胰高血糖素样肽-2促进细胞增殖、抑制细胞凋亡的分子机制

贾 刚 王康宁 邓秋红

（四川农业大学动物营养研究所,雅安 625014）

胰高血糖素样肽-2（glucagon-like pep tide-2, GLP-2）对大鼠、小鼠、胎猪、新生仔猪等动物的肠营养效应（intestinotrophic）主要体现在促进细胞增殖、抑制细胞凋亡和细胞保护等方面而维持细胞发育、适应的稳态,它可以通过多条细胞信号转导途径来实现对细胞增殖、凋亡的调控,并且各信号途径之间也进行着有机地整合。本文将对GLP-2促进细胞增殖、抑制细胞凋亡的效果及其分子机制作一综述。

1 GLP-2的基本性质

GLP-2是脑下垂体腺苷酸环化酶激活肽/胰高血糖素超家族成员之一,含33个氨基酸残基,分子量约为3 900 u,其氨基酸序列在哺乳动物上具有高度的同源性和保守性,丙氨酸位于氨基末端第2位,这使它易被肽末端降解酶水解。GLP-2主要在胃肠道中特异性表达并分泌,被二肽基肽酶-Ⅳ降解,由肾脏清除,半衰期为7 min,它通过与GLP-2受体（GLP-2 recep tor,GLP-2R）特异性结合而发挥生物学作用。

2 GLP-2的主要生物学作用——肠营养效应

GLP-2具有肠营养效应和调节胃酸分泌、胃排空和摄食、骨代谢等生物学功能,其中,肠营养效应是GLP-2的主要功能。GLP-2的肠营养效应主要体现在通过调节细胞增殖、凋亡及细胞保护等作用而维持肠细胞发育、适应的稳态。

2.1 GLP-2肠营养效应的发现

Gleeson等[1]发现高血糖素瘤病人有很高的肠高血糖素并促进了肠道增生,Bloom[2]研究表明肠高血糖素的肠营养效应可能归因于GLP-2。Drucker等[3]将胰高血糖素原提取物注入大鼠体内导致了肠黏膜增生,对提取物的分离发现GLP-2是促进肠黏膜增生的主要因子。Drucker等[4]、Sigalet等[5]在大鼠、小鼠上的研究表明GLP-2可以提高肠道DNA、蛋白质含量,从而使肠绒毛高度、肠重增加,进而证实了GLP-2的肠营养效应。

2.2 GLP-2肠营养效应的体现——促进细胞增殖,抑制细胞凋亡

GLP-2的肠营养效应主要体现在:增加肠道组织的重量和肠黏膜的厚度;增加绒毛的高度和隐窝的深度,调节绒毛高度/隐窝深度比值;刺激肠细胞的增殖、存活;细胞保护功能及抑制细胞凋亡等。其中后2点尤为重要。表1列出了部分GLP-2促进细胞增殖、抑制细胞凋亡的依据。

表1 G LP-2对肠道细胞增殖和细胞凋亡的影响Table 1 Ef fec ts of GLP-2 on intestinal cell proliferation and apoptosis

3 GLP-2促进细胞增殖、抑制细胞凋亡的分子机制

3.1 细胞信号转导基本通路

细胞信号转导主要研究细胞感受、转导环境刺激的分子途径及其在生物个体发育过程中细胞调节基因表达和代谢反应的机理,其主要信号转导途径如下:G蛋白介导的细胞信号跨膜转导、细胞表面受体的酶活性及其信号转导和胞质受体或细胞核受体途径等。

3.2 GLP-2的细胞信号转导机制研究进展

目前对GLP-2调节肠道细胞增殖、抑制细胞凋亡的机理的研究主要集中在3个方面:GLP-2R特性、GLP-2与GLP-2R结合后的信号转导、不同信号途径之间的整合。

