髓复康对恒河猴脊髓半横断损伤后自由基变化的调节作用

何 爽，张万强，朱 嘉，孔焕宇

(1.长春大学 特殊教育学院，吉林 长春 130022；2.中国中医科学院望京医院，北京 100000)

急性脊髓损伤(ASCI)及其诱发的继发性脊髓损伤(SSCI)是导致机体功能丧失的主要原因，而近年的研究发现，自由基及其介导的脂质过氧化反应，在急性脊髓损伤后的SSCI的病理过程中起着重要的作用[1-4]。我们前期实验证实,髓复康(SFK)可以促进ASCI恒河猴感觉运动功能的恢复、在相当的程度上缩小脊髓损伤灶的面积。本实验是在前期研究的基础上观察SFK对ASCI后，恒河猴血液中自由基水平的调节作用，探索该药的作用机制。

1 材料和方法

1.1 药物与试剂 髓复康(SFK)由生黄芪、川芎、赤芍、红花、葛根和三七等8味中药组成，水煎，生药浓度为2.5 g/mL。

1.2 模型制备与分组 成年雄性恒河猴14只(购自军事医学科学院，合格证号:0019631)，6 500～7 500 g,其中10只在无菌手术下造成脊髓T12左侧半横断损伤模型[5],随机分为髓复康组和模型组各5只，其余4只为正常对照组。

1.3 喂药方法 术后髓复康组灌喂髓复康水煎液，1次/d，共30 d，每次生药剂量为8.55 g/kg。第1次喂药在麻醉清醒后4 h以内，其余两组恒河猴按髓复康组方式灌喂等量的生理盐水。

1.4 取材 动物麻醉后打开胸腔，从左心室抽取血液2 mL，迅速注入抗凝管内(按1∶10用3.8%枸橼酸抗凝)，轻轻摇匀，1 mL用于测SOD，另1 mL用于测MDA。

1.5 测定方法 分别采用黄嘌呤氧化法和硫代巴比妥酸(TBA)化学发光法测定SOD活性和MDA浓度(试剂盒购自南京建成生物制剂公司)。操作步骤均按试剂盒说明进行。

2 结果

血液中SOD活性和MDA含量平均值，见表1。

表1 血液中SOD活性和MDA含量平均值比较

3 讨论

机体内存在着自由基和抗自由基两个体系。在生理状态下，通过酶系统和非酶系统可产生一些氧自由基，可由内源性抗氧化系统如超氧化物歧化酶(SOD)等有效清除，保持动态平衡，因而不表现出毒性作用。这对于维持机体各种细胞和亚细胞结构的稳态十分重要。而脊髓损伤所诱发的缺血、缺氧及缺血后再灌注等病理过程中，会导致脊髓损伤区内产生大量氧自由基[6]，过剩的自由基不仅可以直接造成脊髓组织的继发性损伤，而且在启动、激活和加剧其它继发性损伤机制方面，也具有促进作用。脊髓损伤后自由基反应被公认为是引起脊髓组织继发性损伤的主要因素之一[7-8]。

MDA为过氧化脂质的代谢产物，而SOD为自由基清除剂，它们的含量均可反映体内自由基的变化情况[9-10]。从本实验观察到，术后30 d，模型组恒河猴血液中丙二醛(MDA)的含量仍然很高，而抗氧化剂SOD活性明显下降，表明自由基长时间参与了脊髓损伤后继发性损害的病理过程。用药后，SOD明显升高，MOD含量明显下降，这一结果提示，SFK在SCI后有抗自由基损害的作用，同时能够提高机体抗氧化的能力。这可能是由于SFK含有多种益气活血作用的药物，通过开放微循环管道和加速微循环血流等环节，把脊髓损伤灶内过剩的自由基运走，改善了脊髓损伤区的供血和供氧，改善了微循环，减少了产生自由基的恶性刺激；同时由于其活血作用，加快了微循环血流速度，从而促进了自由基的排泄，降低了血液自由基的含量；并且SFK益气活血作用能够增加内源性自由基清除系统的活性。

本实验结果提示，髓复康可能通过对自由基的调节作用，从一定程度上遏制了脊髓继发性损伤的发展，而发挥脊髓保护作用，为损伤神经的修复和再生提供有利的微环境。

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