獐牙菜三萜化学成分研究

南京市溧水县人民医院（211200）施能胜

獐牙菜Swertia bimaculata龙胆科（Gentianaceae）属植物( Swertia）约有170多种, 我国占80多种[1]。 獐牙菜中獐牙菜苦苷、齐墩果酸等有效成分含量在同属植物中含量较高，验证了民间的应用[2]。本实验对该植物进行了进一步化学成分研究，为阐明其有效成分提供临床依据。

1 仪器与实验材料

熔点测定使用XT4双目镜视显微熔点仪测定（温度计未校正）；红外光谱用N ICOL ET Impact 410型红外光谱仪测定（KB r 压片）；核磁共振用BRU KER ACF–300/500 型核磁共振仪测定，CDCl3、CD3OD、C5D5N、DMSO-d6为溶剂，TMS为内标；EI- MS（70eV），ESI- MS用MSO1SPC.System 型质谱仪测定；所用薄层层析、柱层析硅胶均为青岛海洋化工厂生产；高效薄层预制板为烟台市化学工业研究所烟台化工科技开发实验室厂生产；Sephadex LH -20为Pharmacia 公司产品。显色剂用香草醛浓硫酸试剂和5%硫酸乙醇溶液;所用溶剂除注明外，均为分析纯。獐牙菜购自安徽亳州，经江苏省中国科学院张涵庆研究员鉴定为Swertia bimaculata。

2 提取与分离

取獐牙菜10kg，粉碎后用85%乙醇加热回流提取3次，减压回收溶剂得流浸膏约300g，分别用石油醚、醋酸乙酯和正丁醇萃取。取醋酸乙酯萃取物（180g）经反复硅胶柱色谱（石油醚-醋酸乙酯和氯仿-甲醇溶剂系统）、Sephadex LH-20（氯仿-甲醇溶剂系统）凝胶柱色谱得到化合物1（45mg,化合物 2（19mg），化合物 3（35mg），化合物4（20mg），化合物5（9mg），化合物6（9mg）。

3 鉴定

化合物1 白色无定型粉末, ESI-MS m / z：457 [M + H]+；1H-NMR （CDCl3, 500MHz）δ: 5.12（1H, s, H-12），3.99 （1H, m, H-3），2.10 （1H，dd，J = 3.0，10.8 Hz, H-18）, 1.08，0.91，0.86, 0.84，0.80，0.74，0.67（21H, 7×CH3）。与文献[3]数据基本一致，确定为齐墩果酸。

化合物2 白色粉末（甲醇），mp 260～261 ℃。ESI-MS m / z 457 [M + H ]+。NMR数据与文献[4]对照，鉴定化合物1为乌苏酸。

化合物3α -香树脂醇乙酸酯(α-amyrin acetate白色针状结晶（氯仿-醇），mp216 ～ 219 ℃, ESI-MS m / z: 469 [M + H ]+, 1H-NMR ( CDCl3 , 500M ) δ: 4. 51 ( 1H, dd, J =6. 0, 10. 2 Hz, H-3) , 5. 11 (1H, t, J = 4. 2 Hz, H-12) , 2. 05 ( 3H, s, COCH3 ) , 1.08, 1.02, 1.01,0.97, 0.93, 0.86, 0.82, 0.78 ( 24H, 8 ×CH3 ) ; 13 C-NMR（CDCl3, 150MHz）。与文献数据基本一致，确定为α-香树脂醇乙酸酯。

化合物4 无色粉末, ESI-MS m / z: 425 [M +H ]+，447 [M +Na ]+，1H-NMR（CDCl3, 500M）δ: 5. 21 (1H, t, J = 4. 2 Hz, H-12) ,1.15, 1.10, 1.05, 1.03, 0.98, 0.88, 0.86, 0.83（24H, 8 ×CH3 ）；13C-NMR (CDCl3, 125 MHz)。与文献数据基本一致，确定为β-香树脂酮。

化合物5 白色粉末(甲醇)，mp 122-123℃。ESI-MS m / z 473 [M + H ]+。1 H2NMR (C5D5N, 500MHz) δ: 5.58 ( 1H, br s, H-12) , 3.63 (1H, dd, Jaa =11.5 Hz, Jae = 5.2 Hz, H-1) , 3.40 (1H, dd, Jaa = 11.6Hz, Jae = 5.0 Hz, H-3) , 1.37，1.32，1.12，1.11，0.95（each 3H, s, 5-CH3 ) , 1109 (3H, d, J = 7.2 Hz, H-30) ,1.03（3H, d, J = 6.5 Hz, H229）。13 C-NMR（C5D5 N,125MHz）δ: 78.8（C-1）, 30.9（C-2），78.1（C-3），39.0（C-4），55.9（C-5）, 19.8（C-6），34.3（C-7），40.0（C-8），46.7（C-9），38.6（C-10），23.9（C-11），124.1（C-12）, 140.9（C-13），42.3（C-14，28.2（C-15），2612（C-16 )，48.2（C-17），52.8（C-18）, 39.4（C-19），39.8（C-20），31.0（C-21 , 37.5（C-22），28.4（C-23）, 16.6（C-24），18.5（C-25），17.7（C-26）, 24.8（C-27）, 180.3（C-28），18.5（C-29），22.6（C-30）。与文献对照，鉴定为1β，3β-二羟基-12-烯-28-乌苏酸。

化合物6白色粉末(甲醇)，mp 283～285 ℃。ESI-MS m / z 505 [M + H ] + 。1H-NMR （CD3OD, 500MHz）δ: 5.30（1H, m, H.12）, 4.35 ～3.45（4H, m,H-23a, 23b, 3, 2）, 2.51 1H,s,H-18）, 1.30, 1.30,1.18, 1.05, 1.05,（each 3H, s, 5-CH3），0.92 (3H,d,J = 6.7 Hz, H-30)。13C-NMR （CD3OD, 125MHz）δ:44.4(C-1 ), 69.1(C-2 ), 82.8（C-3），43.4（C-4），50.1(C-5), 18.0(C-6 )，34.0（C-7）, 41.8（C-8），48.7（C-9）， 40.5(C-10), 27.4（C-11），130.0(C-12), 139.6（C-13）, 42.0 （C-14）, 29.7（C-15）, 27.6（C-16）, 49.9（C-17) , 55.4（C-18）, 74.4（C-19 ），43.3（C-20), 27.9 (C-21), 39.3(C-22), 67.3（C-23），25.1（C-24），18.8（C-25），14.4（C-26），24.9（C-27）， 182.5（C-28），25.3（C-29），16.9（C-30）。与文献对照,鉴定为2α, 3β, 19α, 23-四羟基-12-烯-28-乌苏酸。