3.2.1 GLP-2受体的基本性质

GLP-2R是由550个氨基酸组成的G蛋白偶联受体超家族成员之一,它主要表达于胃肠道与脑中。在胃肠道,GLP-2R主要在回肠和结肠表达,分布于小肠内分泌细胞、肠上皮细胞或上皮下成肌纤维细胞、肠神经元细胞上。Estall等[13]的研究发现: GLP-2R有7个跨膜区域;缬氨酸-64（Val-64）和苏氨酸-65（Thr-65）之间的信号肽切割位点、氨基末端N-糖基化位点、氨基末端的6个半胱氨酸残基是GLP-2R的保守特征;大鼠GLP-2R的蛋氨酸-1（M et-1）和蛋氨酸-42（M et-42）位于氨基末端跨膜区域,可能是GLP-2的识别位点;C端的444～553氨基酸残基可能起调节细胞内整合信号及受体内在化的作用。因此,GLP-2R仅能特异性地与GLP-2相结合,而对其他相关胰高血糖素原衍生肽（PGDPs）无反应。

3.2.1.1 GLP-2结合GLP-2R后对cAMP蓄积的影响

Munroe等[14]用1 nmol/L的GLP-2处理转染了GLP-2R的COS细胞,cAMP的水平比对照组上升了4倍,大约相当于10μm ol/L福斯高林的反应（图1）。用10 nmol/L的胰高血糖素样肽-1 （GLP-1）、胰高血糖素、抑胃肽（GIP）、exendin-3和其他7种B族G-蛋白偶联受体（GPCR）的配体也不能引起转染了p587-70（表达GLP-2R的片段）的细胞cAMP蓄积。在大鼠G2R细胞中cAMP对GLP-2响应的半数有效浓度为0.58 nmo l/L（图2）。W alsh等[6]也发现除GLP-2外其他胰高血糖素超家族成员也不能引起表达GLP-2R的大鼠肠黏膜细胞中cAMP水平的变化,GLP-2诱导cAMP的产生在10-11mo l/L时达到最高,之后在更高剂量时cAMP的蓄积减少。Walsh等[6]在表达GLP-2R的大鼠肠黏膜细胞上研究发现:GLP-2R的激活使GLP-2剂量依赖地激活cAMP,生理学剂量（10-11mol/L）的GLP-2以PKA依赖的方式刺激cAMP的产生和3H-脱氧胸腺嘧啶苷的整合,即刺激了小肠黏膜细胞增殖。

图1 cAMP对B族GPCR配体的肽类类似物的响应Fig.1 The cAMP response to peptide analogs o f fam ily BGPCR ligands[14]

3.2.1.2 GLP-2R的脱敏（desensitization）及复敏（resensitization）

Walsh等[6]发现先用GLP-2预处理后再次接触GLP-2,将会出现GLP-2R的脱敏现象,表现为10-9m ol/L的GLP-2处理细胞可引起cAM P的相应变化,而若在先用10-6m ol/L的GLP-2预处理细胞后的短期内,再用GLP-2处理则不能引起cAMP的浓度变化。Estall等[13]使用hGLP-2预处理表达GLP-2R的幼仓鼠肾细胞（BHK∶GLP-2R）和结肠癌上皮细胞系（DLD-1∶GLP-2R）后,发现若再接受GLP-2处理,细胞内cAMP的浓度随预处理时间-剂量依赖性地下降;用FLAG标记GLP-2R的试验显示GLP-2R快速地、剂量-时间依赖地发生内陷并从细胞表面消失,而之后内陷的受体又出现在细胞表面,cAM P的最大浓度也逐渐恢复,表明GLP-2R存在脱敏和复敏现象。这提示我们, GLP-2调节细胞增殖或凋亡的效应应该具有剂量-时间依赖性。

图2 GLP-2引起cAMP蓄积的剂量-效应关系Fig.2 Concentration-response curve for cAMP accumulation in response to GLP-2[14]

3.2.2 GLP-2结合GLP-2R后的信号转导

GLP-2能够直接作用于分布有GLP-2R的肠上皮细胞或作用于上皮下成肌纤维细胞或神经元细胞,并通过它们释放其他生长因子或神经递质间接地实现细胞调节作用（图3）。

