平江白术多糖对腺嘌呤致大鼠肾衰模型的保护作用

冯 星，邱细敏，黄亚林，刘雄志，黎 赛，郑 妮

(1.湖南师范大学医学院，湖南 长沙 410006；2.南方医科大学珠江医院，广东 广州 510515)

平江白术多糖对腺嘌呤致大鼠肾衰模型的保护作用

冯 星1，邱细敏1，黄亚林1，刘雄志1，黎 赛1，郑 妮2

(1.湖南师范大学医学院，湖南 长沙 410006；2.南方医科大学珠江医院，广东 广州 510515)

目的：探讨白术多糖对腺嘌呤诱发的慢性肾功能衰竭大鼠肾脏的保护作用。方法：采用腺嘌呤灌胃复制大鼠慢性肾衰模型，将大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、地塞米松组、白术多糖高剂量组、白术多糖低剂量组。给药结束后，代谢笼动物单独喂饲，收集12h尿液，期间禁食禁水，测定总尿量、尿素(BUN)、尿肌酐(CR)、12h尿蛋白(24hU-TP)含量，并测定肾功能指标。结果：与模型对照组比较，白术多糖低剂量组和白术多糖高剂量组BUN水平明显降低(P＜0.01或P＜0.05)，双肾系数明显下降(P＜0.01或P＜0.05)。结论：白术多糖对腺嘌呤诱发的慢性肾功能衰竭的大鼠肾脏具有一定的保护作用。

白术多糖；腺嘌呤；大鼠；慢性肾衰；尿素；肾脏系数

白术为菊科植物，味苦、甘；性温；归胃、脾经[1]；有利尿、抗肿瘤、抗菌、消炎、抗糖尿病、抗衰老等作用[1-10]。平江白术又名“冬术”、“于术”，盛产于平江县三阳、安定、嘉义、长寿、金龙、钟洞等地区，故称为平术或平白术[11-12]。白术作为一种重要的中药材，在平江县已有400多年人工栽培历史，久负盛名。明代嘉靖《岳州府志》载：“平江产有白术(以紫花者为上)”。由此可见，平白术早已是平江的传统地方特有珍贵中药材。药理研究发现白术多糖具有调节免疫功能和抗肿瘤的作用。研究证实白术可呈现显著和持续的利尿作用，其有效成分为β桉叶油醇，能很强地抑制Na+-K+-ATP酶的磷酸化反应。本实验对湖南平江产白术——平白术进行研究，着重研究白术多糖对腺嘌呤致大鼠肾衰竭有显著的保护作用，观察不同浓度的白术多糖对肾衰竭大鼠肾功能的影响，为白术多糖的进一步开发提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

表1 白术多糖对腺嘌呤致CRF大鼠肾功能的影响Table 1 Effect of AP on renal function of rats induced by adenine

白术多糖，由湖南师范大学医学院药学系邱细敏教授提供，采用70%乙醇溶液提取碱沉法，临用前用生理盐水超声溶解；健康雄性SD大鼠(225±25)g由湖南农业大学实验动物中心提供，合格证：SCK(湘) 2003-003。

醋酸地塞米松片(批号：0712272) 安徽金太阳生化药业有限公司；腺嘌呤(批号：20040415) 中国惠兴生化试剂有限公司。

1.2 仪器与设备

AUT-560全自动生化分析仪 日本Olympus公司；电子分析天平 北京赛多利斯天平有限公司；YGL-16M高速台式冷冻离心机 长沙湘仪离心机仪器有限公司。

1.3 方法

1.3.1 动物模型的建立

取健康雄性SD大鼠64只，适应性饲养一周后，随机选出8只，作为正常对照组，以等体积蒸馏水灌胃作对照。其他56只大鼠灌胃腺嘌呤悬浊液250mg/(kg bw·d)，连续造模21d，使大鼠产生类似于人的肾衰竭症状[13]。腺嘌呤悬浊液为腺嘌呤纯品与蒸馏水混合后加入少许预先溶胀好的羧甲基纤维素钠助悬制得。

1.3.2 动物分组

造模5 d后，将5 6只大鼠随机分成4组：模型对照组、地塞米松组、低浓度白术多糖组、高浓度白术多糖组，每组1 4只。其中模型对照组和正常对照组灌胃等体积蒸馏水。地塞米松组灌胃地塞米松0.1mg/(kg bw·d)，CPL组灌胃低浓度多糖 400 mg/ (kg bw·d)，CPH组灌胃高浓度多糖 800mg/(kg bw·d)，连续给药21d。

1.3.3 指标检测

给药结束后，代谢笼动物单喂，分批次收集12h尿液，期间禁食禁水，测定总尿量。每个样品都用取样器精确吸取1mL尿液于带塞离心管中密封冷藏，于中南大学湘雅附三医院检测尿素(BUN)、尿肌酐(CR)、24h尿蛋白(24hU-TP)含量。眼眶后静脉丛采血，离心取血清，测定血清肌酐(Scr)、血尿素氮(B-BUN)、血清总蛋白(TP)和白蛋白(ALB)含量(由中南大学湘雅三医院检验斜测定)，测定肾功能指标。脱颈椎处死大鼠，剖腹取出肾脏，作病理检查。

1.3.4 统计方法

实验数据在LENOVO-compatible PC 机Windows XP系统下采用Excel2009进行计算和6SQ统计学处理，并用T-test来分析组间差异的显著性。结果以平均值±标准差(x±s)表示。

