妊娠期阴道出血时血红蛋白F(HbF)对鉴别母体血与胎儿血的作用研究

曾 选 ，习永生，甘雪华 ，丁洪慧，陆 瑶

(1、江西省妇幼保健院检验科，江西 南昌 330006；2、江西省肿瘤医院放射科，江西 南昌 330029)

胎儿的红细胞最主要含有血红蛋白F(HbF)(＞99%)，而成人红细胞中大部分为血红蛋白A(HbA)，血红蛋白F含量＜1%。由于血红蛋白F抗碱和抗酸能力很强，应用洗脱和染色方法可使HbF呈鲜红色，含其它血红蛋白的红细胞只留下淡影的细胞膜，利用此方法不仅能区别含HbF的红细胞，而且能定量分析含HbF的红细胞比例，为准确诊断妊娠期孕妇阴道出血是否有胎儿血，供临床医生采取及时正确治疗措施提供诊断依据。现把实验结果报告如下。

1 材料和方法

1.1 对象 2008年3月份到2010年6月份由于妊娠期阴道出血到我院就诊的门诊或住院孕妇113例，怀孕21周至临产。

1.2 试剂和仪器 80%乙醇、酸性缓冲液、苏木素染色液、伊红染液。OLYMPUS CX21型光学显微镜。

1.3 方法 严格按照全国临床检验操作规程第三版要求操作[1]。无菌采集孕妇阴道流出血，用枸橼酸钠抗凝，制备血涂片，自然干燥1h，用80%乙醇固定5分钟，水洗干燥后进行酸洗脱和染色。干燥后在油镜下观察和计数，含有HbF的红细胞呈鲜红色为阳性，只留下淡影的细胞膜为阴性。

2 结果

通过检测113例妊娠期阴道出血的孕妇阴道血HbF红细胞，4例HbF红细胞比例＞17%，说明胎儿在宫内有出血现象，其中1例孕周33+4周的孕妇其阴道血含HbF红细胞比例达到71%，送院前阴道已出血，胎心音异常，2小时后胎心消失，胎儿因失血而很快死在宫内，经B超证实胎儿已死亡，失去抢救胎儿的机会。另外3例诊断及时，孕周大于35周，立即终止妊娠，行剖宫产手术，新生儿及时抢救，得以存活。其余109例HbF红细胞比例＜6%，结合临床指针、胎心监护、B超等检查诊断阴道出血不是胎儿血。

3 讨论

正常胎儿血的红细胞特点为整个胚胎发育过程中，胎儿造血系统一直处于活跃状态。随胎龄的增加，胎血中的血红蛋白含量逐渐升高。胎儿第一代红细胞的形成主要在卵黄囊的血岛[2]，人胚卵黄囊造血功能持续8～12周；妊娠第4周肝脏开始造血。红细胞发育过程中形态变化由大到小。正常人因不同发育时期，红细胞中的Hb类型有所不同，由胚胎型Hb向胎儿型血红蛋白,最后向成人型Hb转换[3]。直到胎儿出生时HbF仍为脐血Hb的主要成分。胎儿的红细胞最主要成份血红蛋白F(HbF)含量＞99%，而成人红细胞中大部分为血红蛋白A(HbA)，血红蛋白F含量＜1%孕妇自身患有再生障碍性贫血、溶血性贫血、β珠蛋白生成障碍性贫血等血液病以及在怀孕过程中出现的胎儿-母体输血均会引起母体外周血出现少量的HbF红细胞，在阴道出血时即使没有胎儿血经洗脱和染色后乃有少量阳性红细胞，造成难以诊断，笔者采取在取阴道血的同时采集母体外周血一份一同做HbF检测，如果阴道血的HbF红细胞含量大于外周血的HbF红细胞，即可诊断有胎儿血；阴道血的HbF红细胞含量与母体外周血持平，结合临床指针、胎心监护、B超等检查可排除胎儿宫内失血。

妊娠期阴道出血是否含有胎儿血，胎儿血红蛋白是诊断的决定性因素[4]，对于临床处理病情起到十分关键的作用。笔者通过2年多的时间对113例阴道出血的孕妇进行HbF红细胞的检测，其结果与临床诊断和病人病情一致。妊娠期阴道出血时检测出含胎儿血 (阴道血HbF红细胞含量高于外周血)，说明胎儿在宫内有出血现象，结合B超诊断，如果提示胎儿还活着，孕周大于35周，立即行剖宫产以结束妊娠，挽救孕妇和胎儿的生命为第一。经检测阴道血为母体血，不含胎儿血，妊娠在35周前，胎儿未达到成熟，阴道出血量不多，情况稳定的孕妇可采取期待疗法进行治疗。

HbF的洗脱和染色方法以及抗碱试验，可快速确定母体血中是否含过多胎儿红细胞，有助于对分娩前胎儿晚期出血做出迅速判断[5]，为鉴别妊娠期阴道出血时是否含有胎儿血提供诊断依据。该方法操作简便、检测快速、结果准确、方便开展，对临床帮助很大，为临床医生采取准确、果断治疗措施提供依据，降低胎儿和孕产妇死亡率意义非常大。

[1]叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].第3版,南京:东南大学出版社,2006:184-185.

[2]戴旻笙,傅庆诏,陈菊芳,等.血红蛋白F及红细胞直径测定及意义[J].中华妇产科杂志,2000,35(4):234-235.

[3]沈柏均主编.人类脐血:基础与临床[M].天津:天津科学出版社,1995:16.

[4]段如麟,陈解民,徐增祥.妇产科急症学[M].第1版,北京:人民军医出版社,1998:45.

[5]程 伟.人胎儿血红蛋白的检测及其临床意义[J].中国实验诊断学,2009,13(10):1474-1475.