3.2.2.1 G蛋白介导的cAMP/PKA（PKB）途径

Yusta等[16]在BHK∶GLP-2R的研究结果显示,GLP-2能激活cAMP效应元件（CRE）-β-半乳糖苷酶和活化蛋白-1（AP-1）荧光素酶,显著提高PKA和AP-1依赖式报告基因表达,并诱导即早基因IE表达,促进细胞增殖,即GLP-2影响AP-1的表达主要由cAMP/PKA介导;但AP-1的活性并不会被PKA的抑制剂H89和负抑制子M tR（AB）完全抑制,这些结果表明在BHK∶GLP-2R细胞中GLP-2不止激活PKA和AP-1旁路,还存在不依赖PKA的一条或多条未确认的旁路与GLP-2诱导的即早基因的表达和促有丝分裂的激活相偶联;同时,该试验测定了Ca2+水平的变化,发现GLP-2不能引起细胞Ca2+的改变,表明GLP-2促进细胞增殖可能与磷脂酶C（PLC）/Ca2+途径无关。W alsh等[6]在体外利用表达GLP-2R的大鼠肠黏膜细胞培养模型,结果发现GLP-2R的激活使GLP-2剂量依赖地激活cAMP,生理学剂量的（10-11mol/L） GLP-2以PKA依赖的方式刺激cAMP的产生和3H-脱氧胸腺嘧啶苷的整合,即刺激了黏膜细胞增殖,与Y usta等[16]的结果相类似,研究还发现内源的GLP-2R不与Ca2+途径相偶联,最重要的是,在体外培养细胞中也不与p44/p42促分裂原活化蛋白激酶（p44/p42MAPK）途径相偶联。以上研究结果表明GLP-2主要是与G蛋白偶联受体GLP-2R相结合,刺激cAMP的产生,激活PKA的细胞信号转导途径调节细胞发育。

图3 肠道L细胞受养分刺激后释放的GLP-2通过旁分泌或自分泌的方式作用于表达GLP-2R的邻近细胞Fig.3 Upon release of GLP-2 from the intestinal L cells after nutrient ingestion,the pep tide hormone is believed to act in a paracrine or endocrinemanner on neighboring cells expressing the GLP-2 receptor[15]

GLP-2/GLP-2R信号参与经典的G蛋白介导的细胞信号转导,它通过偶联Gαs激活腺苷酸环化酶（AC）,从而增加cAM P和PKA蓄积,最终激活转录因子ELK-1、引起c-fos、c-jun基因的表达,从而促进细胞增殖;然而,将细胞用百日咳毒素（Gαi抑制剂）预处理后,作为细胞增殖标记的脱氧胸腺嘧啶苷的整合率受到显著抑制,细胞增殖降低与cAMP蓄积的减少之间存在显著相关关系[17]。许多研究都表明高剂量的GLP-2才有利于细胞增殖,但Estall等[13]研究表明高剂量的GLP-2会使GLP-2R脱敏,使得cAM P的蓄积降低,这提示我们GLP-2促进细胞增殖需要cAMP的浓度在适当的范围内。同时,cAMP/PKA细胞信号转导途径虽然是GLP-2引起细胞增殖的主要途径,但应该还存在其他旁路作为补充。