2 结果与分析

2.1 白术多糖对腺嘌呤致肾衰竭大鼠12h总尿量的影响

由表1可见，与正常对照组相比，其他4组12h排尿量均有增多，且有极显著性差异(P＜0.01)；提示腺嘌呤可对大鼠造成明显损伤；地塞米松组与模型对照组有显著性差异(P＜0.05)。低浓度白术多糖组及高浓度白术多糖组作用后可减少尿量，但与模型对照组相比，没有统计学意义。

2.2 白术多糖对大鼠肾脏系数和形态的影响

表2 白术多糖对大鼠肾脏系数的影响Table 2 Effect of AP on kidney coefficient of rats induced by adenine

由表2可知，模型对照组与正常对照组比较，模型对照组大鼠的双肾系数显著增大(P＜0.01)，提示腺嘌呤可致大鼠双肾系数增大，表明造成大鼠肾衰模型。低浓度白术多糖组及高浓度白术多糖组与模型对照组比较，其双肾系数均有明显减小(P＜0.01)，说明白术多糖对腺嘌呤致大鼠肾衰竭有一定的保护作用。

2.3 白术多糖对腺嘌呤致慢性肾衰模型大鼠肾功能的影响

如表1所示，正常大鼠尿液中尿素和尿肌酐的含量

明显多于模型对照组(P＜0.01)，提示腺嘌呤可致大鼠肾功能损害；低浓度白术多糖组及高浓度白术多糖组与模型对照组比较，对尿素的影响非常显著，可极显著性地降低肾衰大鼠尿液中的尿素水平(P＜0.01)，说明白术多糖对腺嘌呤致大鼠肾衰竭有一定的保护作用；12h尿蛋白的影响虽有差异性，但模型对照组与正常对照组及各给药组的区别似乎缺少规律，还有待进一步实验分析其原因。

3 讨 论

肾小管间质损伤是导致肾衰竭的主要因素。正常情况下，大鼠的双肾指数相对较小，不到1%，即正常大鼠的双肾质量不到其体质量的1%。而经过腺嘌呤诱导，造成大鼠肾衰后，其双肾系数增至原来的4倍以上。本实验应用腺嘌呤诱导大鼠肾衰，结果表明造模成功，与相关文献报导一致[14-17]。本实验结果显示，低浓度多糖和高浓度多糖能降低肾衰竭大鼠的尿素氮水平，说明低浓度多糖和高浓度多糖可能抑制病变肾脏滤过屏障泌尿功能和肾小管重吸收功能的衰退。

实验结果还显示，低浓度白术多糖和高浓度白术多糖提高肾衰竭大鼠代偿性尿量，延长高尿量时间，减轻腺嘌呤代谢物在肾小管中形成的结晶沉积，说明低浓度多糖和高浓度多糖可以增加肾衰竭肾脏循环血液量，改善肾小管间质区的缺氧状态和肾小管细胞的营养，抑制Na+-K+-ATP酶的磷酸化反应。低浓度多糖和高浓度多糖抑制肾衰竭大鼠肾脏的病理变化，阻止病变肾脏的增生，可能通过抗氧化作用抑制肾脏系膜细胞、间质成纤维细胞的增生和细胞间质物质(ECM)的积累，降低病理大鼠血Scr、BUN和阻止肾小球数的减少，其机制可能是与抑制Na+-K+-ATP的磷酸化反应增大肾脏血流量，促进肾脏中腺嘌呤代谢物等毒性物质的排泄有关。有关低浓度多糖和高浓度多糖防治肾衰竭的机制有待进一步研究。

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Protective Effect of Atractylodes rhizom Polysaccharides on Adenine-induced Renal Failure in Rats

FENG Xing1，QIU Xi-min1，HUANG Ya-lin1，LIU Xiong-zhi1，LI Sai1，ZHENG Ni2
(1. Medical College, Hunan Normal University, Changsha 410006, China；2. Zhu Jiang Hospital, Southern Medical University, Guangzhou 510515, China)

Objective∶ To investigate the preventive effect of Atractylodes rhizome polysaccharides (AP) on chronic renal failure (CRF) rats-induced by adenine. Methods∶ CRF model was induced by adenine. The rats were randomized into five groups, which were designated as control group, model group, groups administered with AP at the high (APH) and low dosages (APL), and dexamethasone group. After the administration, the rats were fed in metabolism cage. The urine was collected during 12 h period without food or water. The total volume of urine, blood urine nitrogen (BUN), urine creatinine (CR), and 12-hour urine protein (12 h U-TP) were determined. Meanwhile, renal index was also evaluated. Results∶ Compared with the model group, BUN levels of CPL and CPH groups exhibited a significant decrease (P＜0.01 or P＜0.05). Similarly, a significant declined coefficient was also observed (P＜0.01, P＜0.05). Conclusion∶ AP revealed a promising preventive effect on renal failure in rats.

Atractylodes rhizome polysaccharides (AP)；adenine；renal failure；rats；BUN；renal index

R965.1

A

1002-6630(2010)09-0276-03

2009-08-03

湖南省自然科学基金项目(08JJ3024)

冯星(1973—)，男，副教授，博士，主要从事天然产物活性研究。E-mail：fengxing01@hotmail.com