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中药天年饮对衰老大鼠脑甘氨酸含量的影响

2010-04-17温海青

承德医学院学报 2010年2期
关键词:抑制性附表皮质

王 瑛,温海青

(1.承德军分区干休所卫生所,河北承德 067000;2.承德医学院)

脑老化过程中的一个突出表现就是学习记忆能力的减退[1]。学习记忆是脑的重要功能之一,其过程中伴随着复杂的神经生理和生物化学变化;学习记忆的物质条件是脑内蛋白质的合成,而蛋白质合成的基础是脑内各种氨基酸的合理组合和平衡。本研究观察了中药天年饮对衰老大鼠脑抑制性氨基酸甘氨酸(glycocine,Gly)含量的影响,探讨天年饮延缓脑老化的作用机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物的选择及分组 实验选用30只SD大鼠,雌雄各半,体重180-250g。将大鼠随机分为3组,正常组、衰老模型组和天年饮用药组,每组10只。正常组大鼠不作任何处理。模型组和用药组大鼠均采用D-半乳糖连续腹腔注射(200mg/kg,40d)制作亚急性衰老的动物模型;模型组大鼠造模成功后不再做任何处理;用药组大鼠造模成功后每天用天年饮灌胃,共30天。

1.2 药品与试剂 天年饮由灸何首乌、怀牛膝、肉从蓉、淫羊藿、丹参、茯苓等六味中药组成,熬制后每ml含生药1.5g,按16.2g/kg灌胃给药。D-半乳糖(D-gal)由北京化学试剂公司生产(批号:020402),Gly标准品购自美国Sigma公司。

1.3 氨基酸类神经递质含量的检测 大鼠断头处死,迅速取出全脑后置于冰盘上,分别取海马、皮质,投入液氮中速冻,然后移入-80℃冰箱保存待测。待检测时,分别取出海马、皮质,准确称重后置于预冷的生理盐水中,冰浴下匀浆,4℃下12000r/min离心10min;取上清液加入等量乙腈后,4℃下12000r/min离心10min,取上清液采用高效毛细管电泳法检测脑组织中氨基酸的含量[2]。

2 结果

见附表。与正常组大鼠相比,衰老大鼠皮质、海马Gly的含量明显降低(P<0.01);中药天年饮可明显提高衰老大鼠皮质、海马Gly的含量,用药组与衰老模型组比较:P<0.01。

附表 大鼠皮质、海马Gly的含量(n=10±s,μmol/g)

附表 大鼠皮质、海马Gly的含量(n=10±s,μmol/g)

与模型组比较:*P<0.01

组别 皮质 海马正常组3.41±0.53*2.64±0.42*衰老模型组2.53±0.251.83±0.32天年饮用药组3.32±0.43*2.36±0.40*

3 讨论

衰老时,机体的抗氧化防御体系活性降低,体内活性氧生成过量,再加上脂质过氧化产物(如丙二醛、脂褐素等)的堆积,它们攻击位于线粒体内膜上的脂类、蛋白质和mtDNA,影响线粒体的功能,进而导致急性神经元损伤和迟发性神经元损伤[3]。Gly是人体内的一种非必需氨基酸,可通过减少自由基的产生、调节炎性介质的生成、抑制酶的活性等直接或间接的保护组织细胞[4-5]。因此,衰老时Gly含量的下降进一步导致机体的抗氧化能力减弱,从而引发一系列的病理生理变化,最终导致神经元的损伤、凋亡,出现记忆力下降、认知障碍、思维迟缓等脑老化的表现。

天年饮是由刘河间《宣明论方》何首乌丸加味而成的,诸药相配通调心脾肝肾四脏,而以肾为主。本研究发现,中药天年饮可明显提高衰老大鼠大脑皮质、海马抑制性氨基酸Gly的含量。抑制性氨基酸含量的增加,可通过减少自由基的产生、调节炎性介质的合成和抑制酶的活性直接保护脑细胞。因此,我们认为中药天年饮可促进衰老大鼠脑内抑制性氨基酸的合成及代谢,改善神经细胞的功能,从而达到延缓脑衰老的目的。

[1]Mothet JP,Rouaud E,Sinet PM,et al.A critical role for the glial derived neuromodulator D-serine in the age related deficits of cellular mechanisms of learning and memory[J].Aging Cell,2006,5(3):267-274.

[2]沈佐君,李小鹏,孙增培,等.一种新的氨基酸测定衍生化方法[J].基础医学与临床,1998,18(4):315-320.

[3]Butt AM.Neurotransmitter-mediated calcium signaling in oligodendrocyte physiology and pathology[J].Glia,2006,54(7):666-675.

[4]Torrie LJ,MacKenzie CJ,Paul A,et al.Hydrogen peroxidemediated inhibition of lipopolysaccharide-stimulated inhibitory kappa B kinase activity in rat aortic smooth muscle cells[J].Br J Pharmacol,2001,134(2):393-401.

[5]Grotz MR,Pape HC,Van Griensven M,et al.Glycine reduces the inflammatory response and organ damage in a twohit sepsis model in rats[J].Shock,2001,16(2):116-121.

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