另外,cAMP/PKA信号可能还参与了GLP-2抑制细胞凋亡的作用。Yusta等[18]在体外以BHK∶GLP-2R为模型发现,放线菌酮可抑制细胞的生存力,使DNA分解、细胞凋亡增加,而用GLP-2与福斯高林处理则可使这些参数都得到改善,降低caspase-3的活性,减少细胞色素C（CytC）从线粒体中释放,降低多聚聚合酶被剪切的量,使细胞核DNA完整性增加。随后,Y usta等[19]在BHK∶GLP-2R中的研究显示,GLP-2的抗凋亡作用不需要磷脂酰肌醇-3激酶（PI-3K）下游Ak t、p90Rsk、p70S6等激酶的参与,因为在它们不存在的情况下,LY 94002处理后GLP-2也能减少caspase活性及Cyt C的释放;GLP-2抑制凋亡是通过PKA依赖式旁路调节磷酸化促凋亡分子（Bad）表达,并磷酸化糖原合成激酶（GSK）-3α的21位的丝氨酸（Ser）和GSK-3β的Ser9抑制GSK-3的活性实现的（图4）。与Yusta等[18]的研究相同的是,福斯高林能模拟GLP-2抑制LY 294002引起的细胞凋亡,提示cAMP的蓄积对于GLP-2抑制细胞凋亡作用的实现是必需的,GLP-2抑制细胞凋亡的途径可能经由cAMP/PKA/CytC/caspase-3介导。

图4 GLP-2以依赖PKA的方式通过Bad和GSK-3调节LY294002相关的细胞存活Fig.4 GLP-2 regu lates LY 294002-associated cell survival in a PKA-dependentmanner via Bad and GSK-3[19]

Dube′等[20]研究表明,肠黏膜中Akt的激活参与了GLP-2的抗凋亡效应。Koehler等[21]在Hela细胞凋亡研究中发现,GLP-2通过Gαs/cAMP激活PKA信号途径,抑制PARP的分解,促进GSK-3β的磷酸化,这与Yusta等[19]在BHK∶GLP-2R中的结果一致,使用细胞外信号调节激酶1/2（ERK 1/2）的抑制剂PD98059不能影响GLP-2抑制细胞凋亡的效果,表明GLP-2抗凋亡作用可能不依赖ERK 1/2信号途径。

Burrin等[8]报道GLP-2在新生仔猪肠上皮中激活Akt后伴随着细胞凋亡信号的减少,Dube′等[22]在小鼠的研究结果表明GLP-2能时间-剂量依赖性地激活小肠黏膜的隐窝及绒毛细胞的Akt信号,伴随caspase-3的分解增加,其下游靶蛋白GSK-3β的磷酸化增加,具有促细胞增殖作用的胰岛素样生长因子-1（IGF-1）并不参与GLP-2对Akt的作用。Burrin等[23]在新生仔猪上也观察到GLP-2能快速激活GLP-2下游信号,包括磷酸化PKA或PKB、ERK 1/2、转录因子cAMP反应因子连接蛋白和c-fos,快速抑制caspase-3活性,上调Bcl-2丰度,而凋亡抑制因子（XIAP）和细胞凋亡抑制子-2（cIAP-2）也分别在1 h和4～48 h内增加。结果表明GLP-2能快速上调caspase-3的上游目标基因（如Bcl-2和IAPs）的PKA/PKB/GSK-3磷酸化作用,抑制caspase-3的活性,实现对细胞抗凋亡的调节。

以上结果表明G蛋白偶联的cAMP/PKA经典途径是GLP-2调控细胞增殖、凋亡的主要途径,但是其调节细胞增殖和凋亡的下游信号通路存在差异,而且不排除还存在其他途径对其进行补充。

3.2.2.2 W ingless（W nt）/β-连环蛋白（β-catenin）和PI-3K/Ak t（PKB）途径

调节肠隐窝细胞和上皮细胞增殖、分化、存活及功能发挥还有2条经典的细胞信号转导途径:对隐窝细胞增殖和分化起重要作用的W nt/β-catenin信号途径[24]和影响上皮细胞存活和功能发挥的PI-3K/Akt（PKB）途径。

小肠自我更新的能力依赖于干细胞的存在。许多研究证明W nt信号途径是干细胞维持增殖与凋亡动态平衡的关键,是调控细胞沿隐窝-绒毛轴进行分化的主导因素[25]。而β-连环蛋白是W nt信号途径的重要成员。

