定性检测饲料中三聚氰胺便捷方法的探讨

2010-04-28晋中职业技术学院郭春燕杨继生

中国饲料 2010年9期

晋中职业技术学院郭春燕杨继生

三聚氰胺是一种三嗪类含氮杂环有机化合物，是有机化工原料，简称三胺（又叫氰尿酰胺、三聚氰酰胺）。性状为纯白色单斜棱晶体，无味，呈弱碱性，能够与各种酸反应生成三聚氰胺盐；在强酸或强碱液中，胺基逐步被羟基取代，生成三聚氰酸二酰胺、三聚氰酸一酰胺和三聚氰酸，三氯氰胺具有弱毒性。

由于目前采用的凯氏定氮法估测食品和饲料中蛋白质含量方法存在缺陷，三聚氰胺被不法厂商掺进食品或饲料中，以提升食品或饲料中蛋白质含量的检测值。自三聚氰胺事件后，高效液相色谱法（GB/T 2-22308088；倪沁颜，2008）、气相色谱法（王征，2008）、试剂盒等多种方法被推出，然而这些方法都需要特定的检测设备，在基层使用推广存在很大困难。因此，本实验探讨采用简单的实验方法进行三聚氰胺最小含量的检测，具有成本低、操作简单等特点，为基层单位三聚氰胺的检测提供可行的方法依据。

1 实验原理

三聚氰胺与三聚氰酸并用，会在水中结合成异氰尿酸蜜胺盐，异氰尿酸蜜胺盐不溶性水，是白色沉淀物，形成乳浊液，白色物在溶液中的比例可以反映出异氰尿酸蜜胺盐的多少，最后确定三聚氰胺的含量。

2 材料与方法

2.1 实验设计本实验分为两个实验，每个实验设3个处理，各处理添加不同浓度的三聚氰胺，具体见表1。

2.2 操作过程

2.2.1 实验一水溶液组：吸取10 mL蒸馏水于试管中，按照比例添加纯品三聚氰胺，漩涡振荡混匀，6000 r/min离心5 min，吸取5 mL上清液转移到另一试管中，向上清液中滴加三聚氰酸饱和液5滴，观察。

鱼粉组：称取样品5 g于烧杯中，加入室温蒸馏水75 mL，按照比例添加纯品三聚氰胺，加热煮沸30 min，放置过滤，吸取10 mL滤液，6000 r/min离心20 min；吸取上清液5 mL入试管中，加入三聚氰酸饱和液5滴，观察。

豆粕组：称取样品5 g于烧杯中，加入室温蒸馏水75 mL，按照比例添加纯品三聚氰胺，加热煮沸30 min，放置过滤，吸取10 mL滤液，6000 r/min离心20 min；吸取上清液5 mL入试管中，加入三聚氰酸饱和液5滴，观察。

表1 实验一和实验二不同处理组中三氯氰胺的含量

2.2.2 实验二水溶液组：吸取10 mL蒸馏水于试管中，按照比例添加纯品三聚氰胺；准确吸取50 mL三氯乙酸溶液（1%）和2 mL乙酸铅溶液（2.2%）加入试管中，漩涡振荡混匀10 min，6000 r/min离心5 min；吸取上清液5 mL，滴加三聚氰酸饱和液5滴，观察。

鱼粉组：称取鱼粉5 g于烧杯中，加入室温蒸馏水75 mL，按照比例添加纯品三聚氰胺；准确吸取50 mL三氯乙酸溶液（1%）和2 mL乙酸铅溶液（2.2%）加入试管中，漩涡振荡混匀10 min，6000 r/min离心5 min；吸取上清液5 mL，滴加三聚氰酸饱和液5滴，观察。

豆粕组：称取豆粕5 g于烧杯中，加入室温蒸馏水75 mL，按照比例添加纯品三聚氰胺；准确吸取50 mL三氯乙酸溶液（1%）和2 mL乙酸铅溶液（2.2%）加入试管中，漩涡振荡混匀10 min，6000 r/min离心5 min；吸取上清液5 mL，滴加三聚氰酸饱和液5滴，观察。

3 结果与分析

3.1 实验一沉淀结果见表2。

表2 实验一组的沉淀现象

由表2可知，在水溶液组中，滴加5滴三聚氰酸饱和液后，1.1 mg/100 mL试管立即出现浑浊，随着浓度增加浑浊度增加，0.1 mg/100 mL试管显示不明显。1 h后1.1 mg/100 mL试管底部出现白色沉淀，0.1 mg/100 mL试管仍无显示。2 h后试管底部沉淀增多，上部溶液开始出现澄清，0.1 mg/100 mL试管仍无显示。5 h后试管底部沉淀，上部溶液澄清，0.1 mg/100 mL试管无沉淀现象。由此可见，三聚氰胺在水溶液中含量为1.1 mg/100 mL时，用三聚氰酸饱和液滴定有沉淀现象产生。

实验一的鱼粉组和豆粕组滴加三聚氰酸后，鱼粉组中三氯氰胺含量为50 mg/kg时，试管有较淡的分层界面；1 h后，可见200 mg/kg和250 mg/kg试管有明显浑浊悬浮物，50 mg/kg到100 mg/kg试管可见分层面；12 h后160 mg/kg到250 mg/kg试管浑浊下沉，上部溶液开始澄清；36 h后浑浊全部沉淀至底部，但是50 mg/kg和100 mg/kg试管无沉淀。滴加到豆粕组后不显示，0.5 h后200 mg/kg和250 mg/kg试管液面上层出现浑浊；5 h后 160 mg/kg到250 mg/kg试管液面上层出现明显浑浊；36 h后140 mg/kg到250 mg/kg试管底部出现明显沉淀晶体，但100 mg/kg试管无沉淀。结果表明，未经三氯乙酸处理的鱼粉在160 mg/kg有沉淀现象，豆粕在140 mg/kg有沉淀现象。

3.2 实验二沉淀结果见表3。

由表3可见，此组实验中水溶液处理组的沉淀现象与实验一的水溶液组一致。三聚氰胺在经三氯乙酸和乙酸铅处理的水溶液中含量为1.1 mg/100 mL时，可用三聚氰酸饱和液滴定有沉淀现象显示。

表3 实验二组的沉淀现象

采用三氯乙酸和乙酸铅处理的鱼粉组滴加三聚氰酸饱和液后，无明显显示，仅见110 mg/kg试管有轻微分层界面。18 h后可见70 mg/kg到110 mg/kg试管均有浑浊分层面。豆粕组滴加后无明显显示，仅110 mg/kg试管有轻微分层界面。0.5 h后，60 mg/kg试管开始出现上层混浊物。1 h后60 mg/kg到110 mg/kg试管均出现上层混浊物。18 h后液面分层不明显，但是可见试管底部有少许沉淀生成。因此，经三氯乙酸和乙酸铅处理的样品，鱼粉和豆粕分别在70 mg/kg和60 mg/kg有沉淀现象产生。