去势后的雌、雄大鼠在正畸牙齿移动中牙周组织影响的实验研究

侯玉一,侯玉泽,柳宏志,李德超

(1.佳木斯大学附属第一医院口腔科,黑龙江佳木斯 154003;2.佳木斯大学附属第二医院修复科,黑龙江 佳木斯 154002;3.大庆油田总医院,黑龙江大庆 163000)

口腔正畸治疗的目的是通过牙齿在骨组织内的移动以及对颌骨生长发育的控制,来矫治各种错颌畸形,牙齿通过牙周膜和牙槽骨相连接,并固定于牙槽骨内,牙槽骨主要由松质骨组成,是高度可塑性组织,受体内多种激素和活性物质的调节。其中性激素对机体的生长发育和适应性改建起着十分重要作用,而缺乏不同性激素引起的骨组织代谢异常,一定影响到正畸牙齿移动及牙周组织的改建过程。本实验主要探讨切除雌、雄大鼠性腺后,在雌、雄激素缺乏下 ,其不同的骨代谢率对正畸大鼠牙移动的实验研究,从骨组织形态结构改变观察其牙周组织超微结构的改建特征,为今后临床工作提供理论依据和参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料

实验动物为健康的 40只雄性 Wistar大鼠,体重(240±10)g,随机分成去睾丸组(ORX)和非去睾丸组(A组),每组20只;40只雌性 Wistar大鼠 ,体重 (230± 10)g,随机分成去卵巢组(OVX)和非去卵巢组 (B组),每组20只,每组再分为1、7、14、21天组,每组各 5只 (由佳木斯大学动物中心提供),分笼饲养,自由摄食 ,饮水,饲料喂养。适应性喂养一周后进行实验。5月龄 ,体重 2.5～ 4kg。

1.2 方法

1.2.1 动物模型的建立

OVX手术方法,大鼠全麻固定后定于鼠板,碘酒、酒精消毒,背部脱毛辅巾,取腹部正中切口,于腰肌和肋腺相交处钝性分离腹外侧肌肉用小弯镊夹持卵巢,完整切除,同法切除对侧卵巢后缝合皮下组织及皮肤。

ORX手术方法,大鼠全麻固定后定于鼠板,取仰卧式,碘酒,酒精消毒阴囊皮肤,纵隔离相距1cm各开一个纵行切口,剪开鞘膜后,找出双侧睾丸并切除,缝合皮下组织和皮肤。

术后肌肉注射庆大霉素 1万 u/kg,每天2次,连续用药3d。所有动物在同等的条件下饲养,自由摄食,摄水,称重一次。喂养6周后纳入实验。

1.2.2 分组实验

正畸大鼠牙齿移动装置的制作,大鼠全麻固定于鼠板,取仰卧式,用带尖细金刚砂车针的涡轮机在上颌第一磨牙近中,颊侧和切牙颈缘磨沟,深约0.2mm,以利于结扎丝的固定。同时磨改上、下第一磨牙和切牙,将按预定力值50g的正畸镍钛螺簧用结扎丝固定于上颌第一磨牙与同侧切刀之间,使双侧第一磨牙向近中移动。

每两天检查一次,若有脱落及时安装,每隔一周加力一次,每组分别在每组加力后,每隔一周加力一次,每组分别在加力后第 1天、7天、14天、21天各处死5只,测量上颌第一磨牙与邻牙之间的距离。取加力后上颌颌骨组织固定。常规骨组织形态计量学分析,HE,透射电镜。

2 结果

骨组织形态计量学静态参数指标 OVX组和 ORX组比较,骨小梁面积百分率-68%,骨小梁数目-67%,(P＜0.01)。骨组织形态计量学动态参数指标 OVX组和ORX组比较,骨的形成参数显著增加 (P＜0.01):荧光标记周长百分率+84%,矿化沉积率+32%,单位骨小梁面积骨形成率+142%,代表骨吸收的参数增加:破骨细胞数目+145% (P＜0.01)。B组与 OVX组比较:骨量显著增加(P ＜0.01)%Tb,Ar+122%;Tb,N+126%;骨的形成参数显著下降 (P＜0.01):%L.m-66%;M AR-21%;BFR/BS66%;OC,N-66%。

2.1 骨组织形态计量学静态参数指标结果

见表 1。

表1 四组骨计量学参数的变化 (±s)

表1 四组骨计量学参数的变化 (±s)

OVX组与 O RX组比较,*P＜0.05,**P＜0.01,OVX组与 B组比较,#P＜0.05,##P＜0.01。

组名 n %Tb,Ar(%) Tb,N(# /mm2)OVX 6 6.8± 1.2** 1.2± 0.13**ORX 7 21.13± 4.2 3.6± 0.6 A组 7 16.3± 2.3 4.0± 0.1 B组 6 15.2± 3.7## 2.7± 0.3##

2.2 骨组织形态计量学动态参数指标结果

见表 2。

表2 四组大鼠骨计量学动态参数的变化(±s,n=6)

表2 四组大鼠骨计量学动态参数的变化(±s,n=6)

FOVX组与 O RX组比较,*P＜0.05,**P ＜0.01,OVX组与B组比较,#P＜0.05,##P＜0.01。

组名 %L.m(%) M AR(μ m/d)OC,N(# /mm2) BFR/BS OVX 13.7± 2.3** 1.7± 0.1** 14.2± 2.3** 24.6± 5.3**O RX 7.4± 0.5 1.3± 0.2 5.8± 0.6 10.7± 1.2 A组 5.7± 0.2 1.0± 0.1 7.2± 1.5 4.0± 0.2 B组 6.1± 0.6## 1.4± 0.1## 8.3± 1.9## 4.8± 0.2##

2.3 实验性牙齿移动距离的测量结果

表3 四组大鼠牙齿移动距离的测量结果(μ m)(±s,n=10)

表3 四组大鼠牙齿移动距离的测量结果(μ m)(±s,n=10)

OVX组与 ORX组比较,*P＜0.05,OVX组与 B组比较,# P＜0.05。

1d 7d 14d 21d OVX 147± 23 159± 18 530± 30* 680± 32*ORX 145± 17 160± 18 470± 28 600± 40 A组 141± 27 140± 21 420± 21 530± 39 B组 143± 23 145± 18 414± 28# 528± 40#

3 讨论

OVX组大鼠与 ORX组大鼠及正常雌、雄对照组牙齿移动比较:OVX组大鼠与 ORX组大鼠较正常雌、雄对照组牙齿移动距离更大、更明显。同时 ,OVX组大鼠与 ORX组大鼠骨代谢率在高水平上进行,骨改建活跃,对正畸牙齿移动有明显促进作用。而同样正畸力作用下,OVX组大鼠同 ORX组大鼠相比,移动时间更早,移动速度和距离均显著快于ORX组,这与雌、雄大鼠骨代谢不同有关。说明雌激素比雄激素能更好的维持大鼠的骨量。因此,在临床中性激素在正畸治疗中应引起我们的重视。