GLP-2R不能在隐窝干细胞中表达,这使得要和GLP-2R结合才能发挥作用的GLP-2需要通过其他介质间接地促进隐窝细胞的增殖。Bjerknes等[26]在小鼠上通过免疫组织化学和原位杂交的研究显示,小鼠隐窝细胞不表达GLP-2R,GLP-2很可能是通过旁分泌的方式,与上皮下成肌纤维细胞上的GLP-2R结合发挥作用的。ørskov等[27]研究发现GLP-2可能直接作用或者经由肠内分泌细胞、其他黏膜细胞或肠神经细胞分泌的因子介导间接作用于肠上皮细胞。进一步的试验表明,长期使用GLP-2诱导小肠生长和隐窝细胞增殖的机制可能是由IGF-1介导的（图5）。它通过诱导肠肌纤维细胞产生IGF-1,IGF-1以旁分泌方式诱导位于上皮隐窝细胞的IGF-1R表达,通过一条PI-3K依赖式旁路启动β-连环蛋白信号,并激活Ras,抑制GSK-3β,增加核中β-连环蛋白的积累[28],调控下游目标基因c-myc的表达,最终促进上皮细胞增殖。Dube′等[22]在小鼠上急性使用GLP-2显著促进了小鼠空肠非潘式隐窝细胞的β-连环蛋白的表达和增殖;而使用IGF-1R抑制剂（NVP-AEW 541）阻断IGF-1信号转导途径后,GLP-2促进β-连环蛋白表达的程度降低,而对于IGF-1基因敲除小鼠,GLP-2没有促进β-连环蛋白的表达增加,表明GLP-2促进小肠上皮增殖层细胞β-连环蛋白的表达需要经过IGF-1介导。由此可以推断,GLP-2通过IGF-1介导调控β-连环蛋白而参与Wnt信号的调节作用（图6）。

图5 调节肠道生长过程中GLP-2与IGF-1互作的示意图Fig.5 Schematic represen tation o f interactions between GLP-2 and IGF-1 in the regulation of intestinalgrow th[22]

GLP-2是如何通过另一条调节上皮细胞增殖、存活的经典细胞信号转导途径PI-3K/Akt（PKB）来影响细胞发育的呢?

Anini等[30]研究表明PI-3Kγ对小肠黏膜的基础生长有重要作用,而且如上文提到的,PI-3K/Akt信号也参与了IGF介导的GLP-2促隐窝细胞增殖的作用。近年发现PI-3K/Akt通路还可调节内皮型一氧化氮合酶（eNOS）的活性,活化的Akt可使eNOS磷酸化激活,可能主要调节肠道供血的变化。Akt除被PI-3K活化外,能被多种Akt活化因子激活,且活化后能调节细胞多种生物学功能,包括细胞周期、发育、凋亡和存活。

图6 隐窝细胞增殖和分化调控的整合模型Fig.6 Integrated model for control o f crypt cell proliferation and dif ferentiation[29]

Dube′等[22]研究了GLP-2对Akt/PKB信号的作用,发现GLP-2呈时间剂量依赖地诱导Ak t的磷酸化,随着Ak t的磷酸化,其下游分子GSK-3β磷酸化增加,caspase-3激活比例降低,并且Ak t的磷酸化出现在整个小肠黏膜中,包括隐窝细胞核绒毛上皮细胞,说明Ak t响应GLP-2的刺激并不在隐窝中特异产生;GLP-2激活pAkt的效应可被PI-3K的抑制剂——渥曼青霉素（wortmanin）阻断;使用IGF-1R抑制剂（NVP-AEW 541）阻断IGF-1信号转导途径后,GLP-2的效应削弱;GLP-2显著提高了敲除IGF-1基因鼠的pAkt的磷酸化效应,表明具有促细胞增殖作用的IGF-1与GLP-2对Akt的激活并不是严格必需的,试验也不能排除其他Akt激活因子参与对GLP-2促细胞存活或其他作用的调节,这与前文提到的GLP-2通过cAMP/PKA/PKB抑制细胞凋亡的作用相一致。

