香薰组和病理模型组,每组12只。香薰组和病理模型组依法造模。造模同时,香薰组开始进行香薰,取当归精油按1滴精油加30 mL温开水的比例配制成香薰液,每天08:00～16:00进行香薰(中途添加 1次现配香薰液),连续10 d。病理模型组则不香薰。其余饲养、环境等条件两组均相同。实验结束后再次测量体重,大鼠体重在实验前后组间差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2.3 观察指标 ①大鼠扭体反应:第11日在腹腔注射缩宫素后30 min内,观察记录大鼠扭体反应(大鼠腹部收缩内凹,躯干与后肢伸展,臀部与一侧肢体内旋)发生的次数。②大鼠血清β-EP、TXB2、6-K-PGF1a:实验第 11天观察大鼠扭体反应次数后,香薰组和病理模型组分别从眼眶取血1.5 mL,离心后取血清并置于-60℃冰箱冷藏后送检。应用酶联免疫吸附法(ELISA)定量检测大鼠血清中各项指标,方法严格遵照说明书进行。③大鼠免疫器官的病理观察:取血后随机抽取香薰组和病理模型组各1只大鼠,解剖后分离胸腺、脾脏,放入10%甲醛中浸泡,常规病理切片镜下观察。此项实验在浙江中医药大学病理实验室完成。

1.3 实验人员培训 参与实验人员均接受过常规的动物实验培训。

1.4 统计学分析 采用SPSS13.0软件包进行数据处理,各组数据用均值和标准差-±s)表示,符合正态分布的计量资料采用t检验,不符合正态分布的采用秩和检验,计数资料采用 χ2检验。

2 结果

2.1 香薰疗法对痛经大鼠扭体次数的影响 香薰组大鼠30 min内发生扭体次数明显低于模型组(t=3.838,P<0.01)。扭体发生率两组间差异无统计 学意义(P>0.05),详见表1。

表1 两组痛经大鼠扭体次数及扭体发生率比较

2.2 香薰疗法对痛经大鼠血清β-EP、6-K-PGF1a、TXB2含量的影响 与病理模型组比较,香薰组大鼠血清中β-EP、6-K-PGF1a含量明显升高(P<0.01),TXB2含量明显降低(P<0.01),详见表2。

表2 两组痛经大鼠血清β-EP、6-K-PGF1a、TXB2的变化

2.3 香薰疗法对痛经大鼠胸腺、脾脏病理变化的影响 大鼠胸腺、脾脏的病理切片经HE染色后显示:两组胸腺结构存在,部分区皮质萎缩,髓质区增宽,皮、髓质分界尚清。脾脏结构存在,白髓、红髓、边缘区分界清,脾血窦可见大量含铁血黄素沉着。两组镜检结果未见明显区别。

3 讨论

香薰疗法是指将植物中萃取的具有特定疗效的精油,借助薰香器具扩散,经呼吸道吸收后,作用于机体大脑边缘系统和全身各器官,从而达到预防和治疗身心疾病的功效[2]。相对于药物而言,精油的优势主要体现在高渗透性、代谢快、不滞留、毒性小、容易透过血-脑屏障等特点[2]。国外护理界已有许多学者将香薰疗法应用于疼痛、焦虑、抑郁等的干预,取得良好效果[3-5]。

关于痛经的发病机制,中医学认为是因冲任气血运行不畅、胞宫经血流通受阻所致。西医认为由于月经期子宫内膜释放前列腺素,诱发子宫肌痉挛性收缩,导致组织缺血而引起的。这一观点正与中医学“不通则痛”的病机相吻合。痛经的中医治疗原则以调理冲任气血为主,而当归具有补血、调经、止痛等功效。近年来又有药理研究表明[6],当归精油对正常和病理性的离体子宫平滑肌均有抑制作用,有较强的抗子宫平滑肌痉挛作用。基于上述理论和研究基础,本实验将当归精油以香薰的形式作用于缩宫素所致大鼠痛经模型,探讨其有效性和作用机制。

实验结果显示,模型大鼠注射缩宫素后的扭体发生率是100.0%,且出现磨牙、舔腹部、弓背行走等现象,说明造模成功。香薰组痛经大鼠模型的扭体次数明显减少,与病理模型组比较差异有统计学意义(P<0.01),而且有3只大鼠未出现明显的扭体现象,说明当归精油经香薰途径对子宫平滑肌也具有较好的抑制作用,从而缓解痛经。本试验中大鼠主要是通过被动吸入精油蒸气而产生相应的疗效。若是人体则可配合主动地深呼吸增加药物吸入量,治疗时间可相应缩短。

β-内啡肽是一种具有内源性镇痛作用的神经内分泌激素,且以子宫为靶器官,参与其功能活动的调节[7]。本次研究结果表明,香薰组大鼠血清中β-EP含量高于病理模型组(P<0.01),从而起到内源性镇痛作用。TXB2、6-K-PGF1a是 TXA2、PGI2的代谢产物,TXA2具有强有力的收缩血管的作用,并能促进血小板凝集而导致血栓形成。PGI2具有明显的扩血管和抑制血小板聚集的作用。痛经时TXA2产生增多,而缺血子宫肌肉内产生的大量氧自由基又抑制PGI2合成,形成恶性循环。本研究中,通过当归精油香薰对大鼠痛经模型血清中TXB2和6-K-PGF1a调节结果可看出,当归精油香薰可以明显增加血浆中6-K-PGF1a含量和降低TXB2含量,使子宫组织细胞功能趋于正常化,从而缓解痛经的临床表现。

病理结果显示,大鼠的免疫器官胸腺和脾脏均出现一些病理改变,说明痛经的发生与免疫系统的变化密切相关。但病理模型组和香薰组的镜检结果未见明显区别,考虑是否与当归精油香薰的干预时间过短有关,有待进一步的深入研究。

3 小结

当归精油香薰疗法对缩宫素所致大鼠痛经模型具有良好的镇痛作用,其作用机制可能与神经内分泌激素的综合性调节作用相关。该研究为当归精油香薰疗法的临床护理应用提供了一定的理论和实验依据。

(感谢马小琴教授对本课题的悉心指导。)

[1]嵇波,张露芬,朱江,等.痛经模型建立和评价方法的思考[J].中国药理学通报,2008,24(6):711-714.

[2]Tisserand R.The art of aromatherapy[M].台湾:世茂出版社,2001:18-21.

[3]Braden R,Reichow S,Halm M A.The use of the essential oil lavandin to reduce preoperative anxiety in surgical patients[J].J Perianesth Nurs,2009,24(6):348-355.

[4]Van der Watt G,Janca A.Aromatherapy in nursing and mental health care[J].Contemp Nurse,2008,30(1):69-75.

[5]Nord D,Belew J.Effectiveness of the essential oils lavender and ginger in promoting children's comfort in a perianesthesia setting[J].J Perianesth Nurs,2009,24(5):307-312.

[6]杜俊蓉,白波,余彦,等.当归挥发油研究新进展[J].中国中药杂志,2005,30(18):1400-1406.

[7]刘芳,郑翠红,黄光英,等.针刺对痛经大鼠中枢及外周β-EP含量的影响[J].浙江中医杂志,2008,43(8):444-446.