3.2.2.3 GLP-2通过ERK 1/2信号途径直接促进上皮细胞增殖

MAPK家族包括ERK 1/2、c-jun N端激酶（JNK）/应激活化蛋白激酶（SAPK）、p38及ERK5等。其中,ERK 1/2信号通路（Ras/Raf/MEK 1/2, ERK 1/2）是经典的MAPK信号转导途径。

Yusta等[16]报道20 nmo l/L的GLP-2没有增加ERK 1/2的磷酸化,反而降低了ERK的基础磷酸化水平;当抑制PKA时,ERK 1的下游信号ELK-1表达升高。Walsh等[6]用表达有GLP-2R的大鼠肠黏膜细胞为模型发现,GLP-2以PKA依赖的方式刺激cAMP的产生,并使3H-脱氧胸腺嘧啶苷整合到细胞中,即刺激了黏膜细胞增殖,与Yusta等[16]结果相似,在培养细胞中GLP-2的信号转导也不与p44/p42MAPK途径相偶联,说明MAPKs的p44/p42信号途径可能是PKA的补充。

Jasleen等[31]报道利用10 mm ol/L GLP-2刺激人肠上皮细胞株Caco-2约5 m in发现,细胞内ERK1、ERK 2活化形式明显增加,肠上皮细胞的增殖反应增加了10倍。用MAPKK（M EK）抑制剂PD98059以剂量依赖性方式阻断GLP-2的促细胞增生作用,证实GLP-2通过激活MAPK信号转导通路,诱导肠上皮细胞增生。同样的,Jasleen等[32]在人Caco-2的研究表明GLP-2促进细胞增殖伴随着ERK磷酸化的瞬间升高,这种反应会被MAPKK抑制剂PD 98059所阻断。

Koehler等[21]在Hela细胞上也发现,GLP-2介导ERK 1/2的激活不会通过减少GLP-2R cDNA的转染而消除,也不受因Gαs激活而导致cAMP的蓄积途径或表皮生长因子受体（EGFR）途径受影响,而ERK 1/2对百日咳毒素敏感是因为百日咳毒素能通过Gi/Go蛋白α亚基ADP核糖基化作用使这些G蛋白与GDP结合,阻碍Gi/Go蛋白介导的信号,从而降低GLP-2对ERK 1/2的磷酸化作用。β-肾上腺素能受体激酶可分离βγ亚基从而抑制Gβγ介导的信号,试验中它抑制了GLP-2诱导的ERK1/2的磷酸化;并且GLP-2诱导的ERK 1/2的磷酸化还被下调Ras基达的表达所抑制。以上结果表明在Hela中GLP-2可能部分通过偶联G蛋白的βγ亚基激活Ras/Raf/MAPK旁路,进而调控细胞增殖的,然而Gi/Go蛋白激活后通过何种途径激活Ras/Raf/MAPK信号的还不清楚。PI-3K是由调节蛋白p101和催化亚基p110γ组成的异二聚体,介导G蛋白偶联受体βγ亚基对p101的活化,即它会被GPCR激活,对M APK的活化与丝裂原刺激导致的细胞增殖有关（图7）,这是否提示我们PI-3K的亚型ⅠB可能参与了该过程的衔接呢?这还有待于研究。

3.2.2.4 其他的信号途径——钙离子介导的信号通路

细胞转染GLP-2R后,GLP-2促进了cAM P的蓄积,然而GLP-2没有促进细胞内Ca2+的增加（Yusta等[16]、W alsh等[6]）,表明GLP-2信号作用的转导可能不经过Ca2+通道,但是否经过细胞质受体或细胞核受体介导,目前尚未见相关研究报道。

图7 GLP-2R信号旁路在Hela细胞上的模型Fig.7 Model for GLP-2R signaling pathw ays in Hela cells[21]

3.2.3 GLP-2调节细胞信号转导途径的整合

3.2.3.1 PKA/PKB介导的细胞信号转导途径的整合

Yusta等[19]发现当抑制PI-3K活性时,GLP-2主要通过PKA途径改变GSK-3和Bad蛋白的表达来调节细胞的成活和增殖,据此推测,cAMP/PKA和PI-3K/Ak t（PKB）是可以整合的。用LY 294002抑制PI-3K活性,GLP-2也能使细胞凋亡减弱,细胞活力升高,但不如添加福斯高林的效应明显,表明LY 294002抑制了Akt的表达,GLP-2和福斯高林都能减轻LY 294002引起的Cy tC的释放和caspase蛋白的活化。GLP-2、福斯高林使细胞活力提高的效应可被H 89和M tR（AB）抑制,因此PKA可能参与GLP-2对细胞凋亡的调节。进一步研究没有LY 294002抑制PI-3K时,GLP-2和福斯高林没有介导Akt的磷酸化,Akt的下游信号蛋白p70 S6K的表达没有变化,提示我们GLP-2防止细胞凋亡的信号途径可能不经过Akt转导。GLP-2和福斯高林诱导的影响细胞凋亡的GSK-3活性变化和Bad蛋白Ser155的磷酸化过程是依赖于PKA途径、独立于PI-3K途径的。

3.2.3.2 PKA/PKC/EGFR/受体酪氨酸蛋白激酶（TyrK）信号途径的整合

GLP-2的细胞信号转导由G蛋白所介导,它偶联Gαs,激活AC后增加cAMP和PKA蓄积,最终激活ELK-1、c-fos、c-jun基因,增加细胞增殖;然而,将细胞用百日咳毒素（Gαi的抑制剂）预处理后,作为细胞增殖标记的脱氧胸腺嘧啶苷的整合显著受到抑制（图8）[17]。对图8（B）的解释为:使用百日咳毒素或MAPK阻断剂发现细胞对胸苷的摄取减少（细胞增殖受到抑制）,表明Gαi抑制剂或EGFR/TyrK旁路可能参与了GLP-2的作用,并且还提示我们cAMP的水平降低与细胞增殖有关。

图8 GLP-2促进细胞增殖的信号转导旁路Fig.8 The signal transduction pathw ay of G LP-2 stimulating cell p roliferation[17]

Hare等[33]研究发现GLP-2能够抵消表皮生长因子（EGF）-酪氨酸激酶抑制剂引起的肠道发育迟缓和萎缩;添加GLP-2没有使肠黏膜的发育完全恢复,提示GLP-2的信号途径可能部分经过表皮生长因子-酪氨酸激酶途径,GLP-2与表皮生长因子有协同效应。

4 小 结

GLP-2能通过影响细胞信号转导途径中的关键基因的表达和蛋白质的激活而参与肠黏膜细胞增殖、凋亡的调节:GLP-2促进肠细胞增殖、抑制细胞凋亡主要通过G蛋白偶联的经典信号途径cAMP/PKA进行调节;对于隐窝细胞的增殖则主要通过旁分泌作用于能表达GLP-2R的成肌纤维细胞或神经细胞,通过IGF-1调节Wnt/β-连环蛋白信号途径间接促进隐窝细胞增殖;另外,PI-3K/Ak t信号也作为补充信号途径参与了调节;最后,GLP-2还可以通过激活Ras/Raf/MAPK/ERK 1/2信号途径影响细胞信号转导。

总的说来,GLP-2的调节细胞增殖或凋亡的效应依赖于GLP-2R分布的细胞位置、类型和数量,但可能也存在不经GLP-2R介导的途径[34]。而且关于GLP-2的细胞信号转导途径虽然取得了一定进展,但总体上仍然尚未完全明确,例如GLP-2介导NO引起的血管舒张,涉及到Ca2+和环化一磷酸鸟苷（cGMP）通道,但相关的研究表明GLP-2似乎并不参与Ca2+和cGMP的调节;GLP-2的主要信号途径之间是如何整合的,整合的关键调控点及反馈抑制是什么也需要我们进一步的研究。

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*Correspond ing au thor,p rofessor,E-m ail:w kn@sicau.edu.cn

（编辑 何丽霞）